【技术实现步骤摘要】
基于吡啶二甲醛的蛋白质偶联物的制备方法
本专利技术涉及生物医药领域，具体地，本专利技术涉及基于吡啶二甲醛的蛋白质偶联物的制备方法。
技术介绍
近十几年来，生物学和化学生物学的快速发展极大地推动了蛋白质药物的研发，越来越多的蛋白质药物被美国食品与药物管理局(FDA)批准用于疾病的治疗，与此同时，蛋白质-偶联物，作为一类新型生物大分子衍生物受到越来越多的关注。蛋白质-偶联物是指蛋白质通过共价键或非共价键与其他官能化组分偶联而形成的一种生物杂化体，在保留蛋白质特性(如精准结构与生物功能)的同时，还往往可以获得来自于新组分的特性，这些集合了不同特性的生物偶联物，尤其是蛋白质-聚合物偶联物可广泛应用于生物催化、分子诊断、分子影像、生物材料、药物递送、生物分子递送、组织工程、再生医学、靶向治疗、生物治疗等生物医药领域。蛋白质-偶联物经过多代的变革，在生物医药中得到应用，但是目前的蛋白质-高分子偶联技术仍然存在一系列急需解决的关键共性的科学问题，如偶联位点选择性差、偶联效率低和缺乏通用平台技术等，严重制约了蛋白质-偶联物在生物医药中的广泛应用。
技术实现思路
本申请是基于专利技术人...
【技术保护点】
1.一种修饰蛋白质N末端的方法，其特征在于，包括：将待修饰蛋白质与式(I)所示化合物进行接触，以便获得经过N末端修饰的所述蛋白质，其中，所述蛋白质N末端的第二个氨基酸不为脯氨酸，
【技术特征摘要】
1.一种修饰蛋白质N末端的方法，其特征在于，包括：将待修饰蛋白质与式(I)所示化合物进行接触，以便获得经过N末端修饰的所述蛋白质，其中，所述蛋白质N末端的第二个氨基酸不为脯氨酸，2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述蛋白质为干扰素、绿色荧光蛋白、肌红蛋白、RNA酶、牛血清白蛋白、人血清白蛋白或葡萄糖氧化酶；优选地，所述蛋白质在25摄氏度下10-16小时内稳定；任选地，所述接触是在25℃的条件下进行16小时；任选地，所述待修饰蛋白质与式(I)所示化合物的摩尔比为1:200；任选地，所述式(I)所示化合物预先溶于pH为7.4的磷酸盐缓冲溶液中；任选地，所述pH为7.4的磷酸盐缓冲溶液中，进一步包括NaCl，乙二胺四乙酸。3.一种制备蛋白质-偶联物的方法，其特征在于，1)利用权利要求1～2任一项所述方法对蛋白质进行N末端修饰处理；2)将步骤1)所获得的产物与待偶联分子进行亲核加成反应，所述待偶联分子具有羟胺官能团或肼官能团。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述待偶联分子具有羟胺官能团，所述亲核加成反应是在温度为4-37℃，优选为25℃的条件下进行2-36小时，优选为16小时；任选地，所述步骤1)所获得的产物预先溶于pH为5.5的磷酸盐缓冲溶液中，所述pH为5.5的磷酸盐缓冲溶液进一步包括NaCl；任选地，所述步骤1)所获得的产物，磷酸盐以及NaCl的摩尔比为0.15:50:150；任选地，所述待偶联分子具有羟胺官能团，所述待偶联分子具有式(II)所示结构，其中，A基团独立地为原子转移自由基聚合引发剂、荧光分子、化疗药物、聚合物、小肽、蛋白质、点击化学相关基团；任选地，所述待偶联分子具有式(1)～(7)所示结构，其中，各a、b、c、d、e、f各自独立地为1-10所述的正整数；n为25-500，式(7)所示化合物的数均分子量为5000；任选地，所述式(1)～式(6)所述的化合物与蛋白质的摩尔比为(10-100):1；任选地，所述式(7)所述的化合物与蛋白质的摩尔比为(10-300)：1，优选为50:1；任选地，所述待偶联分子具有式(8)所示结构，所述蛋白质的表面不具有游离巯基；任选地，所述式(8)所述的化合物与所述蛋白质的摩尔比为(10-100):1，优选为25:1；任选地，所述待偶联分子具有式(9)所示结构；任选地，所述式(9)所述的化合物与蛋白质的摩尔比为(10-100):1；任选地，所述待偶联分子具有式(3)、式(6)、式(9)所示的结构，进一步包括将亲核加成反应产物与单体化合物进行原位原子转移自由基聚合反应，以便获得蛋白质-高分子偶联物；任选地，所述单体化合物包括水溶性的甲基丙烯酸酯类、丙烯酸酯类、甲基丙烯酰胺类、丙烯酰胺类单体；优选地，所述单体化合物包括寡聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯、2-甲基丙烯酰氧乙基磷酰胆碱、丙烯酰胺、糖单体；任选地，所述待偶联分子具有式(8)所示的结构，进一步包括将亲核加成反应产物与含巯基聚合物进行连接反应，以便获得蛋白质-聚合物偶联物；任选地，所述亲核加成反应产物与所述含巯基聚合物的摩尔比为1:(1-...
【专利技术属性】
技术研发人员：高卫平，孙佳维，赵文国，刘欣宇，
申请(专利权)人：清华大学，
类型：发明
国别省市：北京,11
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