用于纯化纤维蛋白原的方法技术

本发明专利技术涉及一种用于纯化纤维蛋白原的方法，并且更具体地，涉及一种包括以下步骤的用于纯化纤维蛋白原的方法：(a)(第一甘氨酸沉淀)通过向其中添加甘氨酸直到甘氨酸浓度变为1.5‑2.5M，使在含有纤维蛋白原的溶液中含有的所述纤维蛋白原沉淀，去除上清液，然后获得沉淀物；(b)(第二甘氨酸沉淀)，通过在裂解缓冲液中裂解由步骤(a)中的第一甘氨酸沉淀获得的沉淀物而获得裂解溶液，通过向其中添加甘氨酸直到甘氨酸浓度变为0.2‑1.2M使所述裂解溶液沉淀，并且回收上清液；(c)(第三甘氨酸沉淀)通过向其中添加甘氨酸直到甘氨酸浓度变为1.5‑2.5M使步骤(b)的上清液沉淀，并且获得沉淀物；和(d)，通过在裂解缓冲液中裂解步骤(c)的沉淀物获得裂解溶液，和通过纳米过滤器在其上进行纳米过滤(NF)。根据本发明专利技术，用于纯化纤维蛋白原蛋白的新的方法，因为病原性的动物来源的组分(病毒)的流入基本被拦截而是一种非常安全的方法，因为可通过简单的方法纯化具有高产率的高纯度纤维蛋白原蛋白而是非常经济和有效的，并且因为与常规方法纯化的纤维蛋白原相比具有通过具有高纯度而增加局部作用的优点，而可以用于预防和治疗血液相关疾病，特别是血液凝固病症。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于纯化纤维蛋白原的方法
本专利技术涉及一种用于纯化纤维蛋白原的方法，并且更具体地，涉及一种包括以下步骤的用于纯化纤维蛋白原的方法：(a)通过将甘氨酸添加到含有纤维蛋白原的溶液中使甘氨酸的浓度为1.5至2.5M而使该溶液中的纤维蛋白原沉淀，然后去除上清液，并回收沉淀物(第一甘氨酸沉淀)；(b)使步骤(a)的第一甘氨酸沉淀的沉淀物溶解于溶解缓冲液中以获得溶液，通过向其中添加甘氨酸使甘氨酸浓度为0.2至1.2M而使所述溶液沉淀，和回收上清液(第二甘氨酸沉淀)；(c)通过向其中添加甘氨酸使甘氨酸浓度为1.5至2.5M而使步骤(b)的上清液沉淀，和回收沉淀(第三甘氨酸沉淀)；和(d)使步骤(c)的沉淀溶解于溶液缓冲液以获得溶液，并使用纳米过滤器使所述溶液经受纳米过滤(NF)。
技术介绍
纤维蛋白原，也称为凝血因子I，在止血和伤口愈合中起关键作用。它是在肝脏中合成的糖蛋白，具有340kDa的表观分子量，并且由两个二聚体组成，两个二聚体中的每个由通过二硫桥连接的称为Aα、Bβ和γ的三对不相同多肽链构成。它以约150-400μg/ml的浓度在血流中循环。在血管损伤时，血小板被激活并形成栓。纤维蛋白本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于纯化纤维蛋白原的方法，所述方法包括以下步骤：(a)通过将甘氨酸添加到含有纤维蛋白原的溶液中使甘氨酸的浓度为1.5至2.5M而使所述溶液的纤维蛋白原沉淀，然后去除上清液，并回收沉淀物(第一甘氨酸沉淀)；(b)使步骤(a)的第一甘氨酸沉淀的沉淀物溶解于溶解缓冲液中以获得溶液，通过向其中添加甘氨酸使甘氨酸浓度为0.2至1.2M而使所述溶液沉淀，和回收上清液(第二甘氨酸沉淀)；(c)通过向其中添加甘氨酸使甘氨酸浓度为1.5至2.5M而使步骤(b)的上清液沉淀，和回收沉淀物(第三甘氨酸沉淀)；和(d)使步骤(c)的沉淀物溶解于溶解缓冲液中以获得溶液，并使用纳米过滤器使所述溶液经受纳米过滤(N...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.01.12 KR 10-2016-00034751.一种用于纯化纤维蛋白原的方法，所述方法包括以下步骤：(a)通过将甘氨酸添加到含有纤维蛋白原的溶液中使甘氨酸的浓度为1.5至2.5M而使所述溶液的纤维蛋白原沉淀，然后去除上清液，并回收沉淀物(第一甘氨酸沉淀)；(b)使步骤(a)的第一甘氨酸沉淀的沉淀物溶解于溶解缓冲液中以获得溶液，通过向其中添加甘氨酸使甘氨酸浓度为0.2至1.2M而使所述溶液沉淀，和回收上清液(第二甘氨酸沉淀)；(c)通过向其中添加甘氨酸使甘氨酸浓度为1.5至2.5M而使步骤(b)的上清液沉淀，和回收沉淀物(第三甘氨酸沉淀)；和(d)使步骤(c)的沉淀物溶解于溶解缓冲液中以获得溶液，并使用纳米过滤器使所述溶液经受纳米过滤(NF)。2.权利要求1的方法，其中，在步骤(b)和(d)中用于溶解所述沉淀物的所述溶解缓冲液包含pH6.0至9.0的10至100mM柠檬酸钠。3.权利要求1的方法，其中，步骤(d)中的所述纳米过滤在20至37℃在0.5至2.5bar的压力下进行。4.权利要求1的方法，其中，步骤(a)的所述含有纤维蛋白原的溶液通过包括以下步骤的方法获得：(i)使用溶解缓冲液溶解含有纤维蛋白原的低温糊状物以获得溶液；(ii)将吸附剂添加到所述溶液，由此通过吸附去除杂质；和(...

【专利技术属性】
技术研发人员：金俊植，金孝珍，朴芝允，李柱浩，孙载云，辛庸源，
申请(专利权)人：株式会社绿十字控股，
类型：发明
国别省市：韩国,KR