氨基酸定量方法和氨基酸定量用试剂盒技术

本发明专利技术提供使用氨酰tRNA合成酶(AARS)选择性且简便、高灵敏度地定量测定对象的氨基酸(L型和/或D型氨基酸)的方法和氨基酸定量用试剂盒。上述氨基酸定量方法，其特征在于：在使用AARS定量样品中的氨基酸量(L型和/或D型氨基酸)的方法中，通过使AARS和氨基酸从一度形成的氨酰AMP‑AARS复合体中游离、并将它们再次用于氨酰AMP‑AARS复合体的形成，最终产生达到比样品中所含的氨基酸多的摩尔数的作为测定对象的焦磷酸等反应产物；以及用于实施该方法的氨基酸定量用试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】氨基酸定量方法和氨基酸定量用试剂盒
本专利技术涉及氨基酸定量方法和氨基酸定量用试剂盒等。
技术介绍
L-氨基酸(L-AA)作为生物体内蛋白质的构成成分担负着重要作用，其种类为20种。关于L-氨基酸的功能性进行了许多的研究，L-氨基酸在药品、加工食品、健康食品等各种产业中使用。例如，食品中的游离L-氨基酸与味道、加热后的香味、保存性、摄取后的生物体调节功能等有关，作为食品科学或营养科学领域中的重要要素而受到关注。另外，近年来发现了血液中的L-氨基酸浓度根据疾病而发生变化，通过测定血液中的氨基酸浓度，还将其充分用作可诊断肺癌、胃癌、大肠癌等癌症的生物标志物。另外，氨基酸中存在着作为L-氨基酸的光学异构体的D-氨基酸(D-AA)，其种类为19种。D-氨基酸也存在于生物体内，其生理功能尚未明确。然而，近年来，由于分析技术的进步，分析D-氨基酸成为可能，例如可知：D-丝氨酸在阿尔茨海默病(Alzheimerdisease)患者的脑脊髓中增多、D-天冬氨酸在肌肉老化的同时减少、而D-丙氨酸与螃蟹、虾的甜味有关等，D-氨基酸的生理功能受到关注。因此，L型或D型氨基酸定量技术在使用氨基酸的产品开发、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.样品中的氨基酸定量方法，包括步骤(I)以及步骤(II)，其中所述步骤(I)包括以下各步骤：步骤I‑1，该步骤包括下述反应1：在二价离子或者多元胺的存在下，使样品中的L型和/或D型氨基酸(L‑AA和/或D‑AA)、该氨基酸所对应的氨酰tRNA合成酶(AARS)和腺苷三磷酸(ATP)反应，形成包含氨酰腺苷酸(氨酰AMP)和AARS的复合体(氨酰AMP‑AARS复合体)；步骤I‑2，该步骤包括下述反应2：使反应1和/或反应3中形成的氨酰AMP‑AARS复合体与核苷酸反应，使AARS和氨基酸(L‑AA和/或D‑AA)从该复合体中游离；步骤I‑3，该步骤包括下述反应3：通过将反应2中游离的氨基酸(L...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.03.30 JP 2016-0673911.样品中的氨基酸定量方法，包括步骤(I)以及步骤(II)，其中所述步骤(I)包括以下各步骤：步骤I-1，该步骤包括下述反应1：在二价离子或者多元胺的存在下，使样品中的L型和/或D型氨基酸(L-AA和/或D-AA)、该氨基酸所对应的氨酰tRNA合成酶(AARS)和腺苷三磷酸(ATP)反应，形成包含氨酰腺苷酸(氨酰AMP)和AARS的复合体(氨酰AMP-AARS复合体)；步骤I-2，该步骤包括下述反应2：使反应1和/或反应3中形成的氨酰AMP-AARS复合体与核苷酸反应，使AARS和氨基酸(L-AA和/或D-AA)从该复合体中游离；步骤I-3，该步骤包括下述反应3：通过将反应2中游离的氨基酸(L-AA和/或D-AA)和/或AARS在反应1中进行再利用，形成氨酰AMP-AARS复合体反应；以及步骤I-4，重复步骤I-2和步骤I-3的步骤；所述步骤(I...

【专利技术属性】
技术研发人员：中柄朋子，青木秀之，喜田干子，山田健太，金子昌二，钉宫章光，
申请(专利权)人：池田食研株式会社，公立大学法人广岛市立大学，
类型：发明
国别省市：日本,JP