一种烟草中敌螨普残留量的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种烟草中敌螨普残留量的检测方法。烟草样品采用改进的QuEChERS技术提取方法进行提取，C18分散吸附剂，采用气相色谱负化学源质谱联用法检测，外标法定量，结果表明，敌螨普在0.01‑0.5 mg/L范围线性关系良好，相关系数（r

【技术实现步骤摘要】
一种烟草中敌螨普残留量的检测方法
本专利技术属于农药残留检测技术
，具体涉及一种烟草中敌螨普残留量的检测方法。
技术介绍
敌螨普(dinocap，CAS:39300-45-3)是由六种不同的二硝基巴豆酸酯异构体组成的混合物，是一种触杀型杀菌剂，主要用于防治农作物及果蔬中的白粉病，另外还可以作为非内吸性杀螨剂。敌螨普毒性较大，具有致畸性和致癌性，施用不当会在农作物中造成残留，严重影响烟叶品质和安全，因此，各国都制定了相当严格的MRL值，CORESTA指导性残留限量(GRL)规定烟草中敌螨普为0.6mg/kg，中国烟草总公司规定了烟草中敌螨普的最大残留限量(MRL)为0.1mg/kg，因此对其残留的检测非常重要。由于敌螨普具有热不稳定性和化学不稳定性，容易水解或光解成相应的酚，并且敌螨普的六个同分异构体结构相似，在色谱和质谱上均较难分离，因此，对敌螨普的残留检测一直是农药残留检测领域非常具有挑战性的一项工作。目前国外报道的检测方法主要有气相色谱-ECD法、液相色谱法、液相色谱-质谱联用法。液相色谱法或液相色谱-质谱联用法前处理提取步骤繁琐耗时，需要将敌螨普的六个异构体都完全水解转化为酚，水解时间较长，且由于不能买到敌螨普水解酚的标准品，难于准确定量；使用气相色谱-ECD法分析时选择性、精密度和重现性较差。基于以上问题，有必要专利技术一种烟草中敌螨普残留量的检测方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种烟草中敌螨普残留量的检测方法。本专利技术的目的是这样实现的，包括以下步骤：1）标准溶液的配制：精确称取敌螨普标准品，溶解定容至棕色容量瓶中，配制成1mg/mL的标准储备液，于-15~-25℃冰箱中避光保存，将标准储备液稀释成系列标准工作溶液，用于制作标准曲线；2）样品前处理：提取：称取待测样品至离心管中，加水振荡至样品被水充分浸润后静置8-12min；移取与水等量的1%甲酸-乙腈至离心管中，并以1500-2500r/min速度振荡2～5min；在离心管中分别加入无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸氢二钠，加入量为待测样品：无水硫酸镁：氯化钠：柠檬酸钠：柠檬酸氢二钠=1：2：0.5：0.5：0.25，立即以1500-2500r/min速度振荡2～5min；然后以5000-7000r/min离心3～5min；净化：移取上清液1mL至1.5mL离心管中，加入50～200mgC18分散吸附剂，旋涡振荡2～5min，以5000～6000r/min离心3～5min，吸取上清液过0.22μm有机相滤膜后上机分析；3）敌螨普残留量的检测：将经过步骤（2）处理后的样品，采用气相色谱负化学源质谱联用法检测，并结合步骤（1）得到的标准曲线测得敌螨普残留量。与现有技术相比，本专利技术的有益效果：1、本专利技术创造性的采用快速、简单、可靠的提取方法用于烟草样品中敌螨普的提取，然后加入C18分散吸附剂，采用高灵敏度的气相色谱负化学源质谱联用法测定烟草中敌螨普的残留量，相比现有技术，本专利技术的检测方法具有样品前处理更简便、灵敏度和准确性更高的特点，能完全满足敌螨普农药残留检测要求。2、本专利技术的气相色谱负化学源质谱联用法对含电负性基团的物质具有高选择性和高灵敏度，将QuEChERS法首次应用到烟草样品中敌螨普的提取，加入C18分散吸附剂净化，采用高灵敏度的GC-NCI-MS测定烟草中敌螨普，有效提高处理效率和灵敏度。3、本专利技术检测方法简单，样品的提取步骤高效、安全、成本低，样品的净化步骤简单快速，净化效果及回收率高，通过对检测过程中前处理的优化以及检测中色谱条件的控制，实现了烟草中敌螨普准确、及时的检测。4、本专利技术的色谱方法对敌螨普同分异构体分离效果好，采用负化学源软电离，对敌螨普具有高选择性和高灵敏度，适用于烟草中敌螨普残留量的准确检测。附图说明图1为本专利技术实施例1中烟草空白样品中添加敌螨普及敌螨普标准溶液色谱图。具体实施方式下面结合实施例和附图对本专利技术作进一步的说明，但不以任何方式对本专利技术加以限制，基于本专利技术教导所作的任何变换或替换，均属于本专利技术的保护范围。本专利技术所述的烟草中敌螨普残留量的检测方法，包括以下步骤：1）标准溶液的配制：精确称取敌螨普标准品，溶解定容至棕色容量瓶中，配制成1mg/mL的标准储备液，于-15~-25℃冰箱中避光保存，将标准储备液稀释成系列标准工作溶液，用于制作标准曲线；2）样品前处理：提取：称取待测样品至离心管中，加水振荡至样品被水充分浸润后静置8-12min；移取与水等量的1%甲酸-乙腈至离心管中，并以1500-2500r/min速度振荡2～5min；在离心管中分别加入无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸氢二钠，加入量为待测样品：无水硫酸镁：氯化钠：柠檬酸钠：柠檬酸氢二钠=1：2：0.5：0.5：0.25，立即以1500-2500r/min速度振荡2～5min；然后以5000-7000r/min离心3～5min；净化：移取上清液1mL至1.5mL离心管中，加入50～200mgC18分散吸附剂，旋涡振荡2～5min，以5000～6000r/min离心3～5min，吸取上清液过0.22μm有机相滤膜后上机分析；3）敌螨普残留量的检测：将经过步骤（2）处理后的样品，采用气相色谱负化学源质谱联用法检测，并结合步骤（1）得到的标准曲线测得敌螨普残留量。进一步的，步骤（1）中所述的标准储备液的配制方法为精确称取敌螨普标准品0.1g，精确至0.1mg，以甲醇溶解定容至100mL棕色容量瓶，配制成1mg/mL的标准储备液。进一步的，步骤（1）中所述的标准曲线的制作方法具体为用甲醇将敌螨普标准储备液配制成0.01、0.02、0.05、0.1、0.2和0.5mg/L系列质量浓度的敌螨普标准工作溶液，以峰面积对各浓度进行线性回归，得到标准曲线，所述的标准曲线在敌螨普质量浓度为0.01-0.5mg/L范围内呈良好线性，相关系数r2大于0.99。进一步的，所述的检测方法还包括添加回收实验，所述的添加回收实验为采用烟草空白样品进行添加回收，将所述的敌螨普标准储备液用于添加回收试验，具体为分别在0.05、0.1、0.5mg/kg3个添加水平下进行加标回收实验，每个添加浓度设6个平行样本，然后进行样品前处理和检测，所述的敌螨普在烟草中的回收率为95.83%～102.34%，相对标准偏差为3.75%～5.30%。进一步的，步骤（2）中所述的提取具体为称取2g待测样品，精确至0.01g，于50mL具盖离心管中，加入10mL水，振荡至样品被水充分浸润后静置10min；移取10mL1%甲酸-乙腈至离心管中，并置于漩涡混合振荡仪上以2000r/min速度振荡2～5min；在离心管中分别加入4g无水硫酸镁，1g氯化钠，1g柠檬酸钠和0.5g柠檬酸氢二钠，立即于漩涡混合振荡仪上以2000r/min速度振荡2～5min，然后以6000r/min离心3～5min。进一步的，步骤（2）中所述的净化具体为移取上清液1mL至1.5mL离心管中，加入50mgC18分散吸附剂，旋涡振荡2min，以6000r/min离心3min，吸取上清液过0.22μm有机相滤膜后上机分析。进一步的，步骤（3）所述的气相色谱负化学源质谱联用法的色谱条件为色谱柱：DB-5MS（30m×0.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种烟草中敌螨普残留量的检测方法，其特征在于包括以下步骤：1） 标准溶液的配制：精确称取敌螨普标准品，溶解定容至棕色容量瓶中，配制成1mg/mL的标准储备液，于‑15~‑25℃ 冰箱中避光保存，将标准储备液稀释成系列标准工作溶液，用于制作标准曲线；2）样品前处理：提取：称取待测样品至离心管中，加水振荡至样品被水充分浸润后静置8‑12min；移取与水等量的1%甲酸‑乙腈至离心管中，并以1500‑2500 r/min 速度振荡2～5 min；在离心管中分别加入无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸氢二钠，加入量为待测样品：无水硫酸镁：氯化钠：柠檬酸钠：柠檬酸氢二钠=1：2：0.5：0.5：0.25，立即以1500‑2500 r/min 速度振荡2～5 min；然后以5000‑7000r/min离心3～5 min；净化：移取上清液1 mL至1.5 mL离心管中，加入50～200 mg C18分散吸附剂，旋涡振荡2～5 min，以5000～6000 r/min 离心3～5 min，吸取上清液过0.22 μm有机相滤膜后上机分析；3）敌螨普残留量的检测：将经过步骤（2）处理后的样品，采用气相色谱负化学源质谱联用法检测，并结合步骤（1）得到的标准曲线测得敌螨普残留量。...

【技术特征摘要】
1.一种烟草中敌螨普残留量的检测方法，其特征在于包括以下步骤：1）标准溶液的配制：精确称取敌螨普标准品，溶解定容至棕色容量瓶中，配制成1mg/mL的标准储备液，于-15~-25℃冰箱中避光保存，将标准储备液稀释成系列标准工作溶液，用于制作标准曲线；2）样品前处理：提取：称取待测样品至离心管中，加水振荡至样品被水充分浸润后静置8-12min；移取与水等量的1%甲酸-乙腈至离心管中，并以1500-2500r/min速度振荡2～5min；在离心管中分别加入无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸氢二钠，加入量为待测样品：无水硫酸镁：氯化钠：柠檬酸钠：柠檬酸氢二钠=1：2：0.5：0.5：0.25，立即以1500-2500r/min速度振荡2～5min；然后以5000-7000r/min离心3～5min；净化：移取上清液1mL至1.5mL离心管中，加入50～200mgC18分散吸附剂，旋涡振荡2～5min，以5000～6000r/min离心3～5min，吸取上清液过0.22μm有机相滤膜后上机分析；3）敌螨普残留量的检测：将经过步骤（2）处理后的样品，采用气相色谱负化学源质谱联用法检测，并结合步骤（1）得到的标准曲线测得敌螨普残留量。2.根据权利要求1所述的烟草中敌螨普残留量的检测方法，其特征在于步骤（1）中所述的标准储备液的配制方法为精确称取敌螨普标准品0.1g，精确至0.1mg，以甲醇溶解定容至100mL棕色容量瓶，配制成1mg/mL的标准储备液。3.根据权利要求1所述的烟草中敌螨普残留量的检测方法，其特征在于步骤（1）中所述的标准曲线的制作方法具体为用甲醇将敌螨普标准储备液配制成0.01、0.02、0.05、0.1、0.2和0.5mg/L系列质量浓度的敌螨普标准工作溶液，以峰面积对各浓度进行线性回归，得到标准曲线，所述的标准曲线在敌螨普质量浓度为0.01-0.5mg/L范围内呈良好线性，相关系数r2大于0.99。4.根据权利要求1所述的烟草中敌螨普残留量的检测方法，其特征在于所述的检测方法还包括添加回收实验，所述的添加回收实验为采用烟草空白样品进行添加回收，将所述的敌螨普标准储备液...

【专利技术属性】
技术研发人员：师君丽，孔光辉，李勇，逄涛，吴玉萍，陈萍，
申请(专利权)人：云南省烟草农业科学研究院，
类型：发明
国别省市：云南,53