靶向ERRα基因的慢病毒重组载体及其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种靶向ERRα基因的慢病毒重组载体，包括pLVX‑shRNA1表达载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点序列和靶向ERRα基因的寡核苷酸链序列；所述寡核苷酸链序列包括正义链序列和反义链序列，序列结构包括BamH I酶切位点、靶核苷酸序列、茎环结构、靶序列互补序列、终止序列和AATT；所述多克隆位点序列包括BamH I酶切位点和EcoR I酶切位点。本发明专利技术属于基因工程技术领域，本发明专利技术提供的靶向ERRα基因的慢病毒重组载体特异性好，具有高效、持久的干扰效果，可进一步形成ERRα基因沉默的细胞株，并将用于肺癌药物筛选和肺癌基因治疗研究。

【技术实现步骤摘要】
靶向ERRα基因的慢病毒重组载体及其构建方法和应用
本专利技术属于基因工程
，尤其涉及靶向ERRα基因的慢病毒重组载体及其构建方法和应用。
技术介绍
雌激素受体相关受体α(estrogen-relatedreceptorα，ERRα)属于核受体超家族成员，是一类无需与配体结合即可产生生物学功能的孤儿核受体，广泛表达于心肌、消化道、大脑、骨骼肌、乳腺癌和卵巢癌等。ERRα的生物学功能主要体现在以不同的方式参与雌激素信号途径，不仅参与糖代谢、脂肪代谢等生理过程，与肺癌、乳腺癌、子宫内膜癌等雌激素依赖性肿瘤的发生密切相关，还与肥胖、糖尿病、骨质疏松等代谢性疾病的发生相关。ERRα被作为乳腺癌等的诊断标志，在临床中得到应用。RNA干扰技术可以高效特异沉默靶基因表达，广泛应用于特异抑制基因的表达及其功能研究。现有研究表明：ERRα是肺癌的危险因素，在肺腺癌中有促进癌细胞生长、促进新生血管生成和抗凋亡的作用。然而，利用RNA干扰技术进行ERRα相关表达调控的研究较少。中国专利申请CN103695470A公开了一种慢病毒重组表达载体，由pWPXLd慢病毒质粒的多克隆位点(PmeI和SmaI位本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.靶向ERRα基因的慢病毒重组载体，其特征在于：包括pLVX‑shRNA1表达载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点序列和靶向ERRα基因的寡核苷酸链序列；所述寡核苷酸链序列包括正义链序列和反义链序列，序列结构包括BamH I酶切位点、靶核苷酸序列、茎环结构、靶序列互补序列、终止序列和AATT；所述多克隆位点序列包括BamH I酶切位点和EcoR I酶切位点。

【技术特征摘要】
1.靶向ERRα基因的慢病毒重组载体，其特征在于：包括pLVX-shRNA1表达载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点序列和靶向ERRα基因的寡核苷酸链序列；所述寡核苷酸链序列包括正义链序列和反义链序列，序列结构包括BamHI酶切位点、靶核苷酸序列、茎环结构、靶序列互补序列、终止序列和AATT；所述多克隆位点序列包括BamHI酶切位点和EcoRI酶切位点。2.根据权利要求1所述的靶向ERRα基因的慢病毒重组载体，其特征在于：所述正义链序列选自gatccctgcaaagccttcttcaagttcaagagacttgaagaaggctttgcagtttttt，即SEQIDNO：3，或gatccgtctcatctgctggtggttttcaagagaaaccaccagcagatgagactttttt，即SEQIDNO：5；所述反义链序列选自aattaaaaaactgcaaagccttcttcaagtctcttgaacttgaagaaggctttgcagg，即SEQIDNO：4，或aattaaaaaagtctcatctgctggtggtttctcttgaaaaccaccagcagatgagacg，即SEQIDNO：6。3.根据权利要求2所述的靶向ERRα基因的慢病毒重组载体，其特征在于：所述正义链序列选自gatccctgcaaagccttcttcaagttcaagagacttgaagaaggctttgcagtttttt，即SEQIDNO：3；所述反义链序列选自aattaaaaaactgcaaagccttcttcaagtctcttgaacttgaagaaggctttgcagg，即SEQIDNO：4。4.根据权利要求1至3中任一项所述的靶向ERRα基因的慢病毒重组载体，其特征在于：所述pLVX-shRNA1表达载体购自Clontech公司。5.根据权利要求1所述的靶向ERRα基因的慢病...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁建辉，李萍，谢妮，吴雯，曾庆波，任晓虎，吴德生，孙健，
申请(专利权)人：深圳市南山区疾病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：广东,44