The invention discloses an ELISA kit for detecting Brucella antibody, which uses Omp31 gene to construct recombinant engineering bacteria, expresses Omp31 recombinant protein as the coating plate of the original prepared protein, and establishes an ELISA antibody detection kit. The kit has good specificity, high sensitivity, low detection cost and is suitable for popularization. It provides important methods in the detection of antibody level, epidemiological investigation, identification of symptoms and effective prevention and control measures. The main components of the kit were: Omp31 protein coating plate, positive control serum, negative control serum, enzyme-labeled rabbit anti-polyclonal antibody, substrate solution, termination solution, dilution solution, washing solution and serum dilution plate.
【技术实现步骤摘要】
一种检测布鲁氏杆菌抗体的ELISA试剂盒
本专利技术涉及ELISA试剂盒,尤其是一种检测布鲁氏杆菌抗体的ELISA试剂盒。
技术介绍
布鲁氏菌是一种革兰氏阴性、细胞内寄生菌,为小杆状菌,可以在很多种家畜体内存活,牛、羊、猪、狗以及骆驼、鹿等动物都可能被感染,通过接触感染动物或者被感染的食物以及实验室接触可传播给人类。对人造成感染的主要是马耳他布鲁氏杆菌(“马耳他热”),流产布鲁氏杆菌,牛、羊布鲁氏杆菌、猪布鲁氏杆菌和狗布鲁氏杆菌,其中以羊布鲁氏杆菌病最为多见。1886年英国军医Bruce在马尔他岛从死于“马尔他热”的士兵脾脏中分离出“布鲁氏菌”,首次明确了该病的病原体。人患病后,首先出现的症状是发烧,体温可达38-40℃,持续时间长,处于长期低热状态;有的人体温呈波浪状,即高热几天,体温降下来几天,又开始高,反复多次,所以布鲁氏杆菌病又称浪状热。布鲁氏杆菌病自出现至今,关于本病诊断方法与研究成果不断涌现。传统布鲁氏杆菌检测方法,由于其检测周期长、程序复杂、所需试剂繁多等缺点已远远不能满足现代检测要求。以聚合酶链式反应技术为代表的病原核酸检测技术在实际应用中存在一些 ...
【技术保护点】
1.一种检测布鲁氏杆菌抗体的ELISA试剂盒,其特征在于,包括Omp31重组蛋白包被板,所述Omp31重组蛋白是使用部分Omp31基因序列并经密码子优化后得到如序列表中的SEQ ID NO.1所示核苷酸序列全基因合成,经酶切后将Omp 31基因连接到pET‑28a(+)质粒中,经鉴定后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,诱导表达,亲和层析法分离纯化获得的。
【技术特征摘要】
1.一种检测布鲁氏杆菌抗体的ELISA试剂盒,其特征在于,包括Omp31重组蛋白包被板,所述Omp31重组蛋白是使用部分Omp31基因序列并经密码子优化后得到如序列表中的SEQIDNO.1所示核苷酸序列全基因合成,经酶切后将Omp31基因连接到pET-28a(+)质粒中,经鉴定后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,诱导表达,亲和层析法分离纯化获得的。2.根据权利要求1所述检测布鲁氏杆菌抗体的ELISA试剂盒,其特征在于,所述蛋白包被板的包被方法为:Om...
【专利技术属性】
技术研发人员:肖妍,赵祥平,霍蕾,董志珍,赵丹,张俊哲,刘河冰,马立才,杨若松,刘薇,
申请(专利权)人:天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心,
类型:发明
国别省市:天津,12
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