一种检测猪血浆中替米考星的前处理方法技术

技术编号:20021454 阅读:169 留言:0更新日期:2019-01-06 02:17
本发明专利技术公开一种检测猪血浆中替米考星的前处理方法,其具体步骤如下:⑴样品提取:向血浆中加入高氯酸,离心后取上清;⑵固相萃取净化:将SPE柱置于固相萃取装置上,活化平衡后,取上清过SPE柱;再依次用氨水、乙腈淋洗,抽干,洗脱,于30℃、氮气吹至干燥;加入流动相溶解,涡旋并静置后过滤,即完成前处理过程;本发明专利技术提高了对替米考星的提取效率,有效去除样品中杂质的同时对替米考星进行了最大程度地保留。

【技术实现步骤摘要】
一种检测猪血浆中替米考星的前处理方法
本专利技术涉及兽药代谢临床检测
,特别是一种针对猪血液样品的替米考星前处理方法,适用于临床试验动物血液中替米考星检测的样品前处理。
技术介绍
替米考星(Tilmicosin)是一类半合成的大环内酯类的畜禽专用抗生素,能够有效抵御革兰氏阳性菌和某些阴性菌,以及抵抗猪繁殖呼吸系统综合症病毒的作用,已广泛应用于防治猪呼吸道疾病。因此畜牧业生产的药物代谢临床试验中经常要求对猪血液样品进行检测。目前,替米考星兽药的临床药代检测方法主要采用高效液相色谱法(HPLC),中国兽药典(2015版)与美国药典以及国标(农业部958号公告)均采用HPLC检测标准。但这这些样品处理方法主要针对替米考星制剂、牛奶以及可食性动物组织,并不适用于动物血液样品检测。而兽药申报审批过程中药代动力学报告必须包括动物血液样品检测,现有的检测体系并不能满足检测的需求。目前血液样品替米考星的前处理方法主要采用化学溶剂法和固相萃取法,但前者须耗用大量化学试剂,对环境造成破坏;后者并没有开发出专门针对动物血液样品(尤其像猪血这种富含蛋白和脂肪的情况)的固相萃取方法,一般参考牛奶国标前处本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测猪血浆中替米考星的前处理方法,其特征在于,具体步骤如下:⑴ 样品提取:取1mL猪血浆,加入0.75 ml 质量分数为10%的高氯酸,12000 rpm离心15 min,取上清;⑵ 固相萃取净化:将SPE柱置于固相萃取装置上,先用10 mL甲醇活化、10 mL超纯水进行平衡;然后取步骤(1)获得的上清过SPE柱;再依次用10ml质量分数为5%的氨水、5ml 质量分数为35%的乙腈淋洗;65‑80KPa压强抽干10 min,再用5 mL洗脱液洗脱,于30 ℃、氮气吹至干燥;最后加入流动相溶解,定容至2 mL,涡旋60 s,静置10 min,0.22 μm滤膜进行过滤,即完成检测猪血浆中...

【技术特征摘要】
1.一种检测猪血浆中替米考星的前处理方法,其特征在于,具体步骤如下:⑴样品提取:取1mL猪血浆,加入0.75ml质量分数为10%的高氯酸,12000rpm离心15min,取上清;⑵固相萃取净化:将SPE柱置于固相萃取装置上,先用10mL甲醇活化、10mL超纯水进行平衡;然后取步骤(1)获得的上清过SPE柱;再依次用10ml质量分数为5%的氨水、5ml质量分数为35%的乙腈淋洗;65-80KPa压强抽干10min,再用5mL洗脱液洗脱,于30℃、氮气吹至干燥;最后加入流动相溶解,定容至2mL,涡旋60s,静置10min,0.22μm滤膜进行过滤,即完成检测猪血浆中替米考星的前...

【专利技术属性】
技术研发人员:封琦朱善元
申请(专利权)人:江苏农牧科技职业学院
类型:发明
国别省市:江苏,32

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