【技术实现步骤摘要】
鉴定O4:K8血清型副溶血弧菌的方法
本专利技术涉及生物
中，鉴定O4:K8血清型副溶血弧菌的方法。
技术介绍
副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus)是一种重要的食源性致病菌，首次鉴定于1950年日本的胃肠炎暴发，其广泛存在于海水，海底沉积物以及海产品中，人们通常由于食用生的或者未煮熟的被副溶血弧菌污染的海产品而引起感染，常见症状有胃肠炎，伤口感染和败血症，在中国副溶血弧菌是引起食源性疾病的首要原因之一，在美国海产品引起肠胃炎中，副溶血弧菌是首要的导致原因。由于副溶血弧菌经常会发生基因的水平转移，因此其生物型和基因型高度多样。副溶血弧菌的血清分型主要依据其菌体抗原(O)和荚膜抗原(K)特性进行划分，至今已发现至少13个O血清型和71个K血清型。1996年2月，O3:K6血清群被认为是引起印度腹泻病例大幅增长的主要原因，1995年后的O3:K6菌株在基因特性上无法区分，且在各种分型方法中形成一个克隆，但是，他们与1995年前O3:K6分离株相比具有独特的基因特性，从发现O3:K6血清型后，后续发现的O4:K68，O1:K25和O1:KUT与...
【技术保护点】
1.鉴定O4:K8血清型副溶血弧菌的方法，包括：利用质谱方法测定待测样本的蛋白质，得到质荷比峰图，根据所述质荷比峰图确定待测样本是否为或是否含有O4:K8血清型副溶血弧菌：所述质荷比峰图中含有a1)和a2)的待测样本为或候选为O4:K8血清型副溶血弧菌或含有或候选含有O4:K8血清型副溶血弧菌；所述质荷比峰图中至多含有a1)和a2)中一个质荷比峰的待测样本不为或候选不为O4:K8血清型副溶血弧菌或不含或候选不含O4:K8血清型副溶血弧菌；a1)(4382‑4384)m/z的质荷比峰；a2)(4396‑4398)m/z的质荷比峰。
【技术特征摘要】
1.鉴定O4:K8血清型副溶血弧菌的方法，包括：利用质谱方法测定待测样本的蛋白质，得到质荷比峰图，根据所述质荷比峰图确定待测样本是否为或是否含有O4:K8血清型副溶血弧菌：所述质荷比峰图中含有a1)和a2)的待测样本为或候选为O4:K8血清型副溶血弧菌或含有或候选含有O4:K8血清型副溶血弧菌；所述质荷比峰图中至多含有a1)和a2)中一个质荷比峰的待测样本不为或候选不为O4:K8血清型副溶血弧菌或不含或候选不含O4:K8血清型副溶血弧菌；a1)(4382-4384)m/z的质荷比峰；a2)(4396-4398)m/z的质荷比峰。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述待测样本为副溶血弧菌；和/或，a1)所述质荷比峰为4383m/z的质荷比峰；和/或，a2)所述质荷比峰为4397m/z的质荷比峰。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述质谱方法为基质辅助激光解析飞行时间质谱方法。4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述待测样本的蛋白质按照包括如下步骤的方法制备：1)将待测样本利用乙醇处理，得到乙醇处理物；将所述乙醇处理物进行离心，收集沉淀；2)向所述沉淀中加入甲酸水溶液，得到甲酸处理物；向所述甲酸处理物中加入乙腈，得到乙腈处理物；将所述乙腈处理物进行离心，得到的上清液即含有所述待测样本的蛋白质。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述甲酸水溶液由水与甲酸组成，所述甲酸水溶液中甲酸与水的体积比为7:3。6.O4:K8血清型副溶血弧菌的特征质荷比峰的建立方法，包括：利用质谱方法测定O4:K8血清型副溶血弧菌与非O4:K8血清型副溶血弧菌的蛋白质，分别得到O4:K8血清型副溶血弧菌质荷比峰图与非O4:K8血清型副溶血弧菌质荷比峰图，比较所述O4:K8血清型副溶血弧菌质荷比峰图与所述非O4:K8血清型副溶血弧菌质荷比峰图，所述O4:K8血清型副溶血弧菌质荷比峰图含有而所述非O4:K8血清型副溶血弧菌得质荷比峰图不含的质荷比峰即为O4:K8血清型副溶血弧菌的特征质荷比峰。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：O4:K8血清型副溶血弧菌与非O4:K8血清型副溶血弧菌的蛋白质均按照包括如下步骤的方法制备：1)将副溶血弧菌利用乙醇处理，得到乙醇处理物，所述副溶血弧菌为O4:K8血清型副溶血弧菌或非O4:K8血清型副溶血弧菌；将所述乙醇处理物进行离心，收集沉淀；2)向所述沉淀中加入甲酸水溶液，得到甲酸处理物；向所述甲酸处理物中加入乙腈，得到乙腈处理物；将所述乙腈处理物进行离心，得到的上清液即含有所述待测样本的蛋白质。8.鉴定或辅助鉴定O4:K8血清型副溶血弧菌的模型的建...
【专利技术属性】
技术研发人员：辛文文，康琳，李萍，袁媛，高姗，王景林，夏苏苏，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：北京,11
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