提高囊胚率的小鼠精子体外培养试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术公开了提高囊胚率的小鼠精子体外培养试剂盒及小鼠受精方法。当前小鼠体外受精的囊胚率较低，不利于依托小鼠胚胎的辅助生殖技术研究的展开。本发明专利技术提高囊胚率的小鼠精子体外培养试剂盒，包括a毫升的mHTF、b毫克的BSA、c微克的ERO1L重组蛋白和d微克的DPEP2重组蛋白。a:b:c:d＝2:20:1:2。ERO1L重组蛋白为内质网氧化还原酶1类似蛋白，在DNA序列数据库中的基因ID为50527。DPEP2重组蛋白为二肽酶‑2，在DNA序列数据库中的基因ID为319446。本发明专利技术在试剂盒中加入ERO1L重组蛋白和DPEP2重组蛋白，使得本发明专利技术能够显著提升精子活力和囊胚率。

A Kit for Mouse Sperm Culture in Vitro to Increase Blastocyst Rate and Its Application

The invention discloses a mouse sperm culture kit in vitro for improving blastocyst rate and a mouse fertilization method. At present, the blastocyst rate of in vitro fertilization of mice is low, which is not conducive to the development of assisted reproductive technology based on mouse embryos. The kit for improving blastocyst rate of mouse sperm culture in vitro includes a milliliter of mHTF, B milligram of BSA, C microgram of ERO1L recombinant protein and D microgram of DPEP2 recombinant protein. A:b:c:d=2:20:1:2. ERO1L recombinant protein is endoplasmic reticulum reductase-1-like protein, and the gene ID in DNA sequence database is 50527. DPEP2 recombinant protein is dipeptidase 2, and the gene ID in DNA sequence database is 319446. The invention adds ERO1L recombinant protein and DPEP2 recombinant protein in the kit, so that the invention can significantly improve sperm vitality and blastocyst rate.

【技术实现步骤摘要】
提高囊胚率的小鼠精子体外培养试剂盒及其使用方法
本专利技术属于培养试剂盒
，具体涉及一种提高小鼠精子活力及囊胚率的体外培养试剂盒及其使用方法。
技术介绍
受精是精子与卵子相互结合而形成受精卵(合子)的过程，它标志着新生命的开端。在此过程中，精子和卵子携带者分别来自父本和母本的遗传物质，精子和卵子的质量决定着早期胚胎发育的成败。目前，对于受精这一神秘的生物学事件的认知大多来自体外受精的研究。然而，迄今为止，人类对受精的认识尚未穷尽，还需要倚重体外受精技术来进一步研究受精机制。小鼠模型是目前体外受精研究的重要手段，因此，受精科学研究需要使用、消耗大量的小鼠胚胎。然而，根据研究表明，现有小鼠胚胎的培养过程中，约有10％～25％的卵细胞由于受精失败或是早期胚胎发育异常而被丢弃。传统的用于小鼠体外受精的培养液主要是HTF液。上述培养液可以为精子提供了一个缓冲和供能环境，基本满足体外受精技术的需求。但两个突出的问题在于：1，对精子运动能力的改善不够；2，受精后的合子发育成囊胚阶段的比率(囊胚率)有待提高。因此，开发一种提高小鼠精子活力和囊胚率的培养体系就显得尤为重要。专利
技术实现思路
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【技术保护点】
1.提高囊胚率的小鼠精子体外培养试剂盒，包括a毫升的mHTF和b毫克的BSA，其特征在于：还包括c微克的ERO1L重组蛋白和d微克的DPEP2重组蛋白；a:b:c:d＝2:20:1:2；ERO1L重组蛋白为内质网氧化还原酶1类似蛋白，在美国国立生物技术信息中心建立的DNA序列数据库中的基因ID为50527；DPEP2重组蛋白为二肽酶‑2，在美国国立生物技术信息中心建立的DNA序列数据库中的基因ID为319446。

【技术特征摘要】
1.提高囊胚率的小鼠精子体外培养试剂盒，包括a毫升的mHTF和b毫克的BSA，其特征在于：还包括c微克的ERO1L重组蛋白和d微克的DPEP2重组蛋白；a:b:c:d＝2:20:1:2；ERO1L重组蛋白为内质网氧化还原酶1类似蛋白，在美国国立生物技术信息中心建立的DNA序列数据库中的基因ID为50527；DPEP2重组蛋白为二肽酶-2，在美国国立生物技术信息中心建立的DNA序列数据库中的基因ID为319446。2.根据权利要求1所述的提高囊胚率的小鼠精子体外培养试剂盒，其特征在于：a＝10，b＝100，c＝5，d＝10。3.如权利要求1所述的提高囊胚率的小鼠精子体外培养试剂盒的使用方法，其特征在于：步骤一、将a毫升的mHTF、b毫克的BSA、c微克的ERO1L重组蛋白和d微克的DPEP2重组蛋白在37℃的环境下混合，并静置30分钟，得到小鼠精子培养液；a:b:c:d＝2:20:1:2；步骤二、在小鼠精子培养液中吸取出精子获能滴、受精滴、洗滴；步骤三、取小鼠精子加入精子获能滴中，并在37℃环境下培养90分...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑波，于骏，李红，吴亦波，沈聪，陈霞，杨慎敏，
申请(专利权)人：苏州市立医院，
类型：发明
国别省市：江苏,32