一种从酵母中提取维生素B1及其纯化的方法技术

本发明专利技术公开了一种从酵母中提取维生素B1及其纯化的方法。涉及维生素提取技术领域。本发明专利技术包括步骤一，取发酵液过滤后所得的湿菌体，并进行承重；步骤二，取100ml稀释的过夜培养物，反复冻融处理；步骤三，向步骤二中处理后的溶液中，加入40mlHCL后，放入80℃的热水中，进行水浴加热15‑45min；步骤四，调节步骤三中溶液的PH值，使得PH值达到4.5，放入离心机中进行离心处理,离心后取上清液；步骤五，取步骤四中提取的上清液进行过滤，进行维生素B1的荧光法测定。本发明专利技术通过酵母提取维生素B1的，有效的提高了啤酒产业中，废酵母的利用，有效的增加了啤酒生产的产值。

A Method for Extracting Vitamin B1 from Yeast and Its Purification

The invention discloses a method for extracting vitamin B1 from yeast and its purification. The invention relates to the technical field of vitamin extraction. The invention comprises steps 1, taking the wet bacteria obtained from the fermentation broth after filtration and carrying out weight-bearing; step 2, taking 100 ml diluted overnight culture, repeatedly freezing and thawing treatment; step 3, adding 40 ml HCL to the solution treated in step 2, putting it into 80 C hot water for 15 45 min, and adjusting PH value of the solution in step 3 so as to achieve 4.5 PH value. After centrifugation, the supernatant was obtained. Step 5, the supernatant extracted in step 4 was filtered for the fluorescence determination of vitamin B1. The invention extracts vitamin B1 by yeast, effectively improves the utilization of waste yeast in beer industry and effectively increases the output value of beer production.

【技术实现步骤摘要】
一种从酵母中提取维生素B1及其纯化的方法
本专利技术属于维生素提取
，特别是涉及一种从酵母中提取维生素B1及其纯化的方法。
技术介绍
维生素B1是最早被人们提纯的维生素，1896年荷兰科学家伊克曼首先发现，1910年为波兰化学家丰克从米糠中提取和提纯。它是白色粉末，易溶于水，遇碱易分解。它的生理功能是能增进食欲，维持神经正常活动等，缺少它会得脚气病、神经性皮炎等。成人每天需摄入2mg。它广泛存在于米糠、蛋黄、牛奶、番茄等食物中，已能由人工合成。现有的维生素B1大多数采用人工进行合成，而啤酒行业中，用来发酵的酵母中含有大量的维生素B族及维生素B1，不被利用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种从酵母中提取维生素B1及其纯化的方法，通过多组实验进行对比，快速的得出实验数据，并通过酵母提取维生素B1的，有效的提高了啤酒产业中，废酵母的利用，有效的增加了啤酒生产的产值。为解决上述技术问题，本专利技术是通过以下技术方案实现的：本专利技术为一种从酵母中提取维生素B1及其纯化的方法，包括以下制备步骤：步骤一，取发酵液过滤后所得的湿菌体，并进行承重；步骤二，取100ml稀释的过夜培养物，反复冻融处理；步骤三，向步骤二中处理后的溶液中，加入40mlHCL后，放入80℃的热水中，进行水浴加热15-45min；步骤四，调节步骤三中溶液的PH值，使得PH值达到4.5，放入离心机中进行离心处理,离心后取上清液；步骤五，取步骤四中提取的上清液进行过滤，进行维生素B1的荧光法测定。进一步地，所述步骤一中，发酵液通过麦芽汁培养基20ml，并在培养基中添加酵母菌种，放置于30℃室温环境中过夜培养制的。进一步地，所述步骤二中，通过液氮进行快速制冷。进一步地，所述步骤二中，冷冻的温度为-18℃，冷冻时间为3min，加热的方式为80℃的水浴加热，加热时间为10min.进一步地，所述步骤三中选用的HCL的浓度为0.1mol/L。进一步地，所述步骤四中离心的速度为5000r/min，离心的时间为10min。进一步地，所述步骤五中荧光法测定公式如下：式中：X-样品中硫胺素含量，mg/100g；U-样品荧光强度；Ub-样品空白荧光强度；T-标准荧光强度；Sb-标准空白荧光强度；C-硫胺素标准工作液浓度，ug/ml；D-用于净化的硫胺素标准工作液体积，ml；V1-样品水解后的定容之体积，ml；V2-样品用于净化水的提取液体积，ml；M-样品质量，g。附图说明图1冻融破壁次数对提取VB1的影响数据图；图2酸性环境下加热时间对提取VB1的影响数据图；本专利技术具有以下有益效果：本专利技术通过多组实验进行对比，快速的得出实验数据，并通过酵母提取维生素B1的，有效的提高了啤酒产业中，废酵母的利用，有效的增加了啤酒生产的产值。当然，实施本专利技术的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有优点。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例一：本专利技术为一种从酵母中提取维生素B1及其纯化的方法，包括以下制备步骤：步骤一，取发酵液过滤后所得的湿菌体，并进行承重；步骤二，取100ml稀释的过夜培养物，冻融一次；步骤三，向步骤二中处理后的溶液中，加入40mlHCL后，放入80℃的热水中，进行水浴加热15或30或45min；步骤四，调节步骤三中溶液的PH值，使得PH值达到4.5，放入离心机中进行离心处理,离心后取上清液；步骤五，取步骤四中提取的上清液进行过滤，进行维生素B1的荧光法测定。进一步地，所述步骤一中，发酵液通过麦芽汁培养基20ml，并在培养基中添加酵母菌种，放置于30℃室温环境中过夜培养制的。进一步地，所述步骤二中，通过液氮进行快速制冷。进一步地，所述步骤二中，冷冻的温度为-18℃，冷冻时间为3min，加热的方式为80℃的水浴加热，加热时间为10min.进一步地，所述步骤三中选用的HCL的浓度为0.1mol/L。进一步地，所述步骤四中离心的速度为5000r/min，离心的时间为10min。进一步地，所述步骤五中荧光法测定公式如下：式中：X-样品中硫胺素含量，mg/100g；U-样品荧光强度；Ub-样品空白荧光强度；T-标准荧光强度；Sb-标准空白荧光强度；C-硫胺素标准工作液浓度，ug/ml；D-用于净化的硫胺素标准工作液体积，ml；V1-样品水解后的定容之体积，ml；V2-样品用于净化水的提取液体积，ml；M-样品质量，g。实施例二：本专利技术为一种从酵母中提取维生素B1及其纯化的方法，包括以下制备步骤：步骤一，取发酵液过滤后所得的湿菌体，并进行承重；步骤二，取100ml稀释的过夜培养物，冻融二次；步骤三，向步骤二中处理后的溶液中，加入40mlHCL后，放入80℃的热水中，进行水浴加热15或30或45min；步骤四，调节步骤三中溶液的PH值，使得PH值达到4.5，放入离心机中进行离心处理,离心后取上清液；步骤五，取步骤四中提取的上清液进行过滤，进行维生素B1的荧光法测定。进一步地，所述步骤一中，发酵液通过麦芽汁培养基20ml，并在培养基中添加酵母菌种，放置于30℃室温环境中过夜培养制的。进一步地，所述步骤二中，通过液氮进行快速制冷。进一步地，所述步骤二中，冷冻的温度为-18℃，冷冻时间为3min，加热的方式为80℃的水浴加热，加热时间为10min.进一步地，所述步骤三中选用的HCL的浓度为0.1mol/L。进一步地，所述步骤四中离心的速度为5000r/min，离心的时间为10min。进一步地，所述步骤五中荧光法测定公式如下：式中：X-样品中硫胺素含量，mg/100g；U-样品荧光强度；Ub-样品空白荧光强度；T-标准荧光强度；Sb-标准空白荧光强度；C-硫胺素标准工作液浓度，ug/ml；D-用于净化的硫胺素标准工作液体积，ml；V1-样品水解后的定容之体积，ml；V2-样品用于净化水的提取液体积，ml；M-样品质量，g。实施例三：本专利技术为一种从酵母中提取维生素B1及其纯化的方法，包括以下制备步骤：步骤一，取发酵液过滤后所得的湿菌体，并进行承重；步骤二，取100ml稀释的过夜培养物，冻融三次；步骤三，向步骤二中处理后的溶液中，加入40mlHCL后，放入80℃的热水中，进行水浴加热15或30或45min；步骤四，调节步骤三中溶液的PH值，使得PH值达到4.5，放入离心机中进行离心处理,离心后取上清液；步骤五，取步骤四中提取的上清液进行过滤，进行维生素B1的荧光法测定。进一步地，所述步骤一中，发酵液通过麦芽汁培养基20ml，并在培养基中添加酵母菌种，放置于30℃室温环境中过夜培养制的。进一步地，所述步骤二中，通过液氮进行快速制冷。进一步地，所述步骤二中，冷冻的温度为-18℃，冷冻时间为3min，加热的方式为80℃的水浴加热，加热时间为10min.进一步地，所述步骤三中选用的HCL的浓度为0.1mol/L。进一步地，所述步骤四中离心的速度为5000r/min，离心的时间为10min。进一步地，所述步骤五中荧光法测定公式如下：式中：X-样品中硫胺素本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从酵母中提取维生素B1及其纯化的方法，其特征在于，包括以下制备步骤：步骤一，取发酵液过滤后所得的湿菌体，并进行承重；步骤二，取100ml稀释的过夜培养物，反复冻融处理；步骤三，向步骤二中处理后的溶液中，加入40mlHCL后，放入80℃的热水中，进行水浴加热15‑45min；步骤四，调节步骤三中溶液的PH值，使得PH值达到4.5，放入离心机中进行离心处理,离心后取上清液；步骤五，取步骤四中提取的上清液进行过滤，进行维生素B1的荧光法测定。

【技术特征摘要】
1.一种从酵母中提取维生素B1及其纯化的方法，其特征在于，包括以下制备步骤：步骤一，取发酵液过滤后所得的湿菌体，并进行承重；步骤二，取100ml稀释的过夜培养物，反复冻融处理；步骤三，向步骤二中处理后的溶液中，加入40mlHCL后，放入80℃的热水中，进行水浴加热15-45min；步骤四，调节步骤三中溶液的PH值，使得PH值达到4.5，放入离心机中进行离心处理,离心后取上清液；步骤五，取步骤四中提取的上清液进行过滤，进行维生素B1的荧光法测定。2.根据权利要求1所述的一种从酵母中提取维生素B1及其纯化的方法，其特征在于，所述步骤一中，发酵液通过麦芽汁培养基20ml，并在培养基中添加酵母菌种，放置于30℃室温环境中过夜培养制的。3.根据权利要求1所述的一种从酵母中提取维生素B1及其纯化的方法，其特征在于，所述步骤二中，通过液氮进行快速制冷。4.根据权利要求1所述的一种从酵母中提取维生素B1及其纯化的方...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐双贵，胡培，李垒，
申请(专利权)人：安徽万士生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34