人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒及评估方法技术

本发明专利技术提供一种人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒及评估方法。本发明专利技术的人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒包括：带第一荧光素标记的抗人CD3抗体、带第二荧光素标记的抗人CD25抗体、带第三荧光素标记的抗人CD4抗体、带第四荧光素标记的抗人CD8抗体、带第五荧光素标记的抗人CD45RA抗体、带第六荧光素标记的抗人CCR7抗体、带第七荧光素标记的抗人CD28抗体、带第八荧光素标记的抗人CD127抗体。本发明专利技术的人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒可用于对人体外周血T细胞的免疫功能进行综合评估，使用方便，且对人体安全。

A Simplified Evaluation Kit for T Cell Immune Function in Human Peripheral Blood and Its Evaluation Method

The present invention provides a simplified assessment kit for human peripheral blood T cell immune function and an evaluation method. The simplified assessment kit for human peripheral blood T cell immune function includes: anti-CD3 antibody labeled with first fluorescein, anti-CD25 antibody labeled with second fluorescein, anti-CD4 antibody labeled with third fluorescein, anti-CD8 antibody labeled with fourth fluorescein, anti-CD45RA antibody labeled with fifth fluorescein, anti-CCR7 antibody labeled with sixth fluorescein. Anti-CD28 antibody labeled with seventh fluorescein and anti-CD127 antibody labeled with eighth fluorescein. The simplified evaluation kit of human peripheral blood T cell immune function can be used for comprehensive evaluation of human peripheral blood T cell immune function, which is convenient to use and safe to human body.

【技术实现步骤摘要】
人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒及评估方法
本专利技术涉及医疗领域，尤其涉及一种人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒及评估方法。
技术介绍
T淋巴细胞来源于骨髓的多能干细胞(胚胎期则来源于卵黄囊和肝)。在人体胚胎期和初生期，骨髓中的一部分多能干细胞或前T细胞迁移到胸腺内，在胸腺激素的诱导下分化成熟，成为具有免疫活性的T细胞。成熟的T细胞经血流分布至外周免疫器官的胸腺依赖区定居，并可经淋巴管、外周血和组织液等进行再循环，发挥细胞免疫及免疫调节等功能。T细胞的再循环有利于广泛接触进入体内的抗原物质，加强免疫应答，较长期保持免疫记忆。T细胞的细胞膜上有许多不同的标志，主要是表面抗原和表面受体，这些表面标志都是结合在细胞膜上的巨蛋白分子。人体T细胞的免疫功能与各类疾病的发生、进展均有直接相关性，比如肿瘤的发生、发展过程就是因为人体自身免疫细胞功能长期下调或受到抑制的结果。但是，纵观国内外研究文献发现，目前国际上还没有用于专门评估人体外周血免疫细胞如T细胞功能的方法。目前国内外临床、第三方检测机构评价人体免疫功能的方法还停留在单一细胞的数量与比例等常规指标。比如，医院的血常规仅仅给出了白细胞的数量范围和比例，如CD3细胞的数量与比例、CD4+T细胞的数量与比例等，这些数据对医生进行临床诊断的参考意义不大。目前，临床和第三方检测机构都没有能够综合评估人体T细胞的免疫功能的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的首先在于提供一种人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒，能够结合流式细胞仪用于对人体外周血T细胞的免疫功能进行综合评估，使用方便、安全。本专利技术的目的还在于提供一种人体外周血T细胞免疫功能评估方法，能够对人体外周血T细胞的免疫功能进行综合评估。为实现以上目的，本专利技术首先提供一种人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒，包括：带第一荧光素标记的抗人CD3抗体、带第二荧光素标记的抗人CD25抗体、带第三荧光素标记的抗人CD4抗体、带第四荧光素标记的抗人CD8抗体、带第五荧光素标记的抗人CD45RA抗体、带第六荧光素标记的抗人CCR7抗体、带第七荧光素标记的抗人CD28抗体、带第八荧光素标记的抗人CD127抗体。可选的，所述抗人CD3抗体、抗人CD25抗体、抗人CD4抗体、抗人CD8抗体、抗人CD45RA抗体、抗人CCR7抗体、抗人CD28抗体、抗人CD127抗体均为单克隆抗体。可选的，所述抗人CD3抗体、抗人CD25抗体、抗人CD4抗体、抗人CD8抗体、抗人CD45RA抗体、抗人CCR7抗体、抗人CD28抗体、抗人CD127抗体中的任意一种为粉剂或者液体制剂。可选的，所述抗人CD3抗体、抗人CD25抗体、抗人CD4抗体、抗人CD8抗体、抗人CD45RA抗体、抗人CCR7抗体、抗人CD28抗体、抗人CD127抗体均采用抗体试剂管封装，所述抗体试剂管为透光率在10％以下的棕色塑料管。优选的，所述抗体试剂管的透光率为零，即完全不透光。可选的，所述抗体试剂管中盛装的抗体为液体制剂时，所述抗体试剂管中抗体的体积为0.5ml-2.5ml。可选的，所述抗人CD3抗体、抗人CD25抗体、抗人CD4抗体、抗人CD8抗体、抗人CD45RA抗体、抗人CCR7抗体、抗人CD28抗体、抗人CD127抗体均为液体制剂。可选的，所述抗人CD3抗体、抗人CD25抗体、抗人CD4抗体、抗人CD8抗体、抗人CD45RA抗体、抗人CCR7抗体、抗人CD28抗体、抗人CD127抗体中的至少一种为粉剂，所述人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒还包括磷酸盐缓冲液。可选的，所述第一荧光素标记、第二荧光素标记、第三荧光素标记、第四荧光素标记、第五荧光素标记、第六荧光素标记、第七荧光素标记、第八荧光素标记为PerCP-Cy5.5、APC-H7、BV510、PE-Cy7、BV421、AF647、PE、FITC的任意排列组合。本专利技术还提供一种人体外周血T细胞免疫功能评估方法，包括如下步骤：步骤1、提供如上文所述的人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒；从2ml-10ml人体外周血中提取外周血单个核细胞；步骤2、当所述人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒中的所有抗体均为液体制剂时，从所有抗体中分别取1μl-5μl，全部与所述外周血单个核细胞进行混合，在2℃-6℃条件下避光孵育10分钟至30分钟，得到细胞检测样本；当所述人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒中至少有一种抗体为粉剂时，首先采用磷酸盐缓冲液将粉剂溶解为抗体溶液，之后从所有液体形式的抗体中分别取1μl-5μl，全部与所述外周血单个核细胞进行混合，在2℃-6℃条件下避光孵育10分钟至30分钟，得到细胞检测样本；所述液体制剂中抗体的浓度为0.1-2mg/ml；所述粉剂与磷酸盐缓冲液混合后得到的抗体溶液中抗体的浓度为0.1-2mg/ml；步骤3、采用流式细胞仪对所述细胞检测样本进行检测分析。本专利技术的有益效果：本专利技术的人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒能够结合流式细胞仪用于对人体外周血T细胞的免疫功能进行综合评估，使用方便，且对人体安全，该试剂盒可用于人体免疫健康管理评价以及相关感染患者的免疫功能评估等多种免疫功能评估项目中。本专利技术的人体外周血T细胞免疫功能评估方法能够对人体外周血T细胞的免疫功能进行综合评估，操作步骤简单，操作过程安全。本专利技术在国际范围内第一次建立了对人体外周血T细胞的免疫功能进行综合评估的方法，采用了多种免疫功能指标对人体外周血T细胞的免疫功能进行综合评估，若判断人体外周血T细胞的免疫功能过低，则提示被检测者采用免疫治疗等干预手段对自身的免疫功能进行提升，提升人体的健康状态。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对本专利技术范围的限定。图1展示了采用本专利技术的人体外周血T细胞免疫功能评估方法对人体外周血T细胞进行检测分析后得到的部分结果。具体实施方式如本文所用之术语：“由……制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。连接词“由……组成”排除任何未指出的要素、步骤或组分。如果用于权利要求中，此短语将使权利要求为封闭式，使其不包含除那些描述的材料以外的材料，但与其相关的常规杂质除外。当短语“由……组成”出现在权利要求主体的子句中而不是紧接在主题之后时，其仅限定在该子句中描述的要素；其它要素并不被排除在作为整体的所述权利要求之外。当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1～5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1～4”、“1～3”、“1～2”、“1～2和4～5”、“1～3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒，其特征在于，包括：带第一荧光素标记的抗人CD3抗体、带第二荧光素标记的抗人CD25抗体、带第三荧光素标记的抗人CD4抗体、带第四荧光素标记的抗人CD8抗体、带第五荧光素标记的抗人CD45RA抗体、带第六荧光素标记的抗人CCR7抗体、带第七荧光素标记的抗人CD28抗体、带第八荧光素标记的抗人CD127抗体。

【技术特征摘要】
1.一种人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒，其特征在于，包括：带第一荧光素标记的抗人CD3抗体、带第二荧光素标记的抗人CD25抗体、带第三荧光素标记的抗人CD4抗体、带第四荧光素标记的抗人CD8抗体、带第五荧光素标记的抗人CD45RA抗体、带第六荧光素标记的抗人CCR7抗体、带第七荧光素标记的抗人CD28抗体、带第八荧光素标记的抗人CD127抗体。2.如权利要求1所述的人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒，其特征在于，所述抗人CD3抗体、抗人CD25抗体、抗人CD4抗体、抗人CD8抗体、抗人CD45RA抗体、抗人CCR7抗体、抗人CD28抗体、抗人CD127抗体均为单克隆抗体。3.如权利要求1所述的人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒，其特征在于，所述抗人CD3抗体、抗人CD25抗体、抗人CD4抗体、抗人CD8抗体、抗人CD45RA抗体、抗人CCR7抗体、抗人CD28抗体、抗人CD127抗体中的任意一种为粉剂或者液体制剂。4.如权利要求3所述的人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒，其特征在于，所述抗人CD3抗体、抗人CD25抗体、抗人CD4抗体、抗人CD8抗体、抗人CD45RA抗体、抗人CCR7抗体、抗人CD28抗体、抗人CD127抗体均采用抗体试剂管封装，所述抗体试剂管为透光率在10％以下的棕色塑料管。5.如权利要求4所述的人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒，其特征在于，所述抗体试剂管的透光率为零，即完全不透光。6.如权利要求4所述的人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒，其特征在于，所述抗体试剂管中盛装的抗体为液体制剂时，所述抗体试剂管中抗体的体积为0.5ml-2.5ml。7.如权利要求3所述的人体外周血T细胞免疫功能精简评估试剂盒，其特征在于，所述抗人CD3抗体、抗人CD25抗体、抗人CD4抗体、抗人CD8抗体、抗人CD45...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹芝南，吴扬哲，
申请(专利权)人：东莞暨南大学研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44