The invention relates to a fluorescence ratio probe, a synthesis method thereof and the application of detecting intracellular lysosomal formaldehyde, belonging to the field of analytical chemistry. The structure of the fluorescence ratio probe is as follows:
【技术实现步骤摘要】
荧光比率探针及其合成方法和检测细胞内溶酶体甲醛应用
本专利技术属于分析化学
，涉及一种用于检测细胞内甲醛的荧光比率探针；本专利技术还涉及该荧光比率探针的合成方法；另外，该专利技术还涉及该荧光比率探针的用途。具体涉及一种荧光比率探针及其合成方法和检测细胞内溶酶体甲醛应用。
技术介绍
甲醛(FA)是一种常见的致癌和致畸物质，已经被世界卫生组织确定为潜在的变态反应源。作为一种化学污染物，甲醛造成的室内空气、大气环境和食品污染会导致甲醛中毒，造成头晕、头痛或恶心、呕吐，严重的会引起记忆力减退，甚至死亡。但据报道，FA在正常生理条件下以较高的浓度存在于细胞内，在某些细胞器中高达500μM。在大多数生物有机体中，一些氨基酸和外源性物质，在脱甲基化酶或氧化酶的催化作用下，发生新陈代谢，也会产生内源性的甲醛。在大脑组织内，正常浓度的甲醛通过DNA脱甲基过程，在长期记忆的存储、保存和检索上有着至关重要的作用。然而，人体内的甲醛含量超过一定剂量时，会引起许多疾病，包括阿尔茨海默病、神经源性炎症、糖尿病、慢性肝病、心血管疾病和癌症等。由于甲醛在工业环境和家用物品中普遍存在，已经设...
【技术保护点】
1.一种荧光比率探针，其特征在于，该荧光比率探针的结构式为：
【技术特征摘要】
1.一种荧光比率探针，其特征在于，该荧光比率探针的结构式为：2.如权利要求1所述的荧光比率探针，其特征在于，所述的荧光比率探针，是一种比率型荧光探针，其激发波长为365nm；随甲醛浓度的升高，所述的荧光比率探针在414nm处的荧光峰值保持不变，而在535nm处的荧光峰值逐渐增强；所述的荧光比率探针在535nm处的荧光强度与414nm处的荧光强度比值，随甲醛浓度的升高而增强。3.如权利要求1所述的荧光比率探针，其特征在于，所述的荧光比率探针，随着时间增加，535nm处的荧光强度与414nm处的荧光强度比值逐渐变大，并且在30分钟达到最大值。4.如权利要求1所述的荧光比率探针，其特征在于，所述的荧光比率探针，能抗PBS、乙二醛、乙醛、丙酮、4-硝基苯甲醛、三氯乙醛、NaClO、H2O2、CaCl2、MgCl2、NaNO2、Na2SO3、NaHS、NaHSO3、谷胱甘肽还原、乙酰L半胱氨酸、DL-半胱氨酸、精氨酸、L-半胱氨酸、苯丙氨酸精氨酸、L-半胱氨酸、苯丙氨酸中的一种或几种混合物的干扰。5.权利要求1所述的荧光比率探针的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：制备甲硫氨酸碳点固体粉末将甲硫氨酸和柠檬酸加入水中，溶解均匀，得到反应液；其中，按质量比，甲硫氨酸：柠檬酸＝(0.8～1.6)：(1～2)，加入水的量为充分溶解甲硫氨酸和柠檬酸即可；将反应液置于180～200℃下反应2～4h，反应结束后，冷却至室温，得到混合液；将混合液离心后，得到的上清液备用；将上清液用透析袋透析，去除残留的原料分子，冷冻、真空干燥，得到甲硫氨酸碳点固体粉末；步骤2：制备荧光比率探针粗产品(1)将4-溴-1,8-萘酸、6-氨基已酸、无水乙醇混合，搅拌回流1～3h，旋蒸，将得到的固体物料真空烘干，得到S1；其中，按固液比，4-溴-1,8-萘酸：6-氨基已酸：无水乙醇＝(1.0～1.5)g：(0.5～0.8)g：(20～40)mL；将S1溶于二甲基亚砜(DMSO)中，得到S1的DMSO溶液；(2)将1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC.HCl)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)溶于水中，搅拌均匀，得到催化剂溶液；其中，按质量比：EDC.HCl：DMAP＝(0.01～0.02)：(0.001～0.003)；(3)将S1的DMSO溶液、催化剂溶液混合，最后加入甲硫氨酸碳点固体粉末，搅拌均匀，避光室温搅拌...
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