一种胚胎培养液及一种体细胞克隆胚胎的处理方法技术

技术编号:20155218 阅读:38 留言:0更新日期:2019-01-19 00:07
本发明专利技术公开了一种胚胎培养液,其中含有200~400nM的如结构式(1)所示的化合物。该胚胎培养液效果明显,其克隆胚胎的囊胚率极显著提高,从而提高了克隆技术的效率。本发明专利技术还公开了一种体细胞克隆胚胎的处理方法,该体细胞克隆胚胎的处理方法操作简单,效果明显,可以极显著地提高包括但不局限于猪、牛、羊、鼠、人的克隆胚胎的体细胞核移植胚胎体外发育效率。

【技术实现步骤摘要】
一种胚胎培养液及一种体细胞克隆胚胎的处理方法
本专利技术涉及细胞体外克隆
,特别涉及一种胚胎培养液及一种体细胞克隆胚胎的处理方法。
技术介绍
尽管已有很多动物通过体细胞克隆技术获得成年个体,但该技术效率低下仍是限制应用的主要原因。目前的研究表明,效率低主要是有克隆胚胎重编程异常造成的,如组蛋白低乙酰化和DNA高甲基化。克隆胚胎供体细胞核的大部分重编程发生在胚胎基因组激活前的早期胚胎中,组蛋白乙酰化是一种表观遗传修饰,是胚胎基因激活的关键因素之一。组蛋白乙酰转移酶作用于组蛋白使之发生乙酰化后,会导致染色质构象松散,允许转录因子的接近,从而使转录发生,激活基因重编程。而组蛋白去乙酰化酶的作用则相反,能够使组蛋白去乙酰化,抑制转录,降低胚胎重编程效率。使用完全分化的体细胞构建克隆胚胎,体细胞是定向转录的,其组蛋白去乙酰化酶含量较高,抑制了转录激活和基因表达,从而导致了克隆效率低下,因此采用抑制组蛋白去乙酰化酶是提高克隆效率的有效手段。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种胚胎培养液。本专利技术的另一个目的是提供一种体细胞克隆胚胎的处理方法。根据本专利技术的一个方面,提供了一种胚胎本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种胚胎培养液,其特征在于,其中含有200~400nM的如结构式(1)所示的化合物:

【技术特征摘要】
1.一种胚胎培养液,其特征在于,其中含有200~400nM的如结构式(1)所示的化合物:2.根据权利要求1所述的胚胎培养液,其特征在于,其中含有200nM、300nM或者400nM的所述化合物。3.根据权利要求1所述的胚胎培养液,其特征在于,其组成份及其含量分别为:其中,LAQ824为所述化合物。4.一种体细胞克隆胚胎的处理方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、激活核移植重构胚;S2、转入权利要求1或2或3所述的胚胎培养液中培养24h;S3、更换为普通胚胎培养液,继续培养至168h。5.根据权利要求4所述的体细胞克隆胚胎的处理方法,其特征在于,所述克隆胚胎所有哺乳动物的克隆胚胎的其中之一。6.根据权利要求4所述的体细胞克隆胚胎的处理方法,其特征在于,所述S1步骤包括:将卵母细胞使用显微操作仪去除极体及附近约15%的胞质,然后使用荧光染料染色2min,并在荧光显微镜下观察,废弃未完全去掉核的卵母细胞,在去除完全的所述卵母细胞的卵周隙注入一个供体细胞完成重构胚胎,所述重构胚胎放入电融合液后,使用85v/mm、60μs、2次脉冲将所述重构胚胎融合,然后将所述重构胚胎转移到胚胎培养液中孵育1h,挑选融合的所述重构胚胎使用80v/mm、80μ...

【专利技术属性】
技术研发人员:吴珍芳石俊松周荣罗绿花麦然标余婉娴贺晓燕蔡更元
申请(专利权)人:温氏食品集团股份有限公司
类型:发明
国别省市:广东,44

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