TEV蛋白酶突变体、基因、生物材料、制备方法、试剂或试剂盒和应用技术

本发明专利技术提供了一种TEV蛋白酶突变体、基因、生物材料、制备方法、试剂或试剂盒和应用，涉及基因工程技术领域。该TEV蛋白酶突变体与具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相比，突变至少如下七个氨基酸残基：第17位由T突变为S；第56位由L突变为V；第68位由N突变为D；第77位由I突变为V；第135位由S突变为G；第219位由S突变为V；第233位由Q突变为H。该TEV蛋白酶突变体具有良好的酶活性、稳定性和特异性。上述TEV蛋白酶突变体的基因、生物材料、TEV蛋白酶突变体的制备方法或包含上述TEV蛋白酶突变体的试剂或试剂盒，以及上述技术方案的应用与TEV蛋白酶突变体基于相同的发明专利技术构思。

【技术实现步骤摘要】
TEV蛋白酶突变体、基因、生物材料、制备方法、试剂或试剂盒和应用
本专利技术涉及基因工程领域，尤其是涉及一种TEV蛋白酶突变体、基因、生物材料、制备方法、试剂或试剂盒和应用。
技术介绍
原核表达广泛应用于生物工程中，利用原核表达系统表达的基因来源不计其数，涵盖众多领域的研究方向，包括蛋白纯化、定位以及功能分析等。根据表达系统的不同主要可分为大肠杆菌表达系统、枯草芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统等等。其中的大肠杆菌表达系统因为培养方法简单、表达背景清楚、表达成本低而技术最为成熟，应用也最为广泛。但大肠杆菌表达系统缺乏真核表达系统基因翻译后修饰所特有的酶类、辅助因子等物质，常常表达出的外源基因蛋白不能正确折叠形成天然构象而出现包涵体表达，并且包涵体形式的目的蛋白往往给蛋白复性带来困难，同时也往往给蛋白的活性大打折扣甚至很多完全失活。针对该弊端，外源蛋白表达实验中除了优化培养诱导条件，添加促溶促表达标签表达目的蛋白，继而采用酶切去除标签也可以提高外源基因蛋白的表达量及活性。TEV蛋白酶是来源于烟草蚀斑病毒(TobaccoEtchVirus,TEV)的NIa蛋白的催化片段，分子量约27KDa本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种TEV蛋白酶突变体，其特征在于，与具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列相比，突变至少如下七个氨基酸残基：第17位氨基酸残基由苏氨酸突变为丝氨酸；第56位氨基酸残基由亮氨酸突变为缬氨酸；第68位氨基酸残基由天冬酰胺突变为天冬氨酸；第77位氨基酸残基由异亮氨酸突变为缬氨酸；第135位氨基酸残基由丝氨酸突变为甘氨酸；第219位氨基酸残基由丝氨酸突变为缬氨酸；第233位氨基酸残基由谷氨酰胺突变为组氨酸。

【技术特征摘要】
1.一种TEV蛋白酶突变体，其特征在于，与具有如SEQIDNO.1所示的氨基酸序列相比，突变至少如下七个氨基酸残基：第17位氨基酸残基由苏氨酸突变为丝氨酸；第56位氨基酸残基由亮氨酸突变为缬氨酸；第68位氨基酸残基由天冬酰胺突变为天冬氨酸；第77位氨基酸残基由异亮氨酸突变为缬氨酸；第135位氨基酸残基由丝氨酸突变为甘氨酸；第219位氨基酸残基由丝氨酸突变为缬氨酸；第233位氨基酸残基由谷氨酰胺突变为组氨酸。2.根据权利要求1所述的TEV蛋白酶突变体，其特征在于，所述TEV蛋白酶突变体具有如SEQIDNO.3所示的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的TEV蛋白酶突变体，其特征在于，所述TEV蛋白酶突变体的N端和/或C端连接有标签；优选地，所述TEV蛋白酶突变体的C端连接有His标签。4.根据权利要求1-3中任一项所述的TEV蛋白酶突变体，其特征在于，所述TEV蛋白酶突变体为由大肠杆菌表达系统表达得到的蛋白质。5.编码权利要求1-4中任一项所述的TEV蛋白酶突变体的基因。6.根据权利要求6所述的基因，其特征在于，具有如SEQIDNO.4所示序列。7.含有权利要求5或6所述基因的生物材料，其特征在于，包括表达盒、重组载体、转基因细胞系或重组微生物；优选地，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：王欢，付康，初腾，
申请(专利权)人：生工生物工程上海股份有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31