一种磷脂酶B及其在制备甘油磷酸胆碱中的应用制造技术

技术编号:19875103 阅读:37 留言:0更新日期:2018-12-22 16:46
本发明专利技术公开了一种磷脂酶B及其在制备甘油磷酸胆碱中的应用。该磷脂酶B的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。培养包括SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列的重组细胞,从而获得磷脂酶B。将所得磷脂酶B应用于制备甘油磷脂酰胆碱中,解决了磷脂酶B的来源问题,同时较好的解决了磷脂酶B出现的包涵体问题,弥补了现有技术中,单用磷脂酶A1催化中遇到的酰基转移的不足。为工业生产提供了一种可以高效生产甘油磷脂酰胆碱的方法。该方法可以显著的提高酶的催化效率、产品的得率和底物的利用率。

【技术实现步骤摘要】
一种磷脂酶B及其在制备甘油磷酸胆碱中的应用
本专利技术属于生物催化技术和磷脂类产品的制备领域,特别涉及一种磷脂酶B及其在制备甘油磷脂酰胆碱中的应用。
技术介绍
L-a-甘油磷脂酰胆碱(L-a-GPC,CAS号:28319-77-9)是自然界中天然存在的物质,是由磷脂分子上两条脂肪酸链完全被水解的产物,是体内卵磷脂代谢的产物之一。GPC是合成乙酰胆碱神经递质的前体,并能迅速分解磷脂降解的中间体,还可以迅速提供跨大脑血脑屏障的胆碱,被证明能够增强年轻个体的生长激素释放,增加阿兹海默氏症类型老年痴呆症患者的荷尔蒙分泌,如治疗阿兹海默症、小脑性共济失调、精神分裂症、双相情感障碍、神经和精神疾病等,还可以降低血脂、保护血管、改善老年人认知能力和记忆力。这些重要的医药价值和保健价值,使得GPC在医药领域和食品添加剂领域存在巨大的市场需求,但它在自然界中的含量较少,主要存在于动物器官、牛的乳汁和卷心菜中。因此,创建一种高效生产GPC的技术将具有重要的药用、社会和研究价值。早期的GPC主要是从牛的胰脏组织中直接提取制备的,该方法技术及工艺比较基础,获取量相对较低。随着GPC药用、保健、临床价值的研究本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种磷酸酶B,其特征在于,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种磷酸酶B,其特征在于,核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。2.一种重组细胞,其特征在于,包括SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。3.基于权利要求2所述的一种重组细胞的构建方法,其特征在于,将SEQIDNO.1所示的核苷酸序列克隆到表达质粒上,得重组质粒;再将重组质粒转化宿主菌,即得重组细胞。4.根据权利要求3所述的一种重组细胞的构建方法,其特征在于,具体包括以下步骤:第一步,在SEQIDNO.2所示的核苷酸序列的两端设计酶切位点NcoI和XhoI,亚克隆到载体pET-28a上,获得重组质粒pET-28a-plb;第二步,将重组质粒pET-28a-plb转化进入大肠杆菌表达宿主BL21(DE3),得到磷脂酶B的表达菌种BL21(DE...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈可泉卢媛媛王昕李辉欧阳平凯
申请(专利权)人:南京工业大学
类型:发明
国别省市:江苏,32

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