使用结合元件用于分析的装置和方法制造方法及图纸

技术编号:19875446 阅读:30 留言:0更新日期:2018-12-22 16:54
使用结合元件用于分析的装置和方法。一种方法,包括:形成含有下列成分的组合物:一定量的报告化合物,能够捕获报告化合物的结合元件,以及一定量的能够与报告化合物形成复合物的靶核酸,与报告化合物形成复合物抑制报告化合物被结合元件捕获;将一部分量的报告化合物与至少一部分量的靶核酸形成复合物;将没有与靶核酸形成复合物的剩余部分量的报告化合物捕获在结合元件上;以及测定表明捕获在结合元件上的报告化合物的存在和/或量的值。

【技术实现步骤摘要】
使用结合元件用于分析的装置和方法本专利技术是中国专利技术专利申请,申请号201310055729.4的分案申请,该分案申请又是中国专利技术专利申请,申请号200780041209.0的分案申请。优先权声明本申请要求2007年7月23日提交的美国申请N0.60/951,364和2006年11月6日提交的美国申请N0.60/856,782的优先权,上述每个申请以其全文引为参考。
本专利技术涉及分析方法,例如多核苷酸的分析方法。相关申请本申请涉及2005年5月6日提交的国际专利申请PCT/EP2005/004923的美国继续申请,该国际专利申请指定为美国并要求了2004年5月6日提交的德国专利申请DE102004022263的优先权,美国继续申请N0.US11/593,021题为“用于检测分子相互作用的方法和装置”并于2006年11月6日提交,每个这些申请在此以其全文引为参考。
技术介绍
生物样品中病原体的存在可以通过分析样品中与病原体的存在有关的多核苷酸来确定。细菌,霉菌和病毒是可以在相关多核苷酸的分析的基础上确定的病原体的例子。EPO637999公开了通过进行多核苷酸聚合反应在样品中扩增预先选定的多核苷酸的装置。该装置包括显微制造限定出样品入口的基体,以及从入口延伸出的中等尺度的流动系统。中等尺度的流动系统包括多核苷酸聚合反应室,它与入口流体连通,入口提供用于预先选定的多核苷酸的聚合和扩增所需的试剂。装置可用于在反应室(PCR室)中执行聚合酶链反应(PCR)。PCR室被提供样品多核苷酸,聚合酶,核苷三磷酸,引物和聚合酶链反应所需的其它试剂,装置被提供有用于对反应室内含物的温度进行温度控制的工具,以将温度控制到使双链多核苷酸去杂交,使引物退火,以及使多核苷酸聚合和扩增的温度。但是,使常规的微流体装置适合地协调各种不同的任务,可能是困难的。
技术实现思路
对于能够以简单的方式进行样品分析的装置和方法存在着需求。本专利技术提供了下述技术方案:1.方法,包括:形成含有下列成分的组合物:-一定量的报告化合物,-能够捕获报告化合物的结合元件,以及-一定量的能够与报告化合物形成复合物的靶核酸,与报告化合物形成复合物抑制报告化合物被结合元件捕获;将一部分量的报告化合物与至少一部分量的靶核酸形成复合物;将没有与靶核酸形成复合物的剩余部分量的报告化合物捕获在结合元件上;以及测定表明捕获在结合元件上的报告化合物的存在和/或量的值。2.技术方案1的方法,还包括在表明捕获在结合元件上的报告化合物的存在和/或量的值的基础上测定表明靶核酸的存在和/或量的值。3.技术方案1或2的方法,还包括在将一部分量的报告化合物与至少一部分量的靶核酸形成复合物,将没有与靶核酸形成复合物的剩余部分量的报告化合物捕获在结合元件上,以及测定表明捕获在结合元件上的报告化合物的存在和/或量的值的步骤之后,从结合元件上释放剩余部分量的报告化合物。4.技术方案3的方法,还包括进行释放,形成复合物,捕获以及测定的步骤额外的N次,其中N是大于或等于I的整数。5.技术方案4的方法,其中N≥5。6.技术方案4的方法,其中N≥10。7.技术方案4的方法,其中N≥20。8.技术方案1到7任一项的方法,还包括在形成复合物的步骤之前:将至少一部分量的报告化合物捕获在结合元件上;测定表明捕获在结合元件上的报告化合物的存在和/或量的值;以及从结合元件上释放被捕获的报告化合物。9.技术方案1到8任一项的方法,其中将一部分量的报告化合物与至少一部分量的靶核酸形成复合物的步骤,以及将没有与靶核酸形成复合物的剩余部分量的报告化合物捕获在结合元件上的步骤,相伴进行。10.技术方案1到9任一项的方法,还包括对靶核酸进行扩增。11.技术方案10的方法,其中靶核酸的扩增在将一部分量的报告化合物与至少一部分量的靶核酸形成复合物的步骤之前开始。12.技术方案1到11任一项的方法,其中表明捕获在结合元件上的报告化合物的存在和/或量的值,在将一部分量的报告化合物与至少一部分量的靶核酸形成复合物,以及将没有与靶核酸形成复合物的剩余部分量的报告化合物捕获在结合元件上达到化学平衡之前进行测定。13.技术方案1到12任一项的方法,其中表明捕获在结合元件上的报告化合物的存在和/或量的值,在将一部分量的报告化合物与至少一部分量的靶核酸形成复合物的步骤,以及将没有与靶核酸形成复合物的剩余部分量的报告化合物捕获在第二结合元件上的步骤开始后I秒到120秒时进行测定。14.技术方案1到13任一项的方法,其中报告化合物包含一种或多种可检测的标记物。15.技术方案14的方法,其中一种或多种可检测的标记物是荧光标记物。16.技术方案1到15任一项的方法,其中报告化合物是寡核苷酸。17.技术方案10到16任一项的方法,还包括在将靶核酸进行扩增之前,对它们进行反转录。18.技术方案1到17任一项的方法,其中形成物质的组合物包括形成含有以下的物质的组合物:-一定量的第一报告化合物,-一定量的能够与第一报告化合物形成复合物的第一靶核酸,与第一报告化合物形成复合物抑制第一报告化合物被结合元件捕获,-一定量的第二报告化合物,以及-一定量的能够与第二报告化合物形成复合物的第二靶核酸,与第二报告化合物形成复合物抑制第二报告化合物被结合元件捕获。19.技术方案1到18任一项的方法,其中结合元件包含一种或多种能够将报告化合物捕获在结合元件上的不同的捕获分子。20.技术方案129的方法,其中捕获分子是寡核苷酸。21.技术方案19或20的方法,其中不同的捕获分子布置在结合元件的不同位置上。22.技术方案19到21任一项的方法,其中报告化合物通过与捕获分子形成复合物而被捕获在结合元件上。23.技术方案19到22任一项的方法,其中报告化合物上的至少一部分能够与靶核酸形成复合物的相互作用位点,也能够与捕获分子形成复合物。24.技术方案19到23任一项的方法,其中捕获分子和靶核酸竞争与报告化合物形成复合物。25.技术方案20到24任一项的方法,其中扩增包括使双链核酸变性的步骤。26.技术方案25的方法,其中双链核酸包括报告化合物与靶核酸的复合物,报告化合物与捕获分子的复合物,双链报告化合物以及双链靶核酸。27.技术方案20到26任一项的方法,其中扩增包括将引物分子与靶核酸退火的步骤。28.技术方案27的方法,其中退火步骤与将一部分量的报告化合物与至少一部分量的靶核酸形成复合物的步骤,和/或将没有与靶核酸形成复合物的剩余部分量的报告化合物捕获在结合元件上的步骤相伴进行。29.技术方案20到28任一项的方法,其中扩增是循环式扩增。30.技术方案29的方法,其中循环式扩增是PCR。31.技术方案30的方法,其中进行PCR包括使用具有外切核酸酶活性的聚合酶。32.技术方案29到31任一项的方法,其中循环式扩增包括至少10个循环。33.技术方案29到32任一项的方法,其中循环式扩增包含至少20个循环。34.技术方案29到33任一项的方法,其中表明捕获在结合元件上的报告化合物的存在和/或量的值,在循环式扩增的至少一个循环后进行测定。35.技术方案29到34任一项的方法,其中表明捕获在结合元件上的报告化合物的存在和/或量的值,在循环式扩增的每个循环后进行测定。36.技术方案29到35任本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.方法,包括:形成含有下列成分的组合物:‑一定量的报告化合物,‑能够捕获报告化合物的结合元件,以及‑一定量的能够与报告化合物形成复合物的靶核酸,与报告化合物形成复合物抑制报告化合物被结合元件捕获;将一部分量的报告化合物与至少一部分量的靶核酸形成复合物;将没有与靶核酸形成复合物的剩余部分量的报告化合物捕获在结合元件上;以及测定表明捕获在结合元件上的报告化合物的存在和/或量的值。

【技术特征摘要】
2006.11.06 US 60/856782;2007.07.23 US 60/9513641.方法,包括:形成含有下列成分的组合物:-一定量的报告化合物,-能够捕获报告化合物的结合元件,以及-一定量的能够与报告化合物形成复合物的靶核酸,与报告化合物形成复合物抑制报告化合物被结合元件捕获;将一部分量的报告化合物与至少一部分量的靶核酸形成复合物;将没有与靶核酸形成复合物的剩余部分量的报告化合物捕获在结合元件上;以及测定表明捕获在结合元件上的报告化合物的存在和/或量的值。2.权利要求1的方法,还包括在表明捕获在结合元件上的报告化合物的存在和/或量的值的基础上测定表明靶核酸的存在和/或量的值。3.权利要求1或2的方法,还包括在将一部分量的报告化合物与至少一部分量的靶核酸形成复合物,将没有与靶核酸形成复合物的剩余部分量的报告化合物捕获在结合元件上,以及测定表明捕获在结合元件上的报告化合物的存在和/或量的值的步骤之后,从结合元件上释放剩余部分量的报告化合物。4.权利要求3的方法,还包括进行释放,形成复合物,捕获以及测定的步骤额外的N次,其中N...

【专利技术属性】
技术研发人员:卡特林施泰因梅策尤金埃曼特劳特托尔斯滕舒尔茨托马斯凯泽
申请(专利权)人:美艾利尔技术公司
类型:发明
国别省市:德国,DE

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