The invention relates to a mixed strain for decomposing gallnut tannin and a method for fermenting Baiyao decoction, which can effectively solve the fermentation problem of Baiyao decoction; the technical scheme is that a mixed strain for decomposing gallnut tannin, including strain HMB_2, strain HMB_5, strain HMY_1 and strain HMY_2, and a method for fermenting Baiyao decoction, including strain activation, seed liquid preparation and fermentation, i.e., obtaining Baiyao. The method has stable quality and high repeatability, greatly increases the content of gallic acid in Baiyao decoction, and the content of gallic acid can reach more than 40%. The preparation process is simple, energy saving and environmental protection, and has remarkable economic and social benefits.
【技术实现步骤摘要】
一种分解五倍子鞣质的混合菌株及其发酵百药煎的方法
本专利技术涉及微生物发酵领域，特别是一种分解五倍子鞣质的混合菌株及其发酵百药煎的方法。
技术介绍
百药煎为五倍子同茶叶等经发酵制成的块状物，具有润肺化痰，生津止渴的功效，临床多用于治疗久咳痰多，咽痛，便血，久痢脱肛，口疮，牙疳，痈肿疮疡。其主要药效成分没食子酸，基本是由五倍子中可水解鞣质经单宁酶水解后转化而来。单宁酶可水解没食子酸单宁中的酯键和缩酚羧键，生成没食子酸和葡萄糖。目前对于百药煎的发酵菌种研究多集中在霉菌，有报道曲霉属黑曲霉是百药煎发酵过程中的关键菌株，五倍子生料固体发酵采用黑曲霉菌株更适合单宁酶的生产，尚未有利用细菌和酵母菌发酵百药煎的研究。
技术实现思路
针对上述情况，为解决现有技术之缺陷，本专利技术的目的就是提供一种分解五倍子鞣质的混合菌株及其发酵百药煎的方法，可有效解决百药煎的发酵问题。本专利技术解决的技术方案是，一种分解五倍子鞣质的混合菌株，包括菌株HMB-2、菌株HMB-5、菌株HMY-1和菌株HMY-2，菌株HMB-2，分类命名为芽胞杆菌科芽孢杆菌属蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)，保藏编号为CCTCCM2018107；菌株HMB-5，分类命名为芽胞杆菌科芽孢杆菌属巨大芽孢杆菌(Bacillusmegateriumstrain)，保藏编号为CCTCCM2018106；菌株HMY-1，分类命名为伯顿丝孢毕赤酵母(Hyphopichiaburtonii)，保藏编号为CCTCCM2018104；菌株HMY-2，分类命名为马克思克鲁维酵母(Kluyveromycesmarxianus...
【技术保护点】
1.一种分解五倍子鞣质的混合菌株，包括菌株HMB‑2、菌株HMB‑5、菌株HMY‑1和菌株HMY‑2，其特征在于，菌株HMB‑2，分类命名为芽胞杆菌科芽孢杆菌属蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus），保藏编号为CCTCC M 2018107；菌株HMB‑5，分类命名为芽胞杆菌科芽孢杆菌属巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium strain），保藏编号为CCTCC M 2018106；菌株HMY‑1，分类命名为伯顿丝孢毕赤酵母（Hyphopichia burtonii），保藏编号为CCTCC M 2018104；菌株HMY‑2，分类命名为马克思克鲁维酵母（Kluyveromyces marxianus），保藏编号为CCTCC M 2018105；四株菌株于2018年3月7日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内武汉大学保藏中心。
【技术特征摘要】
1.一种分解五倍子鞣质的混合菌株，包括菌株HMB-2、菌株HMB-5、菌株HMY-1和菌株HMY-2，其特征在于，菌株HMB-2，分类命名为芽胞杆菌科芽孢杆菌属蜡样芽孢杆菌（Bacilluscereus），保藏编号为CCTCCM2018107；菌株HMB-5，分类命名为芽胞杆菌科芽孢杆菌属巨大芽孢杆菌（Bacillusmegateriumstrain），保藏编号为CCTCCM2018106；菌株HMY-1，分类命名为伯顿丝孢毕赤酵母（Hyphopichiaburtonii），保藏编号为CCTCCM2018104；菌株HMY-2，分类命名为马克思克鲁维酵母（Kluyveromycesmarxianus），保藏编号为CCTCCM2018105；四株菌株于2018年3月7日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内武汉大学保藏中心。2.权利要求1所述分解五倍子鞣质的混合菌株发酵百药煎的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）菌株活化：将菌株HMY-1、HMY-2接种于PDA固体培养基上，28-32℃中培养12-18h，得活化的菌株HMY-1、HMY-2；将菌株HMB-2、HMB-5接种于LB固体培养基上，35-40℃中培养12-18h，得活化的菌株HMB-2、HMB-5；菌株HMY-1、HMY-2活化用培养基为PDA固体培养基，是由马铃薯去皮200g切块，煮至一捣即烂，过滤得滤液，滤液再加葡萄糖20g，琼脂粉15g，煮至沸腾，加蒸馏水至1000ml，121℃高压蒸汽灭菌20min，加入过滤除菌的链霉素，至链霉素终浓度为50μg/mL制成；菌株HMB-2、HMB-5活化用培养基为LB固体培养基，是由酵母膏5.0g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠5.0g/L，琼脂20.0g/L，121℃高压蒸汽灭菌20min，加入过滤除菌的制霉菌素，至链霉素终浓度为50μg/mL制成；（2）种子液制备：将活化的菌株HMY-1、HMY-2接种于PDA液体培养基中，将活化的菌株HMB-2、HMB-5接种于LB液体培养基中，于28-32℃、130-170rpm/min振荡培养6-8h，调整各菌株浓度为0.8-1.2×108个/mL，分别得菌株HMY-1、HMY-2、HMB-2和HMB-5种子液；所述的LB液体培养基：酵母膏5.0g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠5.0g/L，121℃20min高压蒸汽灭菌后加入过滤除菌的制霉菌素，至终浓度为50μg/mL；所述的PDA液体培养基：马铃薯去皮200g切块，煮至一捣即烂，过滤，滤液再加葡萄糖20g，煮至沸腾，补足蒸馏水至1000ml，分装于锥形瓶中，121℃20min高压蒸汽灭菌后加入过滤除菌的链霉素，终浓度为50μg/mL；（3）发酵：将绿茶叶5-7g，加13-17倍绿茶叶重量体积的蒸馏水，文火煎煮18-22min，过滤，得绿茶汁；将五倍子细粉80-120g、酒糟20-30g混匀，加入绿茶汁搅拌均匀得软材，置温度32-37℃、湿度80-90%下放置24-48h；再加入软材2-4倍重量体积的无菌水，加入体积0.2-0.5%的菌株HMB-2、HMB-5、HMY-1、HMY-2种子液；搅拌均匀，在28-32℃的温度、50-60%的湿度下，发酵66-120h，取出，55-75℃烘干，即得百药煎；得所述重量体积是指固体按g计，液体按mL计。3.根据权利要求2所述分解五倍子鞣质的混合菌株发酵百药煎的方法，其特征在于，包括以下步...
【专利技术属性】
技术研发人员：张振凌，王瑞生，李柯柯，陈晶晶，胡海峰，胡梦，任玉珍，杜杰，王云庭，金锋，
申请(专利权)人：河南中医药大学，国药集团健康产业研究院有限公司，中国中药有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41
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