The invention discloses a method for separating Bifidobacterium from rabbit feces and its purification, which relates to the technical field of microorganisms. The invention comprises steps 1: preparation of sample solution; step 2: dilution of sample solution; step 3: separation and culture; step 4: preparation of purified medium; step 5: purification and culture. The invention improves the purification of bacteria by isolation and culture, solves the problem of low viable Bifidobacterium quantity existing in isolation, effectively shortens the cultivation time by optimizing the purification medium, and solves the problem of long cultivation time, high cost and low efficiency.
【技术实现步骤摘要】
一种从兔粪中分离双歧杆菌及其纯化方法
本专利技术属于微生物
，特别是涉及一种从兔粪中分离双歧杆菌及其纯化方法。
技术介绍
双歧杆菌属的细菌是人和动物肠道菌群的重要组成成员之一，广泛存在于人和动物的消化道和口腔等生境中；一些双歧杆菌的菌株可以作为益生菌而用在食品、医药和饲料方面；为了针对不同个体使用适宜的双歧杆菌，常用方法是通过粪便来分离出双歧杆菌的菌种在进行培养；但此类方法中开发的双歧杆菌活菌量较低，不易保存存活，同时现有的培养基培养时所需的培养时间较长，成本较高，效率较低。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种从兔粪中分离双歧杆菌及其纯化方法，通过分离培养提高了菌种的纯化，解决了现有分离出的双歧杆菌活菌量较低的问题；通过对纯化培养基进行优化，有效的缩短了培养时间，解决了现有培养时间较长成本高，效率较低的问题。为解决上述技术问题，本专利技术是通过以下技术方案实现的：本专利技术为一种从兔粪中分离双歧杆菌及其纯化方法，包括以下步骤：步骤一：制备样品液；取新鲜兔粪置于蛋白胨缓冲液中，充分搅拌均匀，一次离心处理后收集上层浊液；向上浊液加入适量蛋白胨缓冲液，再次离心...
【技术保护点】
1.一种从兔粪中分离双歧杆菌及其纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：制备样品液；取新鲜兔粪置于蛋白胨缓冲液中，充分搅拌均匀，一次离心处理后收集上层浊液；向上浊液加入适量蛋白胨缓冲液，再次离心处理后收集上层浊液，即为样品液；步骤二：稀释样品液；取一定量样品液以十倍稀释法使用蛋白胨缓冲液进行稀释，稀释梯度为10‑1至10‑9；步骤三：分离培养；分别取一定量的稀释梯度为10‑4至10‑9的稀释样品液置于培养基平板上，每个稀释梯度的稀释样品液做2至3个平行样；厌氧条件下培养45‑50小时后在移至好氧条件下培养5‑7小时；步骤四：制备纯化培养基；对改良MRS培养基进行氮源和碳...
【技术特征摘要】
1.一种从兔粪中分离双歧杆菌及其纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：制备样品液；取新鲜兔粪置于蛋白胨缓冲液中，充分搅拌均匀，一次离心处理后收集上层浊液；向上浊液加入适量蛋白胨缓冲液，再次离心处理后收集上层浊液，即为样品液；步骤二：稀释样品液；取一定量样品液以十倍稀释法使用蛋白胨缓冲液进行稀释，稀释梯度为10-1至10-9；步骤三：分离培养；分别取一定量的稀释梯度为10-4至10-9的稀释样品液置于培养基平板上，每个稀释梯度的稀释样品液做2至3个平行样；厌氧条件下培养45-50小时后在移至好氧条件下培养5-7小时；步骤四：制备纯化培养基；对改良MRS培养基进行氮源和碳源优化；步骤五：纯化培养；根据双歧杆菌性状对步骤三中的培养的菌落进行挑选，将挑选的菌种接种至步骤四制备的纯化培养液中进行纯化培养。2.根据权利要求1所述的一...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐双贵，胡培，卢文轩，
申请(专利权)人：安徽万士生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34
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