本发明专利技术公开了一种B群链球菌的检测方法及所用的B群链球菌显色平板，其中B群链球菌显色平板，每1L培养基中，含有胰酪胨20‑85g、动物蛋白胨4‑9g、酵母粉1‑5g、氯化钠5‑10g、显色底物0.1‑1g、抗生素0.1‑0.5g、琼脂2‑6g和余量的水。B群链球菌的检测方法，包括取样、接种和培养，其中，所述接种是将样本接种至所述的B群链球菌显色平板上，培养后出现紫色菌落，则B群链球菌为阳性。本发明专利技术的有益效果是：方便使用，提高检测效率。且针对性强，能够在很大程度上避免其他菌种的混淆。
Detection method of group B Streptococcus and colour plate of group B Streptococcus used
The invention discloses a detection method for group B Streptococcus and a colour developing plate for group B streptococcus, in which group B Streptococcus colour developing plate contains 20_85g of casein, 4_9g of animal protein, 1_5g of yeast powder, 5_10g of sodium chloride, 0.1_1g of colour developing substrate, 0.1_g of antibiotics, 0.5g of agar and the remaining amount of water in each L medium. The detection method of group B Streptococcus includes sampling, inoculation and culture, in which the inoculation is to inoculate the sample onto the colour plate of group B streptococcus, and the purple colony appears after culture, then group B streptococcus is positive. The invention has the advantages of convenient use and high detection efficiency. It has strong pertinence and can avoid confusion of other strains to a large extent.
【技术实现步骤摘要】
B群链球菌的检测方法及所用的B群链球菌显色平板
本专利技术涉及B群链球菌检测领域，具体涉及B群链球菌的检测方法及所用的B群链球菌显色平板。
技术介绍
B群链球菌是一种格兰阳性球菌，于1877年首次被发现，寄居于肠道和直肠，其可以导致严重的新生儿感染，可以导致围产儿死亡，同时也是孕产妇生殖道感染的中药致病菌，可以导致泌尿系统感染、羊膜绒毛膜炎、产褥感染、孕产妇败血症和早产。目前常用的检测B群链球菌的方法是利用培养基对去的样品进行培养，但是由于样品中的细菌种类较多，B群链球菌以外的细菌对B群链球菌的生长和显色可能会造成混淆，所以一种针对性强的B群链球菌的检测方法尤其必要。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种B群链球菌的检测方法及所用的B群链球菌显色平板，解决目前常用的检测B群链球菌的方法容易受到嗜酸乳杆菌、和粪肠球菌等的干扰的问题。为解决上述的技术问题，本专利技术采用以下技术方案：一种B群链球菌显色平板，每1L培养基中，含有胰酪胨20-85g、动物蛋白胨4-9g、酵母粉1-5g、氯化钠5-10g、显色底物0.1-1g、抗生素0.1-0.5g、琼脂2-6g和余量的水。作为优选的，每1L培养基中，含有胰酪胨50-65g、动物蛋白胨5-7g、酵母粉2-3g、氯化钠6-8g、显色底物0.3-6g、抗生素0.1-0.5g、琼脂2-6g和余量的水。培养基内添加有不同种类的蛋白胨，可以为链球菌生长提供丰富的营养；酵母粉提供维生素；氯化钠维持渗透压；琼脂是培养基凝固剂。抗生素抑制大部分革兰氏阴性菌的生长。显色底物提供细菌生长分解产生色原，使B群链球菌显示紫色，肠球菌类显示深蓝色，嗜酸乳杆菌等显示亮粉色，其他菌群显示蓝色或者无色。本申请中的显色平板需在2℃～8℃保存，有效期6个月。禁止冷冻，避光保存。一种B群链球菌的检测方法，包括取样、接种和培养，其中，所述接种是将样本接种至所述的B群链球菌显色平板上，培养后出现紫色菌落，则B群链球菌为阳性。作为优选的，所述取样的样本为怀孕35-37周的妇女或出生0-3周的新生儿。作为优选的，所述怀孕妇女样本采集方法：先擦去阴道分泌物，将一根无菌阴道拭子放入阴道下3/10-4/10处，旋转采取阴道分泌物；和/或使用一根棉拭子插入肛门，在肛门括约肌上2～3厘米处轻轻旋转采取直肠分泌物。作为优选的，所述新生儿样本采集方法为：无菌拭子在新生儿鼻腔或咽部旋转取分泌物；和/或采集新生儿的脑脊液、痰液或胃吸出物。作为优选的，所述接种采用划线接种法。作为优选的，所述培养温度为35℃-37℃。作为优选的，所述培养时间为18h-48h。B群链球菌生长良好，紫色菌落；粪肠球菌生长良好，深蓝色菌落；嗜酸乳杆菌抑制或抑制性生长，亮粉色菌落；大肠埃希菌、白色念珠菌不生长。如果平板没有按照要求进行保存，可能导致菌落显色不明显，不要放置在含二氧化碳的培养箱内培养，否则会出现假阳性。某些临床B群链球菌18h～24h菌落显示淡紫色，则需要延长至36h～48h判断结果。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：方便使用，提高检测效率。且针对性强，能够在很大程度上避免其他菌种的混淆。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例1：本实施例提供了一种B群链球菌显色平板，每1L培养基中，含有胰酪胨20g、动物蛋白胨9g、酵母粉1g、氯化钠5g、显色底物0.1g、抗生素0.1g、琼脂2g和余量的水。实施例2：本实施例提供了一种B群链球菌显色平板，每1L培养基中，含有胰酪胨85g、动物蛋白胨4g、酵母粉5g、氯化钠10g、显色底物1g、抗生素0.5g、琼脂6g和余量的水。实施例3：本实施例提供了一种B群链球菌显色平板，每1L培养基中，含有胰酪胨50g、动物蛋白胨7g、酵母粉2g、氯化钠6g、显色底物0.3g、抗生素0.1g、琼脂2g和余量的水。实施例4：本实施例提供了一种B群链球菌显色平板，每1L培养基中，含有胰酪胨65g、动物蛋白胨5g、酵母粉3g、氯化钠8g、显色底物6g、抗生素0.5g、琼脂6g和余量的水。实施例5：本实施例提供了一种B群链球菌显色平板，每1L培养基中，含有胰酪胨58g、动物蛋白胨6g、酵母粉2.5g、氯化钠7g、显色底物3g、抗生素0.3g、琼脂4g和余量的水。实施例6：本实施例提供了一种B群链球菌的检测方法，包括取样、接种和培养，其中，所述取样的样本为怀孕35-37周的妇女，所述怀孕妇女样本采集方法：先擦去阴道分泌物，将一根无菌阴道拭子放入阴道下3/10-4/10处，旋转采取阴道分泌物；所述接种是采用划线接种法将样本接种至所述的B群链球菌显色平板上；所述培养温度为35℃-37℃，所述培养时间为30h，培养后出现紫色菌落，则B群链球菌为阳性。实施例6：本实施例提供了一种B群链球菌的检测方法，包括取样、接种和培养，其中，所述取样的样本为怀孕35-37周的妇女，所述怀孕妇女样本采集方法：使用一根棉拭子插入肛门，在肛门括约肌上2～3厘米处轻轻旋转采取直肠分泌物；所述接种是采用划线接种法将样本接种至所述的B群链球菌显色平板上；所述培养温度为35℃-37℃，所述培养时间为18h，培养后出现紫色菌落，则B群链球菌为阳性。实施例6：本实施例提供了一种B群链球菌的检测方法，包括取样、接种和培养，其中，所述取样的样本为出生0-3周的新生儿；所述新生儿样本采集方法为：无菌拭子在新生儿鼻腔或咽部旋转取分泌物；和/或采集新生儿的脑脊液、痰液或胃吸出物；所述接种是采用划线接种法将样本接种至所述的B群链球菌显色平板上；所述培养温度为35℃-37℃，所述培养时间为48h，培养后出现紫色菌落，则B群链球菌为阳性。性能指标：1.微生物限度检查：平板在35℃～37℃条件下培养18-48h，以正常视力检查，可见污染菌生长的平板数不大于5％。2.生长试验：白色念珠菌菌悬液浓度为105CFU/mL，其他菌株菌悬液浓度为104CFU/mL。分别接种10μL稀释的菌悬液滴至实施例1-5所述的B群链球菌显色平板，平板划线35℃～37℃培养18h～48h，生长情况均符合表1要求。表1生长试验观察结果质控菌株观察结果B群链球菌(ATCC12386)生长良好，紫色菌落粪肠球菌(ATCC29212)生长良好，深蓝色菌落嗜酸乳杆菌(ATCC4356)抑制或者抑制性生长，蓝色菌落大肠埃希菌(ATCC25922)不生长白色念珠菌(ATCC10231)不生长注意：1.本平板的原理是利用不同种类菌株的特异性酶和生化代谢原理显色，因此，①一些气单胞菌可能出现淡紫色菌落，需要延长培养时间判断并进行过氧化氢酶实验：过氧化氢酶阳性为气单胞菌、过氧化氢酶阴性为B群链球菌；②一些罕见的葡萄球菌可能出现紫色菌落，采用过氧化氢酶实验鉴别：过氧化氢酶阳性为葡萄球菌、过氧化氢酶阴性为B群链球菌。2.大多数的A群链球菌为紫色菌落，结果出现假阳性，需要做PYR(吡咯烷酮芳基酰胺酶)进行鉴定：①PYR(+)：A群链球菌；②PYR(-)：B群链球菌。尽管这里参照本专利技术的多个解释性实施例对本专利技术进行了描述，但是，应该理解，本领域技术人员可以设计出很多其他的修改和实施方式本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种B群链球菌显色平板，其特征在于：每1L培养基中，含有胰酪胨20‑85g、动物蛋白胨4‑9g、酵母粉1‑5g、氯化钠5‑10g、显色底物0.1‑1g、抗生素0.1‑0.5g、琼脂2‑6g和余量的水。
【技术特征摘要】
1.一种B群链球菌显色平板，其特征在于：每1L培养基中，含有胰酪胨20-85g、动物蛋白胨4-9g、酵母粉1-5g、氯化钠5-10g、显色底物0.1-1g、抗生素0.1-0.5g、琼脂2-6g和余量的水。2.根据权利要求1所述的B群链球菌显色平板，其特征在于，每1L培养基中，含有胰酪胨50-65g、动物蛋白胨5-7g、酵母粉2-3g、氯化钠6-8g、显色底物0.3-6g、抗生素0.1-0.5g、琼脂2-6g和余量的水。3.一种B群链球菌的检测方法，其特征在于，包括取样、接种和培养，其中，所述接种是将样本接种至权利要求1-2任意一项所述的B群链球菌显色平板上，培养后出现紫色菌落，则B群链球菌为阳性。4.根据权利要求1所述的B群链球菌的检测方法，其特征在于，所述取样的样本为怀孕35-37周的妇女...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙月鹏，
申请(专利权)人：中秀科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41
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