一种集靶向、光热于一体的红细胞仿生型纳米粒的制备方法技术

技术编号:19914822 阅读:49 留言:0更新日期:2018-12-28 22:45
本发明专利技术涉及制药领域,本发明专利技术提供了一种集靶向、光热于一体的红细胞仿生型纳米粒的制备方法。本发明专利技术首先提取得到红细胞膜,然后将吲哚菁绿负载在聚乳酸‑羟基乙酸溶液上,将阿霉素包埋于上述体系,通过二次乳化‑溶剂挥发法制得包埋有阿霉素的吲哚菁绿‑聚乳酸‑羟基乙酸纳米溶液;之后通过将叶酸壳寡糖与阿霉素‑吲哚菁绿‑聚乳酸‑羟基乙酸纳米溶液反应得到阿霉素‑叶酸壳寡糖‑吲哚菁绿‑聚乳酸‑羟基乙酸纳米溶液;最后将阿霉素‑叶酸壳寡糖‑吲哚菁绿‑聚乳酸‑羟基乙酸挤压进入红细胞膜,即可得到红细胞仿生型纳米粒。

【技术实现步骤摘要】
一种集靶向、光热于一体的红细胞仿生型纳米粒的制备方法
本专利技术涉及制药领域,尤其涉及一种集靶向、光热于一体的红细胞仿生型纳米粒的制备方法。
技术介绍
癌症(恶性肿瘤)是严重危害人类健康的难治疾病之一,每年都具有较高的发病率和死亡率。因此,对于肿瘤形成及治疗方法的研究,目前己经成为研究人员的研究重点和热点。聚合物纳米粒子由于其具有优良的生物相容性和降解性、较高的载药量和药物递送效率、良好的循环稳定性等特点,因此,现如今聚合物纳米粒子被广泛应用于药物递送系统。然而传统的纳米粒容易与蛋白质、脂质或其他生物分子粘附结合形成“蛋白质环”从而影响它在体内的行为,若与血清蛋白结合则会引起吞噬细胞的识别和吞噬,导致纳米粒在血液中被快速清除,不但减弱其抗肿瘤效果,有些纳米材料还具有潜在细胞或基因毒性。红细胞膜作为新型纳米递药载体具有独特的优势,具有安全,生物兼容性高,体内可降解等特点,最重要的是红细胞膜上含有CD47蛋白,此蛋白与信号调节蛋白-α(SIRP-α)受体作用可避免巨噬细胞的吞噬,基于这一点我们可将其应用于抗肿瘤纳米递药系统的研究。用红细胞膜包裹抗肿瘤纳米粒制作成为红细胞仿生型纳米粒,因为本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种集靶向、光热于一体的红细胞仿生型纳米粒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:1)取6~8周大小的ICR小鼠数只,使用毛细管进行眼球取血并在血中加入肝素抗凝,得到的全血在1‑5℃,1500‑2500 r/min下离心8‑12 min后去除上层的血清和其他血细胞层,得到的红细胞沉淀用冷处理后的1×PBS洗涤3~5次,备用;2)向步骤1)得到的红细胞沉淀中加入相当于红细胞沉淀55‑65倍体积的冷处理后的0.25×PBS低渗2~3 h,接着在9000‑11000 r/min下离心15~20 min,弃去上层液体,下层淡粉色的沉淀即为红细胞膜,再用0.25×PBS反复洗涤3~5次使得提取的红细胞...

【技术特征摘要】
1.一种集靶向、光热于一体的红细胞仿生型纳米粒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:1)取6~8周大小的ICR小鼠数只,使用毛细管进行眼球取血并在血中加入肝素抗凝,得到的全血在1-5℃,1500-2500r/min下离心8-12min后去除上层的血清和其他血细胞层,得到的红细胞沉淀用冷处理后的1×PBS洗涤3~5次,备用;2)向步骤1)得到的红细胞沉淀中加入相当于红细胞沉淀55-65倍体积的冷处理后的0.25×PBS低渗2~3h,接着在9000-11000r/min下离心15~20min,弃去上层液体,下层淡粉色的沉淀即为红细胞膜,再用0.25×PBS反复洗涤3~5次使得提取的红细胞膜更为纯净,备用;3)将阿霉素溶于水中,配制得到浓度为4-6wt%的阿霉素溶液;将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶于二氯甲烷中,配制成浓度为1.5-2.5wt%的聚乳酸-羟基乙酸溶液;将聚多巴胺溶于水中,配制成浓度为2.5-3.5wt%的聚多巴胺溶液;将所有溶液置于1-5℃的环境中预冷,备用;4)取2~2.5mg吲哚菁绿加入至3~5mL聚乳酸-羟基乙酸溶液中,充分混匀,得到吲哚菁绿-聚乳酸-羟基乙酸溶液,备用;5)取600~700μL阿霉素溶液加入到3~5mL吲哚菁绿-聚乳酸-羟基乙酸溶液中,超声乳化30~40s,制得W/O初乳,备用;6)将W/O初乳立即转移到6~10mL聚多巴胺溶液中,超声30~40s,制得W/O/W复乳液,备用;7)将W/O/W复乳液逐滴加入到40~50mL水中,搅拌,陈化3~4h,待有机溶剂挥发完全后,将得到的纳米粒溶液以800-1200r/min离心去除大颗粒,再用0.45μm的微孔滤膜过滤,得阿霉素-吲哚菁绿-聚乳酸-羟基乙酸纳米粒溶液,备用;8)称取叶酸220~225mg,1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐192~197mg,加入至30~40mL的0.1mol/L氢氧化钠溶液中,搅拌完全溶解,称取525~530mg壳寡糖,搅拌下加入叶酸溶液,避光反应3~5h,备用;9)向步骤8)得到的反应液中加入0.1mol/L的盐酸溶液,调节其pH值至6.8-7....

【专利技术属性】
技术研发人员:王秉姚舒婷单心怡华称祥胡智文万军民
申请(专利权)人:浙江理工大学
类型:发明
国别省市:浙江,33

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