The invention relates to the field of biotechnology, and discloses a hybridoma cell line (R3C7) and a monoclonal antibody produced from the hybridoma cell line. The monoclonal antibody of the invention can specifically bind to p16 protein without cross reaction with other intracellular proteins, thus significantly improving the specificity, accuracy and reliability of p16 protein immunoassay.
【技术实现步骤摘要】
大鼠抗p16蛋白的单克隆抗体的制备
本专利技术属于生物
,具体涉及一种可以识别人p16蛋白质分子的大鼠单克隆抗体及其制备方法。
技术介绍
人细胞周期依赖性激酶抑制基因(CDKN2A)为抑癌基因,编码两种不同的细胞周期抑制蛋白p16INK4a和p14ARF。p16INK4a简称p16,是由外显子1α、2和3编码。P16分子定位于细胞核及细胞质,能特异性的结合细胞分裂周期关键酶CDK4或CDK4与细胞周期素(Cyclin)的复合体,参与G1-S转换的调控,抑制CDK4的活性,阻止细胞进入S期,对RB基因控制的细胞增殖周期中起负调节作用。由于p16参与调控细胞周期的作用,所以其在肿瘤发生过程中也发挥着重要作用。多项研究表明,p16表达量的变化及突变的发生与肺癌、肝癌、恶性胶质瘤、黑素瘤、卵巢癌、膀胱癌、胰腺癌、胃癌、结肠癌、宫颈癌等多肿瘤的发生相关。目前临床上主要通过免疫组织化学(IHC)病理实验检测肿瘤组织中p16蛋白的表达状况。IHC实验的核心为特异性结合p16蛋白的单克隆抗体,其性能的优劣直接决定着整个检测的灵敏度和特异性。因此,研制出一种结合特异性较高的针 ...
【技术保护点】
1.一种单克隆抗体,其特征在于,其与p16蛋白特异性结合。
【技术特征摘要】
1.一种单克隆抗体,其特征在于,其与p16蛋白特异性结合。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体,其特征在于,所述抗p16单克隆抗体由大鼠杂交瘤细胞株R3C7分泌产生。3.根据权利要求2所述的抗p16单克隆抗体,其特征在于,获得所述抗p16单克隆抗体时免疫大鼠用抗原为重组p16抗原蛋白,所述重组p16抗原蛋白经大肠杆菌重组表达而获得。4.根据权利要求3所述的抗p16单克隆抗体,其特征在于,所述重组p16抗原蛋白包括以下一个或几个部分:具有抗原性的p16片段和用于重组蛋白的蛋白标签。5.根据权利要求4所述的抗p16单克隆抗...
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