用于检测猪圆环病毒3型及非典型猪瘟病毒的双重PCR引物、方法及试剂盒技术

本发明专利技术提供一种用于检测猪圆环病毒3型及非典型猪瘟病毒的双重PCR引物、检测方法及试剂盒。本发明专利技术提供的试剂盒根据检测猪圆环病毒3型及非典型猪瘟病毒的高度保守的特异性序列设计双重PCR引物，建立了单管、同步检测猪圆环病毒3型及非典型猪瘟病毒的检测方法。本发明专利技术试剂盒具有快速简便、特异性强、敏感性高、可靠性好的特点，可以同时进行大批量的样本分析，一次反应便能鉴别猪圆环病毒3型及非典型猪瘟病毒这两种临床症状相似的病原菌，能够精准的鉴别诊断出猪感染的病因，有利于对症下病实施正确的治疗方案，具有很好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
用于检测猪圆环病毒3型及非典型猪瘟病毒的双重PCR引物、方法及试剂盒
本专利技术属于动物疫病检测
，具体涉及用于检测猪圆环病毒3型及非典型猪瘟病毒的双重PCR引物、检测方法及试剂盒。
技术介绍
猪圆环病毒(Porcinecircovirus，PCV)为一种共价闭合、单股环状DNA病毒，是迄今为止发现最小动物病毒。2016年前,全球范围内仅发现PCV1和PCV2两个基因型。2016以后，一种新的圆环病毒被发现-PCV3，全长2000bp，包含3个主要开放阅读框(ORF)，病毒粒子呈二十面体结构，无囊膜，直径为17-20nm。处于病毒血症期感染猪为主要传染源，包括发病猪和隐形感染猪。病毒随患病猪鼻、口腔分泌物及粪便排出，不同年龄、性别和品种均可感染PCV3，但以妊娠母猪和仔猪更易感，可以垂直传播。其临床症状主要侵害2～10周龄的仔猪，表现为具有未知致病因子的PDNS猪中的严重皮炎和肾病，断奶后厌食，体重下降，关节肿胀，呼吸道疾病和直肠脱垂、繁殖障碍及心脏和多系统的炎症反应。PCV3感染可导致母猪出现厌食症状,皮肤出现多灶性丘疹、斑点和浅表性皮炎,生产性能下降；妊娠母猪发生繁殖障碍,本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于检测猪圆环病毒3型及非典型猪瘟病毒的双重PCR引物，其特征在于，所述引物根据检测猪圆环病毒3型及非典型猪瘟病毒的高度保守的特异性序列设计双重PCR引物，其中，猪圆环病毒3型的检测引物，由SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列的正向引物和SEQ ID NO：4所示的核苷酸序列的反向引物组成；非典型猪瘟病毒的检测引物，由SEQ ID NO：9所示的核苷酸序列的正向引物和SEQ ID NO：10所示的核苷酸序列的反向引物组成。

【技术特征摘要】
1.用于检测猪圆环病毒3型及非典型猪瘟病毒的双重PCR引物，其特征在于，所述引物根据检测猪圆环病毒3型及非典型猪瘟病毒的高度保守的特异性序列设计双重PCR引物，其中，猪圆环病毒3型的检测引物，由SEQIDNO：3所示的核苷酸序列的正向引物和SEQIDNO：4所示的核苷酸序列的反向引物组成；非典型猪瘟病毒的检测引物，由SEQIDNO：9所示的核苷酸序列的正向引物和SEQIDNO：10所示的核苷酸序列的反向引物组成。2.如权利要求1所述的检测猪圆环病毒3型及非典型猪瘟病毒的双重PCR引物在制备检测猪圆环病毒3型及非典型猪瘟病毒的制品中的应用。3.用于检测猪圆环病毒3型及非典型猪瘟病毒的双重PCR检测方法，包括以下步骤：1)从待检样品制备核酸模板；2)利用如权利要求1所述的双重PCR引物，在同一反应体系中进行双重PCR扩增检测；3)加入核酸模板，得到扩增产物；4)琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物，获得检测结果。4.如权利要求3所述的用于检测猪圆环病毒3型及非典型猪瘟病毒的双重PCR检测方法，其特征在于，包括：SEQIDNO：3、SEQIDNO：4、SEQIDNO：9、SEQIDNO：10所示核苷酸序列各2μl，2×TaqPCRbuffer(Mg2+Freee)25μl，dNTPMix4.0μl，TakararTaq酶0.8μL，待测核酸模板4μL，余量为ddH2O。5.如权利要求3所述的用于检测猪圆环...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺东生，司广斌，苏丹萍，周霞，俞丽，石坚，刘博闻，熊景峰，梁伟放，李锦辉，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：广东,44