建立时间分辨荧光免疫层析法检测MxA试剂盒制造技术

一种建立时间分辨荧光免疫层析法检测MxA试剂盒，属于基因重组及蛋白制备技术领域。本发明专利技术的目的是用SF9细胞表达Flag‑MxA，纯化出MxA蛋白，作为校准品。制备时间分辨荧光免疫层析法检测MxA试纸卡，用时间分辨荧光免疫法分析仪测定试纸卡荧光强度，进一步获得样品中MxA浓度的建立时间分辨荧光免疫层析法检测MxA试剂盒。本发明专利技术包括试纸卡和低渗溶液；在底板上顺次相互搭接经过处理的样品垫、吸附有MxA抗体‑荧光微球的结合垫、包被有检测线和质控线的硝酸纤维素膜和吸水垫，组装后形成试纸板，然后切割成3‑5mm宽的试纸条，将试纸条装入塑料外壳形成试纸卡。本发明专利技术采用昆虫细胞系统表达MxA，昆虫细胞近似于人体细胞，但产量高，成本低，能大量生产。

【技术实现步骤摘要】
建立时间分辨荧光免疫层析法检测MxA试剂盒
本专利技术属于基因重组及蛋白制备

技术介绍
感染性疾病是指由致病微生物（细菌、病毒、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体、真菌等）通过不同方式引起人体发生感染并出现临床症状的疾病，其中最常见是细菌和病毒感染，需要快速诊断细菌或病毒感染，指导临床治疗方向。临床上常用检测血清中降钙素原（Procalcitonin,PCT）指标，来快速诊断细菌感染发生，指导抗细菌感染治疗。目前，还没有一个血液学指标能诊断病毒感染发生，需要寻找判定病毒感染血液指标，而血液中单核细胞产生粘病毒抗性基因蛋白A(MyxovirusresistanceproteinA，MxA）有潜力作为病毒感染指标,用于早期诊断病毒感染发生。MxA是血液单核细胞质中蛋白，MxA基因位于21号染色体长臂远端(21q22),经IFN-α/β处理细胞，诱导产生78KDaMxA蛋白，MxA属于大GTP酶的动态蛋白(dynamin)超家族成员，MxA的特征是相对高分子量,自我聚合倾向,相对比较低GTP亲和力和高GTP水解速率，不同种群MxA蛋白间的同源性很高。MxA蛋白主要由3个区域组成:(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种建立时间分辨荧光免疫层析法检测MxA试剂盒，其特征在于：包括试纸卡和低渗溶液；在底板上顺次相互搭接经过处理的样品垫、吸附有MxA抗体‑荧光微球的结合垫、包被有检测线和质控线的硝酸纤维素膜和吸水垫，组装后形成试纸板，然后切割成3‑5mm宽的试纸条，将试纸条装入塑料外壳形成试纸卡。

【技术特征摘要】
1.一种建立时间分辨荧光免疫层析法检测MxA试剂盒，其特征在于：包括试纸卡和低渗溶液；在底板上顺次相互搭接经过处理的样品垫、吸附有MxA抗体-荧光微球的结合垫、包被有检测线和质控线的硝酸纤维素膜和吸水垫，组装后形成试纸板，然后切割成3-5mm宽的试纸条，将试纸条装入塑料外壳形成试纸卡。2.根据权利要求1所述的建立时间分辨荧光免疫层析法检测MxA试剂盒，其特征在于：硝酸纤维素膜上包被有MxA抗体形成检测线和抗IgG抗体形成质控线。3.根据权利要求1所述的建立时间分辨荧光免疫层析法检测MxA试剂盒，其特征在于：荧光微球表面修饰官能团为羧基、羟基或环氧基的一种，直径为100-500nm；根据权利要求1所述的荧光微球标记镧系元素螯合物，包括铕(Eu)、钐(Sm)、铒(Er)、钕(Nd)螯合物中一种；进一步优选为铕螯合物(EuropiumChelate)，激发波长是420nm，发射波长是615nm。4.根据权利要求1所述的建立时间分辨荧光免疫层析法检测MxA试剂盒，其特征在于：低渗溶液是Tris,磷酸盐，碳酸盐缓冲液，盐浓度低于10mm,含0.1-0.5%NP-40,用于裂解细胞，释放出细胞内的蛋白。5.根据权利要求1所述的建立时间分辨荧光免疫层析法检测MxA试剂盒，其特征在于：所用时间分辨荧光免疫层析（TRFIA）分析仪，波长350-430nm激发光作用后，延时100-400uS，再测定波长600-6...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘斌，李宝民，关恒，张蕾，刘戈，赵青，史永丰，刘宁，李添伟，隋宝珍，张金玲，仇淑园，孙净，黄景林，高敏，孙晓婷，林林，朱道林，孙玉峰，王贺，
申请(专利权)人：吉林大学，长春恒晓生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：吉林,22