一种快速区分TGEV和PReoV的二重RT-PCR检测引物及试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种快速区分TGEV和PReoV的二重RT‑PCR检测引物及试剂盒，属于动物病毒学和分子生物学技术领域。该试剂盒包括SEQ ID1~4所示的引物序列，还包括了PrimeSTAR HR缓冲液和灭菌水、cDNA模板和灭菌水。本发明专利技术提供的TGEV和PReoV的二重RT‑PCR检测试剂盒采用二重RT‑PCR扩增，两种病变相似且同为RNA病毒的病毒一次检测，检测总时间控制在2小时左右，其检测方法易于操作、方便快捷，能达到快速检测的目的。

【技术实现步骤摘要】
一种快速区分TGEV和PReoV的二重RT-PCR检测引物及试剂盒
本专利技术属于动物病毒学和分子生物学
，具体为针对TGEV和PReoV二重RT-PCR的检测引物、检测试剂盒及应用。
技术介绍
猪传染性胃肠炎病毒(porcinetransmissiblegastroenteritis，TGEV)属冠状病毒科冠状病毒属成员。引起以发热、呕吐、脱水、严重腹泻、仔猪致死率高为主要临床特征的一种急性、高度接触性胃肠道疾病，猪传染性胃肠炎。各种年龄的猪均可感染发病，而10日龄以内的仔猪死亡率高达100％。5周龄以上的猪感染后虽然死亡率很低，但是这些猪通常成为僵猪，饲料报酬低，给养猪业带来严重损失。美国于1946年首次报道该病，随后多个国家和地区相继报道有本病的发生与流行。20世纪50年代末，我国报道有本病的发生，到目前为止我国大部分的省(市)都有该病的发生与流行，且该病尚无有效的治疗药物，给养猪业造成了极大的困扰。20世纪50年代呼肠孤病毒的首次发现，证实了dsRNA病毒可以作为稳定的生命形式存在于自然界中。呼肠孤病毒(Reovirus)系呼肠孤病毒科(Reoviridea)正呼肠孤病本文档来自技高网...

【技术保护点】
1. 一种快速区分TGEV和PReoV的二重RT‑PCR检测引物，其特征在于，所述二重RT‑PCR检测引物包括TGEV RT‑PCR检测引物和PReoV RT‑PCR检测引物；所述TGEV RT‑PCR检测引物由具有SEQ ID NO:1 所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQ ID NO:2 所示核苷酸序列的下游引物组成；所述PReoV RT‑PCR检测引物由具有SEQ ID NO:3所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQ ID NO:4 所示核苷酸序列的下游引物组成。

【技术特征摘要】
1.一种快速区分TGEV和PReoV的二重RT-PCR检测引物，其特征在于，所述二重RT-PCR检测引物包括TGEVRT-PCR检测引物和PReoVRT-PCR检测引物；所述TGEVRT-PCR检测引物由具有SEQIDNO:1所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQIDNO:2所示核苷酸序列的下游引物组成；所述PReoVRT-PCR检测引物由具有SEQIDNO:3所示核苷酸序列的上游引物和具有SEQIDNO:4所示核苷酸序列的下游引物组成。2.根据权利要求1所述快速区分TGEV和PReoV的二重RT-PCR检测引物，其特征在于，所述TGEVRT-PCR检测引物是依据TGEV的全基因进行设计，扩增的目的片段大小为277bp；所述PReoVRT-PCR检测引物是PReoV的S2基因进行设计，扩增的目的片段大小为974bp。3.根据权利要求1所述快速区分TGEV和PReoV的二重RT-PCR检测引物，其特征在于，所述二重RT-PCR检测引物在制备猪传染性胃肠炎病毒和猪呼肠孤病毒鉴别检测试剂盒的应用。4.一种如权利要求1所述快速区分TGEV和PReoV的二重RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述二重RT-PCR检测试剂盒包括具有SEQIDNO:1、SEQIDNO:3所示核苷酸序列的上游引物以及具有SEQIDNO:2、SEQIDNO:4所示核苷酸序列的下游引物。5.根据权利要求4所述快速区分TGEV和PReoV的二重RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述二重RT-PCR检测试剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢冰霞，赵武，刘磊，秦毅斌，段群棚，周英宁，陈忠伟，何颖，李斌，闭炳芬，蒋冬福，梁家幸，卢敬专，苏乾莲，侯韶毅，李茂宁，
申请(专利权)人：广西壮族自治区兽医研究所，
类型：发明
国别省市：广西,45