一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒。该试剂盒包括样品裂解液，荧光免疫层析试纸条；裂解液用于将毒品小分子从毛发中溶出；荧光免疫层析试纸条包含PVC衬板、硝酸纤维膜、样品垫和吸收垫，样品垫、硝酸纤维膜和吸收垫依次交错固定于PVC衬板之上；样品垫上有毒品抗体‑量子点纳米颗粒复合物以及兔IgG‑量子点纳米颗粒复合物；硝酸纤维膜上设有检测线和质控线，检测线包被有毒品抗原‑牛血清白蛋白复合物，质控线包被有羊抗兔抗体。本发明专利技术能够快速、准确、灵敏的对毛发中的毒品进行检测。

【技术实现步骤摘要】
一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒
本专利技术属于生物检测
，特别是涉及一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒。
技术介绍
从最原始的罂粟，加工成鸦片、可卡因和海洛因，到现在的冰毒、吗啡、大麻等，毒品一直离人们的生活很近。毒品不仅影响了吸毒者的健康，而且对吸毒者的家庭、社会、国家都造成了巨大的危害。为了与毒品作斗争，各国政府投入了大量的资金，我国在挽救、治疗吸毒者，开展禁毒教育和科研，加大缉毒力度等方面也投入了大量的人力、物力和财力。然而如何针对吸毒人员作出有效、快速、准确、稳定的检测成为了亟待解决的问题。随着检测手段的进步，对人体毒品残留的检测中，相较于传统血液、尿液等检测对象，毛发检测的标本容易获得，现场操作简单，避免了吸毒人员的取证不配合，标本掺假，成为了一种重要的毒品检测对象。目前，气相色谱法、气相色谱-质谱联用法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、免疫分析法等多种检测方法已经被用于对毒品的检测。例如中国专利CN101750458B公开了一种检测人体中毒品残留的方法，其采用HPLC-Chip-MS/MS和HPLC-MS/MS来检测毒品残留，具有费用低，准确性和稳定性高的优点。中国专利CN104422762A公开了一种检测尿液、唾液、血液、毛发中毒品的酶联免疫试剂盒和检测方法，该酶联免疫试剂盒具有高特异性、高灵敏度等特点。随着禁毒形势的愈发严峻，新型、有效、快速、准确、稳定的检测方法和装置的需求进一步被放大。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒。本专利技术能够快速、准确、灵敏的对毛发中的毒品进行检测。为了达到上述的目的，本专利技术采取以下技术方案：一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒，包括样品裂解液，荧光免疫层析试纸条；所述裂解液用于将毒品小分子从毛发中溶出；所述荧光免疫层析试纸条包含PVC衬板、硝酸纤维膜、样品垫和吸收垫，所述样品垫、硝酸纤维膜和吸收垫依次交错固定于PVC衬板之上；所述样品垫上有毒品抗体-量子点纳米颗粒复合物以及兔IgG-量子点纳米颗粒复合物；所述硝酸纤维膜上设有检测线和质控线，检测线包被有毒品抗原-牛血清白蛋白复合物，质控线包被有羊抗兔抗体。本专利技术检测对象为毛发相对于常规检测方法要验血、验尿或者验口水，可以克服毒品测试取证困难和被测人员的不配合。在上述试剂盒中，裂解液和毛发的质量比为100：1。在上述试剂盒中，优选的，所述裂解液包含表面活性剂、角蛋白酶和缓冲溶液。其中，角蛋白酶能够腐蚀毛发表面，使毛发形成粗糙表面，从而利于毒品小分子从待测样品中溶出。表面活性剂能够洗涤毛发表面的污渍，使角蛋白酶能充分跟毛发接触，进一步提高毒品的溶出率。缓冲溶液能够中和角蛋白酶分解毛发产生的副反应物，提高角蛋白酶的生物活性。进一步地，所述表面活性剂优选非离子表面活性剂，例如聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、TritonX100、TritonX114、TritonX405、Tween20、Tween60、Tween80。相对于离子型表面活性剂，非离子表面活性剂不容易对离子强度产生影响，从而避免了影响后续试剂条中的免疫反应，提高了免疫检测的准确度。进一步地，所述缓冲溶剂优选为TRIS(无水四硼酸钠)-EDTA缓冲溶液。本专利技术的缓冲体系相对于其它缓冲体系来说pH范围接近8，性质温和，且溶液稳定性更高。进一步地，所述裂解液还包括碳酸氢钠。碳酸氢钠的添加主要是为了进一步调整裂解液的pH。进一步地，所述裂解液中表面活性剂的质量百分比为1-2％、角蛋白酶的含量为10000-50000IU/ML。在上述试剂盒中，优选的，所述量子点纳米颗粒的荧光发射波长范围为600-620nm，更优选的，发射波长为610nm。激发光的波长范围为360-430nm，更优选的，激发光的波长为365nm。在上述试剂盒中，优选的，所述量子点纳米颗粒为单一化合物形成的量子点或是几种化合物组装成的复合物量子点。更优选的，所述化合物选自ZnS、CdS、HgS、MgS、CdSe、ZnSe、ZnCdSe中的一种或多种。本专利技术荧光免疫层析试剂盒采用量子点纳米颗粒作为荧光发射物质，量子点在光学性能上表现出激发光谱宽二连续，发射光谱窄且对称，荧光强度高，荧光寿命长，稳定性好等特点，能够克服常规的稀土微球，胶乳微球等荧光材料，信号衰退块，信号梯度不明显等缺陷。本专利技术的荧光免疫试纸条显示的荧光信号可以在2个小时内不发生明显衰减，且信号的梯度非常明显，可以有效分层，使测试的荧光信号更加稳定和便于检测提高检测的灵敏度和准确度。此外，量子点荧光稳定，信号强且变化明显的性质，也使得荧光信号量值转化效果好，利于定量分析。本专利技术荧光免疫层析试纸条的检测原理为竞争法，T线(检测线)包被的抗原和待检样品中的毒品抗原竞争结合毒品抗体-量子点纳米颗粒复合物，当待检样品中无毒品抗原存在，毒品抗体-量子点纳米复合物在泳动过程中先和T线包被毒品抗原-牛血清白蛋白复合物结合，T线处形成毛发荧光免疫分析仪可测的荧光信号；当待检样品中有毒品抗原存在，则样品中的毒品抗原、包被毒品抗原和毒品抗原-牛血清白蛋白复合物竞争结合，此时T线处信号强度会随着样品中毒品抗原的增加而逐渐减弱；而兔IgG-量子点纳米颗粒复合物会继续泳动和质控线(C线)包被的羊抗兔抗体结合，在C线处形成稳定不变的信号；如果C线处检测不到信号，则试纸条已报废，不能再使用。本专利技术可采用配套的荧光检测分析仪，可以根据每个试剂批次分别导入相关的量值曲线，快速进样检测读数，控制时间在10秒以内，可以将荧光信号转化为对应的毒品或代谢物成分的浓度值，并且在显示屏幕上清晰显示，仪器可以保存500组以上的测试结果，且可以即时打印相关结果，包含对应的试剂批号，标本编号，测试时间，以及测试人员代码等信息。本专利技术可检测的毒品包括吗啡、病毒、氯胺酮等。本专利技术具有以下优点：1)本专利技术的荧光免疫检测毒品的试剂盒采用毛发作为检测样品，对毛发中的毒品含量进行定量检测，取样简单，克服毒品检测取样困难的问题；2)本专利技术利用表面活性剂、角蛋白酶和缓冲溶液组成的裂解液对毛发中的毒品进行溶出，表面活性剂、角蛋白酶和缓冲溶液的共同作用，能够有效提高毛发中毒品的溶出率和溶出速度。3)本专利技术利用量子点进行荧光标记，荧光稳定，信号强且变化明显，能够较好的将荧光信号进行量值转化，能够定量的对毒品含量进行分析，通过荧光分析仪能够较快的获得结果。4)本专利技术试剂盒用于检测毛发中的毒品含量，检测结果准确度高、精密度高、检测范围宽、稳定性高，且抗干扰(如毒品、洗发水、护发素、发胶等)能力强。附图说明图1是本专利技术荧光免疫层析试纸条的结构示意图，其中1为PVC衬板，2为样品垫，3为硝酸纤维膜，4为吸收垫，5为检测线，6为质控线。具体实施方式以下具体实施例是对本专利技术提供的方法与技术方案的进一步说明，但不应理解成对本专利技术的限制。一、荧光免疫检测毒品的试剂盒试剂盒包括样品裂解液，荧光免疫层析试纸条(结构参见图1)；裂解液用于将毒品小分子从待测样品中溶出；荧光免疫层析试纸条包含PVC衬板1、硝酸纤维膜3、样品垫2和吸收垫4，所述所述样品垫、硝酸纤维膜和吸收垫依次交错固定于PVC衬板之上；样品垫上有毒品抗体-量子点纳米颗粒复合物以及兔IgG-量子点纳米颗粒复合物；硝酸纤维膜本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒，其特征在于，包括样品裂解液，荧光免疫层析试纸条；所述裂解液用于将毒品小分子从毛发中溶出；所述荧光免疫层析试纸条包含PVC衬板、硝酸纤维膜、样品垫和吸收垫，所述样品垫、硝酸纤维膜和吸收垫依次交错固定于PVC衬板之上；所述样品垫上有毒品抗体‑量子点纳米颗粒复合物以及兔IgG‑量子点纳米颗粒复合物；所述硝酸纤维膜上设有检测线和质控线，检测线包被有毒品抗原‑牛血清白蛋白复合物，质控线包被有羊抗兔抗体。

【技术特征摘要】
1.一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒，其特征在于，包括样品裂解液，荧光免疫层析试纸条；所述裂解液用于将毒品小分子从毛发中溶出；所述荧光免疫层析试纸条包含PVC衬板、硝酸纤维膜、样品垫和吸收垫，所述样品垫、硝酸纤维膜和吸收垫依次交错固定于PVC衬板之上；所述样品垫上有毒品抗体-量子点纳米颗粒复合物以及兔IgG-量子点纳米颗粒复合物；所述硝酸纤维膜上设有检测线和质控线，检测线包被有毒品抗原-牛血清白蛋白复合物，质控线包被有羊抗兔抗体。2.根据权利要求1所述的一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒，其特征在于，裂解液和毛发的质量比为100：1。3.根据权利要求1所述的一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒，其特征在于，所述裂解液包含表面活性剂、角蛋白酶和缓冲溶液。4.根据权利要求1所述的一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒，其特征在于，所述表面活性剂优选非离子表面活性剂。5.根据权利要求1所述的一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：葛秀龙，欧阳云，方芳，郑水娣，
申请(专利权)人：杭州莱和生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33