一种羟基自由基的比色检测方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种羟基自由基的比色检测法及其应用，属于检测技术领域，检测试剂中的硝基咪唑与·OH自由基反应释放亚硝酸根，亚硝酸根与Griess试剂反应生成的红色偶氮产物在540nm处具有最大吸光值；该检测方法不仅可以通过UV‑Vis，还可以通过简单的肉眼识别来检测·OH自由基的浓度；另外，本发明专利技术还提供了一种简单、直观且易于商品化的试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
一种羟基自由基的比色检测方法及其应用
本专利技术属于检测
，尤其涉及一种羟基自由基的比色检测方法及其应用。
技术介绍
活性氧(ROS)由氧气还原形成，其分为自由基氧和非自由氧两大类。ROS在环境和生物过程中起重要作用，其中，羟基自由基(·OH)具有最强的反应活性，因此也常被认为是对生物体最具危害性的活性氧。·OH自由基可导致细胞中脂质、蛋白质、核酸和其他生物分子的氧化损伤。过量接触·OH自由基会导致细胞死亡，这一过程通常与多种疾病的发生与发展有关1。但是，·OH自由基并不总是有害的，利用·OH促进物质的氧化降解是消除环境污染的重要方法，如通过光电反应产生的·OH自由基可用于水体中有机污染物的降解。此外，·OH自由基是癌症放射治疗(例如X-ray)过程中的主要活性氧成分之一，其起到杀死肿瘤细胞的作用2-3。因此，·OH自由基的检测至关重要。由于羟基自由基寿命极短且反应过程不易控制，这给·OH的检测带来困难4。目前国内外已经建立了若干种·OH自由基的检测方法，其包括电化学法5-6、电子自旋共振法(EPR)7-8、化学发光法9-11、紫外-可见光谱法和荧光光谱法12-16以及基于纳米本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种羟基自由基的比色检测法，其特征在于，包括以下步骤：S1)配置羟基自由基标准液；S2)向羟基自由基标准液和样品中分别加入硝基咪唑溶液，反应生成亚硝酸根离子；S3)再将步骤S2反应生成的亚硝酸根离子加入到对氨基苯磺酰胺磷酸溶液和N‑1‑萘基乙二胺水溶液的混合溶液中，室温避光条件下反应后测定吸光值；S4)绘制羟基自由基标准液的标准曲线，并计算样品中羟基自由基的浓度。

【技术特征摘要】
1.一种羟基自由基的比色检测法，其特征在于，包括以下步骤：S1)配置羟基自由基标准液；S2)向羟基自由基标准液和样品中分别加入硝基咪唑溶液，反应生成亚硝酸根离子；S3)再将步骤S2反应生成的亚硝酸根离子加入到对氨基苯磺酰胺磷酸溶液和N-1-萘基乙二胺水溶液的混合溶液中，室温避光条件下反应后测定吸光值；S4)绘制羟基自由基标准液的标准曲线，并计算样品中羟基自由基的浓度。2.如权利要求1所述的比色检测法，其特征在于，所述羟基自由基标准液的浓度为0～25μM。3.如权利要求1所述的比色检测法，其特征在于，所述硝基咪唑为5-硝基咪唑或2-硝基咪唑，硝基咪唑溶液的溶剂为纯水或磷酸缓冲液。4.如权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘芳，邓涛，胡世友，
申请(专利权)人：广州中医药大学广州中医药研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44