一种防治对虾病毒病的金银花提取物组合物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种防治对虾病毒病的金银花提取物组合物及其应用，该防治对虾病毒病的金银花提取物组合物包括从金银花中提取的绿原酸和木犀草素。本发明专利技术的防治对虾病毒病的金银花提取物以金银花提取物中的强效抗菌成分绿原酸和显著的抗病毒活性成分木犀草素为组分，达到抑制病毒和增强虾体免疫功能的双重效果，显著降低对虾染病几率，发病率控制在20%以下，成活率高，且毒副作用小，可制备成各种剂型长期添加使用，可广泛应用于对虾病毒病防治。

【技术实现步骤摘要】
一种防治对虾病毒病的金银花提取物组合物及其应用
本专利技术涉及水产养殖
，更具体地，涉及一种防治对虾病毒病的金银花提取物组合物及其应用。
技术介绍
对虾养殖是我国沿海地区的重要产业，也是海水养殖业的支柱，但随着该产业的企业化发展，越来越多的养殖厂开始了大密度的放养，这无疑会导致养殖生态环境的恶化，使得对虾疾病尤其是对虾杆状病毒病害严重影响这一产业的发展。国内为防治对虾病害的发生和流行提供了新途径、新技术和新模式，但仍然存在很多问题。近年来，中药越来越成为人们关注的热点，其功能有营养、增强免疫力，抗应激，适应原样、激素样，双相调节和抗生素样等多方面的作用，其突出的优点是毒副作用小，不易造成有害残留，从而可以长期添加使用，因此，中药是水产养殖方面很有开发前途的药物。但目前对于对虾病毒性病害的防治并未有针对性的中草药制剂，且许多防治药剂是多种中草药的组合应用，副作用等不好控制且不能达到很好的病毒防治效果。因此提供一种能够有效的防治对虾病毒且纯净的中药提取物组合物对虾病害防治具有非常重要的意义。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是克服现有中草药添加剂对对虾病毒缺乏针对性和高效性的不足，提供一种防治对虾病毒病的金银花提取物组合物，通过高纯净的金银花提取物中的绿原酸和木犀草素制备的组合物，达到抑制病毒和增强虾体免疫功能的双重效果。本专利技术的另一目的在于提供一种防治对虾病毒病的饲料添加剂。本专利技术的另一目的在于提供一种防治对虾病毒病的药物浸浴剂。本专利技术的另一目的在于提供一种防治对虾病毒病的虾池泼洒剂。本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：一种防治对虾病毒病的金银花提取物组合物，所述组合物包括从金银花中提取的绿原酸和木犀草素。本专利技术的金银花提取物为金银花的水或是与水互溶的有机溶剂的提取物，水互溶的有机溶剂可以为甲醇、乙醇中的一种或是多种，提取方法可以为煎煮提取、回流提取、渗漉提取或是超声提取中的一种或是多种。金银花中绿原酸的提取方法为：金银花药材粉碎至20~40目粉末备用，超声波提取得金银花粗提液，蒸出乙醇后，经大孔树脂和聚酰胺柱层析进行分离纯化，进行梯度洗脱，乙酸乙酯重结晶得产品。金银花中木犀草素的提取：将金银花药材粉碎至20~40目粉末备用，称取适量的金银花粗粉置于提取容器中，向提取容器中加入一定量的60%（体积分数）乙醇水溶液，微波照射一定时间后，置于80℃恒温水浴锅中提取一定时间后，抽滤，重复提取2次数后，合并滤液，将滤液转至旋转蒸发仪中，于(65±5)℃条件下真空浓缩回收乙醇携带剂至半浸膏，取出半浸膏，于(65±5)℃条件下真空干燥，干浸膏经粉碎后得木犀草素样品粉。金银花是常用的传统中药，具有清热解毒、疏散风热的功效，含有挥发油、有机酸、黄酮、环烯醚萜、皂苷等多种类型化学成分，并表现出抗炎、抗菌、抗病毒、抗氧化等多种药理学活性，金银花中绿原酸的抗菌活性极强，木犀草素的抗病毒活性最强。优选地，所述组合物中绿原酸10~30份，所述木犀草素10~30份。优选地，所述绿原酸30份，所述木犀草素30份。优选地，所述绿原酸的纯度为89~92%。纯度越高其抗菌活性越强。优选地，所述木犀草素的纯度为90~93%。纯度越高其抗病毒活性越强。优选地，所述对虾包括东方白虾、长毛对虾、中国对虾、印度对虾、桃红对虾、蓝对虾、褐对虾、周氏新对虾、长臂虾。优选地，所述病毒病为对虾杆状病毒。国内外已见报道的对虾病毒近20种，但真正引起对虾大量暴死的病毒主要有四种：对虾杆状病毒(BaculovirusPenaei，BP)，斑节对虾杆状病毒(MonodonBaculovirus，MBV)，黄头杆状病毒(Yellow-headBaculovirus，YBV)，传染性皮下组织和造血器官坏死病毒(IHHNV)。而对虾杆状病毒可引起幼虾和溞状幼体(zoaea)及糠虾(nysis)急性死亡，24～48h内死亡率为100%，是致死率最高的对虾感染病毒，金银花中的绿原酸和木犀草素对该病毒的抑制作用明显大于其他三种病毒，防治效果较强。一种防治对虾病毒病的饲料添加剂，每吨饲料添加剂中含有上述金银花提取物组合物质量分数为5~25%。一种防治对虾病毒病的药物浸浴剂，每升药物浸浴剂中含有上述金银花提取物组合物质量分数为3~24%。一种防治对虾病毒病的虾池泼洒剂，所述虾池泼洒剂中的金银花提取物组合物的质量分数为4~20%。本专利技术的金银花提取物组合物是以有效剂量的金银花原生药材提取其中的活性成分，得到提取物组合物具有抗菌抗病毒作用，其优点为毒副作用小，不易造成有害残留，从而可以长期添加使用，为了方便使用可以制备成各种剂型添加剂，在使用时可以综合多种剂型联合使用。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术提供了一种防治对虾病毒病的金银花提取物组合物，以金银花提取物中的强效抗菌成分绿原酸和显著的抗病毒活性成分木犀草素为组分，达到抑制病毒和增强虾体免疫功能的双重效果，显著降低对虾染病几率，发病率控制在20%以下，成活率高，且毒副作用小，可制备成各种剂型长期添加使用，可广泛应用于对虾病毒病防治。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术作进一步的说明，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限定。除非另有说明，本专利技术实施例采用的原料试剂为常规购买的原料试剂。其中，本专利技术实施例所用病毒抗原的制备方法如下：制备中国对虾原代细胞取健康无中国对虾杆状病毒的对虾，清洗体表，在0.01%的高锰酸钾溶液中浸泡5min，无菌水冲洗，酒精棉球消毒头胸甲与腹部交界处。用无菌注射器吸取2~3mL抗凝剂（0.14mol/LNaCl，0.1mol/L葡萄糖，30mmol/L柠檬酸，26mmol/L柠檬酸钠，10mmol/LEDTA，pH4.6），心窦采血，抗凝剂与血淋巴液混匀离心，1500r/min离心10min，弃上清，沉淀用L-15培养基润洗两次，用全陪液（15%犊牛血清、100U/ml青霉素及100ug/ml链霉素的L-15培养液），轻轻均匀重悬淋巴细胞，接种至培养瓶或培养板，25℃培养过夜，待用。实施例1一种防治对虾病毒病的药物浸浴剂，由金银花提取物组合物制备得到，其中组合物中绿原酸5份，木犀草素30份，绿原酸的纯度为90%，木犀草素的纯度为91%，每升药物浸浴剂中含有金银花提取物组合物质量分数为24%。将来自中国对虾的杆菌病毒依照病毒抗原制备方法制备单一灭活病毒抗原，浸泡5hm2对虾养殖池，100天后，浸泡金银花提取物组合物的虾池发病率在10~20%，而对照虾池（未浸泡金银花提取物组合）的发病率在90~100%之间。实施例2一种防治对虾病毒病的药物浸浴剂，由金银花提取物组合物制备得到，其中组合物中绿原酸40份，木犀草素30份，绿原酸的纯度为90%，木犀草素的纯度为91%，每升药物浸浴剂中含有金银花提取物组合物质量分数为24%。将来自中国对虾的杆菌病毒依照病毒抗原制备方法制备单一灭活病毒抗原，浸泡5hm2对虾养殖池，100天后，浸泡金银花提取物组合物的虾池发病率在10~15%，而对照虾池（未浸泡金银花提取物组合）的发病率在90~100%之间。实施例3一种防治对虾病毒病的药物浸浴剂，由金银花提取物组合物制备得到，其中组合物中绿原酸30份，木犀草素30份，绿原酸的纯度为90%，木犀草素的纯度为91%本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种防治对虾病毒病的金银花提取物组合物，其特征在于，所述组合物包括从金银花中提取的绿原酸和木犀草素。

【技术特征摘要】
1.一种防治对虾病毒病的金银花提取物组合物，其特征在于，所述组合物包括从金银花中提取的绿原酸和木犀草素。2.如权利要求1所述防治对虾病毒病的金银花提取物组合物，其特征在于，所述组合物中绿原酸10~30份，所述木犀草素10~30份。3.如权利要求1所述防治对虾病毒病的金银花提取物组合物，其特征在于，所述绿原酸30份，所述木犀草素30份。4.如权利要求1所述防治对虾病毒病的金银花提取物组合物，其特征在于，所述绿原酸的纯度为89~92%。5.如权利要求1所述防治对虾病毒病的金银花提取物组合物，其特征在于，所述木犀草素的纯度为90~93%。6.如权利要求1~5任一项所述防治对虾病毒病的金银花提取物组...

【专利技术属性】
技术研发人员：王雁，
申请(专利权)人：岭南师范学院，
类型：发明
国别省市：广东,44