一种鉴定气胸生物标记物的方法及其检测试剂盒技术

本发明专利技术提供了用于鉴定气胸的生物标记物及其应用。所述生物标记物为患者血清经过柱前1‑苯基‑5‑甲基吡唑啉酮(PMP)衍生的高效液相色谱(HPLC)得到的游离葡萄糖和甘露糖。本发明专利技术的技术方案具有前处理简单，分析时间短，仪器价格合理，符合常规使用，操作步骤简单易学，检测结果准确性高，只需采血进行HPLC仪分析便可区分正常人和患者，并且所需血清量极少，采血量小于1mL等优点。所得结果显示此分析方法可以快速分析血清中游离的甘露糖和葡萄糖，并可以计算得到甘露糖、葡萄糖糖浓度及二者峰面积，对于研究血清游离甘露糖和葡萄糖与疾病之间的关系、寻找新型气胸疾病临床检测的标志物有着非常重要的意义。

A Method for Identification of Pneumothorax Biomarkers and Its Detection Kit

The invention provides a biomarker for identifying pneumothorax and its application. The biomarker is free glucose and mannose obtained by high performance liquid chromatography (HPLC) derived from patient serum by pre-column 1 phenyl 5 methyl pyrazolone (PMP). The technical scheme of the present invention has the advantages of simple pretreatment, short analysis time, reasonable instrument price, conforming to routine use, simple operation steps and easy learning, high accuracy of detection results, distinguishing normal people from patients only by taking blood for analysis by high performance liquid chromatography, and requires very little serum and less than 1 mL of blood. The results show that this method can rapidly analyze free mannose and glucose in serum, and calculate the concentration and peak area of mannose and glucose. It is very important to study the relationship between free mannose and glucose in serum and diseases, and to find new markers for clinical detection of pneumothorax diseases.

【技术实现步骤摘要】
一种鉴定气胸生物标记物的方法及其检测试剂盒
本专利技术属于医药
，具体涉及用于鉴定气胸的生物标记物及其检测应用。
技术介绍
气胸(pneumothorax)是指气体异常进入胸膜腔，导致胸膜腔内压力增高，肺组织受到压迫，吸气受限的病症，是呼吸科常见急症，严重者可危及生命，及时处理可治愈。通常气胸分为三大类：自发性气胸、创伤性气胸和人工气胸。自发性气胸(spontaneouspneumothorax)是由于肺部疾病使肺组织和脏胸膜破裂，或由于靠近肺表面的微小泡和肺大泡破裂，肺和支气管内空气进入胸膜腔所致。自发性气胸多见于男性青壮年或患有慢支、肺气肿、肺结核者。起病大多急骤，但也有发病缓慢，甚至无自觉症状，部分病人发病前可有剧烈咳嗽、持重物、屏气或剧烈运动等诱因。胸片是最常应用于诊断气胸的检查方法，CT对于小量气胸、局限性气胸以及肺大疱与气胸的鉴别比X线胸片敏感和准确。肺功能检查对检测气胸发生或者容量的大小帮助不大，一般不推荐采用。胸腔镜检查可明确胸膜破裂口的部位以及基础病变，同时可以进行治疗。根据临床症状、体征及X线表现，诊断本病难度不大，然而也常常出现误诊，尤其是阻塞性肺气肿并发本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于鉴定气胸的生物标记物，其特征在于：所述生物标记物为血清经过柱前1‑苯基‑5‑甲基吡唑啉酮(PMP)衍生的高效液相色谱(HPLC)得到的游离葡萄糖和甘露糖。

【技术特征摘要】
1.用于鉴定气胸的生物标记物，其特征在于：所述生物标记物为血清经过柱前1-苯基-5-甲基吡唑啉酮(PMP)衍生的高效液相色谱(HPLC)得到的游离葡萄糖和甘露糖。2.根据权利要求1所述的用于鉴定气胸的生物标记物，其特征在于：该方法为柱前PMP衍生的高效液相色谱法，包括以下具体步骤：(1)调节pH为7-14：取待检测的血清样品加超纯水于EP管中，加入氢氧化钠，涡旋混匀；(2)PMP衍生：每个样品加入PMP，涡旋混匀，离心后置于烘箱反应；(3)加酸中和反应：将烘箱内的样品取出，放置冷却，每个样品加入盐酸，涡旋混匀；(4)萃取：每管加入有机溶剂，涡旋，离心，移除下层有机溶剂，保留上清；(5)将样品离心，取上清液于装有内插管的棕色上样瓶中，盖紧盖子，离心，待用于高效液相分析；(6)制备葡萄糖和甘露糖的标准曲线；(7)将步骤(5)得到的色谱图与步骤(6)中的标准曲线比对并分析计算，确定葡萄糖、甘露糖的浓度以及葡萄糖与甘露糖峰面积的比值。3.根据权利要求1所述的用于鉴定气胸的生物标记物，其特征在于：所述高效液相色谱为Agilent1260高效液相系统，AgilentPoroshellEC-C18色谱柱(4.6mm×100mm，2.7μm)，所述步骤(5)中的色谱条件为：检测波长：254nm，带宽4nm；参比波长：350nm，带宽100nm；柱温：37℃；流速：1mL/min；进样体积：20μL；流动相：A相为乙腈，B相为pH为5.5的0.1mol/L乙酸铵-乙酸缓冲溶液。...

【专利技术属性】
技术研发人员：张丽娟，郝翠，矫文捷，
申请(专利权)人：青岛大学附属医院，
类型：发明
国别省市：山东,37