检测莲草直胸跳甲ERP基因表达特性的引物及方法技术

本发明专利技术提供了检测莲草直胸跳甲ERP基因表达特性的荧光定量PCR引物，引物包含两对，其序列如SEQ ID NO.1‑4所示，本发明专利技术建立了莲草直胸跳甲雌雄虫取食不同CO2浓度培育的空心莲子草后ERP基因表达量检测的荧光定量PCR法，并进行了转录组的测序，对ERP基因荧光定量的表达量趋势与转录组的表达量趋势做了比较，为研究莲草直胸跳甲受到环境胁迫时产生的防御机制及ERP基因表达特性奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】
检测莲草直胸跳甲ERP基因表达特性的引物及方法
本专利技术涉及一种检测莲草直胸跳甲ERP基因表达特性的荧光定量PCR引物，属于生物

技术介绍
莲草直胸跳甲属鞘翅目，叶甲科，是空心莲子草的主要生防天敌之一。GeorgeVogt于1962年首次发现了莲草直胸跳甲对空心莲子草有很好的控制作用。其后，莲草直胸跳甲在美国、澳大利亚等地被广泛应用于空心莲子草的控制，并取得了较好的防治效果。我国于1986年从美国引进莲草直胸跳甲，并应用于空心莲子草的生物防治，在四川、浙江、福建、广西等地取得一定的成功。昆虫的天生免疫可以简单的分为体液免疫和细胞免疫，一旦入侵物较多时，细胞通过吞噬作用清除入侵物，当外源物太大不能被血细胞吞噬时，比如寄生蜂卵和幼蜂，真菌和原生动物寄生虫，甚至非生物对象，昆虫血细胞常会在外源物外形成一层或多层的鞘状物质以包囊外源物来杀死病原物。当外源物进入寄主血腔后，寄主血细胞与外源物随机接触，若颗粒血细胞接触到外源物，它能够识别外源物为“异己”进而附于外源物上，并释放出识别因子以吸引浆血细胞。浆血细胞附着后，在颗粒血细胞与外源物的复合体上延展，并且浆血细胞间会形成粒桥、微管本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测莲草直胸跳甲ERP基因表达特性的荧光定量PCR引物，其特征在于：包括符合荧光定量PCR反应特点的上下游引物：ERP‑F：5`‑AAGACATTCAAATCAGCATCGTAGA‑3`，ERP‑R：5`‑GGTAGGCAACTGGACATCAC‑3`；以及作为内参基因的上下游引物：Tubulin‑F: 5`‑AGATGTCCGCCACCTTCA‑3` ，Tubulin‑R: 5`‑GCCTCTTGGTATTGTTGGTATTCA‑3`。

【技术特征摘要】
1.一种检测莲草直胸跳甲ERP基因表达特性的荧光定量PCR引物，其特征在于：包括符合荧光定量PCR反应特点的上下游引物：ERP-F：5`-AAGACATTCAAATCAGCATCGTAGA-3`，ERP-R：5`-GGTAGGCAACTGGACATCAC-3`；以及作为内参基因的上下游引物：Tubulin-F:5`-AGATGTCCGCCACCTTCA-3`，Tubulin-R:5`-GCCTCTTGGTATTGTTGGTATTCA-3`。2.一种采用权利要求1所述引物检测莲草直胸跳甲ERP基因表达特性的荧光定量PCR方法，其特征在于按如下步骤：（1）cDNA第一链合成：提取样本的总RNA并纯化，采用反转录试剂盒得到以提取的RNA为模板反转录得到的cDNA；（2）对下述引物进行常规PCR检测该基因的荧光定量上下游引物：ERP-F：5`-AAGACATTCAAATCAGCATCGTAGA-3`ERP-R：5`-GGTAGGCAACTGGACATCAC-3`以及作为内参基因的上下游引物：Tubulin-F...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑丽祯，傅建炜，何肖云，林凌鸿，王秋月，李建宇，史梦竹，
申请(专利权)人：福建省农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：福建,35