The invention relates to the field of biomedical technology, and provides a nano-antibody, preparation method and application against sea snake neurotoxin. The nano-antibody against sea snake neurotoxin is a VHH antibody with the amino acid sequence shown in SEQ ID NO.1. The nucleotide sequence encoding the nano-antibody is shown in SEQ ID NO.2. The nano-antibody of the invention has good affinity by affinity analysis. Heli, through small animal experiments, it has been proved that no neurotoxic symptoms occurred in mice of the antibody protection group after injecting SN36, and the lethal situation of non-toxic elements for one month has been observed continuously. It shows that the nano-antibody of the invention has excellent anti-SEA snake toxin effect, and has excellent preventive or therapeutic effect on sea snake bites. It has broad clinical application prospects.
【技术实现步骤摘要】
抗海蛇神经毒素的纳米抗体、制备方法及用途
本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种抗海蛇神经毒素的纳米抗体、其制备方法和用途，尤其是在制备海蛇抗毒制剂以及在治疗或预防海蛇咬伤方面的用途。
技术介绍
作为海洋大国，建设一支强有力的海军是我国军队建设的关键问题。然而在沿海海域存在的有毒有害的海洋生物会对海军战士存在潜在威胁，因此对海洋生物伤的防治研究工作对于渡海登陆作战的卫勤保障和医疗工作有重大意义，所以必须尽快着手开展抗海洋生物伤的科学应用研究。平颏海蛇是一种典型的有毒海洋生物，属眼镜蛇科，俗名棘海蛇，主要分布于东印度洋印澳海域、澳大利亚及菲律宾沿海以及我国台湾岛以及福建、山东、中国香港、海南、广西等地。平颏海蛇咬伤事件时常发生，对这些地区的海洋作业及军事训练构成一定的威胁。目前对海蛇咬伤的治疗措施主要为排出毒液、减少毒液吸收和抗毒治疗等。虽然尽早注射特种抗毒血清或抗体药物等抗毒制剂是最有效的急救治疗措施，然而直接使用蛇毒毒素免疫动物的方法来获得抗毒血清或筛选多/单克隆抗体的方法具有以下缺点：首先是海蛇捕捉困难，难以获得大量的天然海蛇毒素进行动物免疫，从毒腺中分...
【技术保护点】
1.一种抗海蛇神经毒素的纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体为VHH抗体，具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。
【技术特征摘要】
1.一种抗海蛇神经毒素的纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体为VHH抗体，具有SEQIDNO.1所示的氨基酸序列。2.编码权利要求1所述的抗海蛇神经毒素的纳米抗体的核苷酸，其特征在于，所述核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。3.权利要求1所述的抗海蛇神经毒素的纳米抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(A)全基因合成抗海蛇神经毒素的纳米抗体VHH片段；(B)采用PCR技术对步骤(A)中获得的抗海蛇神经毒素的纳米抗体VHH片段进行克隆，PCR产物经琼脂糖凝胶电泳纯化回收并克隆到表达载体中，测序验证后确认获得正确的克隆；(C)将上述表达载体引入宿主细胞内进行融合蛋白的表达。4.根据权利要求3所述的抗海蛇神经毒素的纳米抗体的制备方法，其特征在于：其中，在步骤(B)中，PCR所采用的引物序列如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示。5.根据权利要求3所述的抗海蛇神经毒素6的纳米抗体的制备...
【专利技术属性】
技术研发人员：胡适，刘烁吾，雷长海，李天，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：上海,31
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