一种化瘀散结灌肠液新的质量检测方法技术

本发明专利技术公开了一种化瘀散结灌肠液新的质量检测方法，所述质量检测方法包括：1)马兜铃酸的检查；2)芍药苷和绿原酸的含量测定；含量测定包括以下步骤：(1)色谱条件与系统适用性实验；(2)对照品溶液的制备；(3)供试品溶液的制备；(4)测定。本发明专利技术的化瘀散结灌肠液新的质量检测方法中，增加了马兜铃酸的检查和该中药组方中一味中药金银花的有效成分之一绿原酸的含量测定及其测定方法。新标准中规定用高效液相色谱方法同时测定处方中赤芍和金银花二味中药材中有效成分芍药苷和绿原酸的含量(每毫升药液含芍药苷不低于1.2mg，绿原酸不低于0.5mg)，该方法操作简便，专属性强，重现性好，使该制剂的质量控制检测更加安全、有效。

【技术实现步骤摘要】
一种化瘀散结灌肠液新的质量检测方法
本专利技术涉及药品的质量检测
，尤其涉及中成药“化瘀散结灌肠液”的一种新质量检测方法。
技术介绍
化瘀散结灌肠液是瑞成制药有限公司生产的一种中成药，批准文号【国药准字Z20025840】，由当归、赤芍、地黄、川穹、桃仁、红花、丹参、川牛膝、三棱、莪术、鳖甲、龟甲、关木通、连翘、金银花共15味中药材制备而成，具有活血化瘀、软坚散结、行气导滞、清热解毒之功效，可用于慢性盆腔炎、急性盆腔炎的辅助治疗，对附件炎性包块、盆腔结核性包块、盆腔血瘀性包块、子宫肌瘤、子宫内膜异位症、子宫腺肌瘤、卵巢囊肿、痛经等症具有显著疗效。现行的质量检测主要包括三个部分：(1)鉴别项目中采用薄层层析法鉴定阿魏酸和儿茶醛；(2)检查项目中包括测定pH和相对密度；(3)含量测定项目：高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.05moL/L磷酸二氢钾(24:76)为流动相，检测波长为230nm，理论板数按芍药苷峰计算应不低于2500；对照品溶液的制备：取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；供试品溶液的制备：精密量取本品3ml，通过中性氧化铝柱(100～200目，5g，内径为1cm，用50％甲醇10ml预洗)，用50％甲醇洗脱，收集洗脱液至50ml容量瓶中适量，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。每1mL本品的芍药苷含量不得少于1.20mg【国家药品标准WS-10612(ZD-0612)-2002-2012Z】。
技术实现思路
本专利技术提供一种化瘀散结灌肠液新的质量检测方法，可更好地控制化瘀散结灌肠液制剂的质量，保证该制剂的稳定性和有效性，对产品的现有质量标准进行修订和提高。基于含量测定项包含有芍药苷的含量测定，故在鉴别项目中去掉了芍药苷的检查，基于本品处方中含有木通药材，木通中含有马兜铃酸I，鉴于马兜铃酸I具有肾毒性的研究文献报道，本质量标准中检查项中增加了对马兜铃酸I的检查；含量测定项目中增加了一项组方中一味重要中药金银花的有效成分绿原酸的含量测定及其测定方法。本方法采用高效液相色谱同时测定处方中赤芍和金银花二味中药材中的有效成分芍药苷和绿原酸。【鉴别】取本品1瓶，超声30min，离心，取上清液，用乙醚振摇提取2次，每次50ml，合并乙醚液，挥干，残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取原儿茶醛对照品加乙醇制成1mg/ml的对照品溶液。照薄层色谱法(2015版药典四部通则0502)试验，吸取上述两种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-丙酮-甲酸(8:1:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％三氯化铁乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。【检查】马兜铃酸I：照高效液相色谱法(2015版药典四部通则0512)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为0.1％磷酸(A)和乙腈(B)，采用梯度洗脱，所述梯度洗脱为0min.～40min.时(A)和(B)的体积比为59:41，40min.～50min.时(A)和(B)的体积比为59→20:41→80，50min.～55min.时(A)和(B)的体积比为20→59:80→41，55min.～60min.时(A)和(B)的体积比为59:41；检测波长为260nm，柱温为30℃。理论塔板数按马兜铃酸I峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备：取马兜铃酸I对照品，精密称定，置棕色容量瓶中，加甲醇制成每1ml含马兜铃酸12μg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品一瓶，超声处理30min，精密移取20ml置具塞三角瓶中，精密加入甲醇80ml，密塞，超声处理30min，过滤，精密量取续滤液50ml，加适量甲醇溶解并转移至10ml容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，摇匀，即得。【含量测定】芍药苷和绿原酸：取对照品溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使色谱峰的峰高达到满量程的20％，再取供试品溶液20μl测定，供试品色谱中应不得出现与对照品色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在190-300nm波长范围的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。色谱条件：色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为0.1％磷酸(A)和乙腈(B)，采用梯度洗脱，所述梯度洗脱为0min.～26min.时(A)和(B)的体积比为87:13，26min.～27min.时(A)和(B)的体积比为87→20:13→80，27min.～32min.时(A)和(B)的体积比为20:80；32min.～32.1min.时(A)和(B)的体积比为20→87:80→13，32.1min.～36min.时(A)和(B)的体积比为87:13。检测波长为230nm，柱温为30℃。理论塔板数按绿原酸峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备：取绿原酸、芍药苷对照品，精密称定，置棕色容量瓶中，加50％甲醇制成每1ml含绿原酸15μg、含芍药苷30μg的混合溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品一瓶，超声处理30分钟，摇匀，滤过，取续滤液，精密移取续滤液1ml置50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。测定方法：分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10μl。注入液相色谱仪，测定，即得。本品每1ml含芍药苷(C23H28O11)不得少于1.2mg；含绿原酸(C16H18O9)不得少于0.5mg。本专利技术优点在于：1、本方法中对马兜铃酸I的检查采用的HPLC色谱条件和方法，检测结果准确、可行；对该制剂中的两种有效成分芍药苷和绿原酸，所采用的HPLC色谱条件和方法，检测结果准确、可行。本专利技术的质量检测方法稳定可靠、专属性强、重现性好。2、增加马兜铃酸I的鉴别能更好的保证药品的安全性，选择处方中芍药苷和绿原酸进行含量测定能全面有效地控制化瘀散结灌肠液的质量，有利于稳定产品的质量，确保临床用药的安全性和有效性，更好地满足医疗和市场的需求。附图说明附图1是实施例1中马兜铃酸I对照品HPLC谱图。附图2是实施例1中样品(批号20170326)HPLC谱图。附图3是实施例2中马兜铃酸I对照品HPLC谱图。附图4是实施例2中样品(批号20170326)加标HPLC谱图。附图5是实施例3中马兜铃酸I对照品HPLC谱图。附图6是实施例3中样品(批号20170326)加标HPLC谱图。附图7是实施例4中马兜铃酸I对照品HPLC谱图。附图8是实施例4中样品(批号20170326)加标HPLC谱图。附图9是实施例5中马兜铃酸I对照品HPLC谱图。附图10是实施例5中样品(批号20170709)HPLC谱图。附图11是实施例6中马兜铃酸I对照品HPLC谱图。附图12是实施例6中样品(批号20171018)HPLC谱图。附图13是实施例7中绿原酸、芍药苷对照品混合溶液HPLC谱图。附图14是实施例7中样品(批号20170326)HPLC谱图。附图15是实本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种化瘀散结灌肠液新的质量检测方法，其特征在于，所述方法包括：(1)用HPLC检测马兜铃酸；所述HPLC的条件如下：a)供试品溶液的制备：取受试样品一瓶，超声处理30min，精密移取20ml置具塞三角瓶中，精密加入甲醇80ml，密塞，超声处理30min，过滤，精密量取续滤液5ml，加适量甲醇溶解并转移至10ml容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，摇匀，即得；b)对照品溶液的制备：取马兜铃酸I对照品，精密称定，置棕色容量瓶中，加甲醇制成每1ml含马兜铃酸I 2μg的溶液，即得；c)以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为0.1％磷酸(A)和乙腈(A)，采用梯度洗脱，所述梯度洗脱为0min～40min时(A)和(B)的体积比为59:41，40min～50min时(A)和(B)的体积比为20:80，50min～60min时(A)和(B)的体积比为59:41；检测波长为240‑280nm，柱温为25‑35℃；塔板数按马兜铃酸I峰计算应不低于3000；(2)用HPLC同时测定芍药苷和绿原酸的含量；所述HPLC的条件如下：a)供试品溶液的制备：取受试样品一瓶，超声处理30分钟，摇匀，滤过，取续滤液，精密移取续滤液1ml置50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得；b)对照品溶液的制备：取绿原酸、芍药苷对照品，精密称定，置棕色容量瓶中，加50％甲醇制成每1ml含绿原酸15μg、含芍药苷30μg的混合溶液，即得；c)色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1％磷酸水溶液为流动相(A)，以乙腈为流动相(A)，采用梯度洗脱，所述梯度洗脱为0min～26min时(A)和(B)的体积比为87:13，26min～27min时(A)和(B)的体积比为87→20:13→80，27min～32min时(A)和(B)的体积比为20:80；32min～32.1min时(A)和(B)的体积比为80→87:80→13，32.1min～36min时(A)和(B)的体积比为87:13；检测波长为210nm～250nm，柱温为20℃～35℃；塔板数按绿原酸峰计算应不低于3000；d)测定法：分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；受试样品每1ml含芍药苷(C23H28O11)不得少于1.2mg；含绿原酸(C16H18O9)不得少于0.5mg。...

【技术特征摘要】
1.一种化瘀散结灌肠液新的质量检测方法，其特征在于，所述方法包括：(1)用HPLC检测马兜铃酸；所述HPLC的条件如下：a)供试品溶液的制备：取受试样品一瓶，超声处理30min，精密移取20ml置具塞三角瓶中，精密加入甲醇80ml，密塞，超声处理30min，过滤，精密量取续滤液5ml，加适量甲醇溶解并转移至10ml容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，摇匀，即得；b)对照品溶液的制备：取马兜铃酸I对照品，精密称定，置棕色容量瓶中，加甲醇制成每1ml含马兜铃酸I2μg的溶液，即得；c)以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为0.1％磷酸(A)和乙腈(A)，采用梯度洗脱，所述梯度洗脱为0min～40min时(A)和(B)的体积比为59:41，40min～50min时(A)和(B)的体积比为20:80，50min～60min时(A)和(B)的体积比为59:41；检测波长为240-280nm，柱温为25-35℃；塔板数按马兜铃酸I峰计算应不低于3000；(2)用HPLC同时测定芍药苷和绿原酸的含量；所述HPLC的条件如下：a)供试品溶液的制备：取受试样品一瓶，超声处理30分钟，摇匀，滤过，取续滤液，精密移取续滤液1ml置50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得；b)对照品溶液的制备：取绿原酸、芍药苷对照品，精密称定，置棕色容量瓶中，加50％甲醇制成每1ml含绿原酸15μg、含芍药苷30μg的混合溶液，即得；c)色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1％磷酸水溶液为流动相(A)，以乙腈为流动相(A)，采用梯度洗脱，所述梯度洗脱为0min～26min时(A)和(B)的体积比为87:13，26min～27min时(A)和(B)的体积比为87→20:13→80，27min～32min时(A)和(B)的体积比为20:80；32min～32.1min时(A)和(B)的体积比为80→87:80→13，32.1min～36min时(A)和(B)的体积比为87:13；检测波长为210nm～250nm，柱温为20℃...

【专利技术属性】
技术研发人员：张云清，陈海生，吴彤，
申请(专利权)人：青海瑞成药业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：青海,63