一种快速区分PDCoV和PReoV的二重RT-PCR检测引物及试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种快速区分PDCoV和PReoV的二重RT‑PCR检测引物及试剂盒，属于动物病毒学和分子生物学技术领域。该试剂盒包括SEQ ID1~4所示的引物序列，还包括了PrimeSTAR HR缓冲液、cDNA模板和灭菌水。本发明专利技术提供的PDCoV和PReoV的二重RT‑PCR检测试剂盒采用二重RT‑PCR扩增，两种病变相似且同为RNA病毒的病毒一次检测，检测总时间控制在2小时左右，其检测方法易于操作、方便快捷，能达到快速检测的目的。

【技术实现步骤摘要】
一种快速区分PDCoV和PReoV的二重RT-PCR检测引物及试剂盒
本专利技术属于动物病毒学和分子生物学
，具体为针对PDCoV和PReoV二重RT-PCR的检测引物、检测试剂盒及应用。
技术介绍
猪德尔塔冠状病毒（porcinedeltacoronavirus，PDCoV）又称猪丁型冠状病毒，是一种新发现的冠状病毒，属于冠状病毒科（Coronaviridae）、δ冠状病毒属（Deltacoronavirus）的成员。引起以呕吐、脱水、严重腹泻、仔猪致死率高为主要临床特征的肠道疾病，给养猪业带来严重损失。2012年，在中国香港首次报道。2014年初美国俄亥俄州首次检测报道出一种新的猪肠道冠状病毒PDCoV，截止2014年底美国17个州均有发现PDCoV的感染。随后，加拿大、韩国、越南、老挝等国家也报道从腹泻猪的临床样品中检测到PDCoV，其阳性检出率高达25%，个别地区检出率还高达35%。基因序列分析表明，美国PDCoV分离株序列与我国香港和韩国发现的毒株具有高度相似性，同源性均高于98.9％，这表明PDCoV已在国际生猪贸易过程中广泛传播。而且PDCoV还常与其它腹泻病原混本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速区分PDCoV和PReoV的二重RT‑PCR检测引物，其特征在于，所述二重RT‑PCR检测引物包括PDCoV RT‑PCR检测引物和PReoV RT‑PCR检测引物；所述PDCoV RT‑PCR检测引物由具有SEQ ID NO:1 所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQ ID NO:2 所示核苷酸序列的下游引物组成；所述PReoV RT‑PCR检测引物由具有SEQ ID NO:3所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQ ID NO:4 所示核苷酸序列的下游引物组成。

【技术特征摘要】
1.一种快速区分PDCoV和PReoV的二重RT-PCR检测引物，其特征在于，所述二重RT-PCR检测引物包括PDCoVRT-PCR检测引物和PReoVRT-PCR检测引物；所述PDCoVRT-PCR检测引物由具有SEQIDNO:1所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQIDNO:2所示核苷酸序列的下游引物组成；所述PReoVRT-PCR检测引物由具有SEQIDNO:3所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQIDNO:4所示核苷酸序列的下游引物组成。2.根据权利要求1所述快速区分PDCoV和PReoV的二重RT-PCR检测引物，其特征在于，所述PDCoVRT-PCR检测引物是依据PDCoV的N基因进行设计，扩增的目的片段大小为627bp；所述PReoVRT-PCR检测引物是PReoV的S2基因进行设计，扩增的目的片段大小为974bp。3.根据权利要求1所述快速区分PDCoV和PReoV的二重RT-PCR检测引物，其特征在于，所述二重RT-PCR检测引物在制备猪丁型冠状病毒和猪呼肠孤病毒鉴别检测试剂盒的应用。4.一种如权利要求1所述快速区分PDCoV和PReoV的二重RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述二重RT-PCR检测试剂盒包括具有SEQIDNO:1、SEQIDNO:3所示核苷酸序列的上游引物以及具有SEQIDNO:2、SEQIDNO:4所示核苷酸序列的下游引物。5.根据权利要求4所述快速区分PDCoV和PReoV的二重RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述二重RT-PCR检测试剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦毅斌，陈忠伟，卢冰霞，刘磊，赵武，何颖，闭炳芬，周英宁，李斌，段群棚，梁家幸，苏乾莲，蒋冬福，卢敬专，侯韶毅，李茂宁，
申请(专利权)人：广西壮族自治区兽医研究所，
类型：发明
国别省市：广西,45