一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，包括以下步骤：(1)将黑曲霉活化后，摇瓶培养2‑3天，菌丝均匀成球，得到摇瓶种子液C备用；(2)、将白地霉活化后，摇瓶培养2‑3天，得到摇瓶种子液D；(3)、分别将短小芽孢杆菌、青霉菌和假单胞杆菌活化后，摇瓶培养15‑20h，然后按3:1:2混合得到摇瓶种子液E；(4)、配置基础培养基，其中糖蜜发酵酒精废液700‑750g/L、尿素5.0g/L、葡糖糖13‑15g/L，余量为水，用碱液调节PH至7；(5)、将摇瓶种子液C、D、E按1:1:2混合，按接种量5‑7％接入基础培养基发酵，得到黄腐酸的含量为25‑28％的发酵液。本发明专利技术的优点在于，不使用化学试剂，不破坏黄腐酸的活性。

【技术实现步骤摘要】
一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法
本专利技术属于农用黄腐酸制备
，具体涉及一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法。
技术介绍
黄腐酸是腐殖酸中分子尺寸最小、活性最大的组分，是腐殖酸有效成分中的精华，其极易被生物吸收。将黄腐酸添加到肥料中，其具有诸如降低水的硬度、增强植物的抗病能力、促进植物对肥料有效养分的吸收等诸多作用，因此其广泛用于生物药肥、制剂的制备。目前国内外生产的黄腐酸大多为矿质黄腐酸，即从风化煤、褐煤、泥炭中提取，一般提取方法为碱溶酸析法、强酸抽提法、硫酸乙醇法、离子交换树脂法。虽然矿质黄腐酸提取原料价格低廉，但资源不可再生，且提取工艺相对复杂，需用使用大量化学试剂，造成环境污染，还易破坏黄腐酸的活性基团，降低生物活性。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于：矿质黄腐酸提取工艺复杂，使用大量化学试剂，易污染环境，影响黄腐酸的生物活性。本专利技术采用以下技术方案解决上述技术问题：一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，包括以下步骤：(1)将黑曲霉在斜面培养基PDA上活化，然后在20-25℃下摇瓶培养2-3天，菌丝均匀成球，得到摇瓶种子液C备用；(2)、将白地霉在斜面培养基PDA上活化，然后在25-27℃下摇瓶培养2-3天，得到摇瓶种子液D；(3)、分别将短小芽孢杆菌、青霉菌和假单胞杆菌在斜面培养基NBY上活化后，在32-35℃下摇瓶培养15-20h，然后按3:1:2混合得到摇瓶种子液E；(4)、配置基础培养基，其中糖蜜发酵酒精废液700-750g/L、尿素5.0g/L、葡糖糖13-15g/L，余量为水，用碱液调节PH至7；(5)、将摇瓶种子液C、D、E按1:1:2混合，按接种量5-7％接入基础培养基发酵，得到黄腐酸的含量为25-28％的发酵液。优选地，本专利技术所述的一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，所述步骤(4)中的糖蜜发酵酒精废液的固形物含量为45％-70％。优选地，本专利技术所述的一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，所述糖蜜发酵酒精废液的存放时间为3-5个月。糖蜜发酵酒精废液存放期进行自然发酵，从而影响最终黄腐酸的含量。优选地，本专利技术所述的一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，所述糖蜜发酵酒精废液的存放时间为4个月。优选地，本专利技术所述的一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，所述步骤(1)和步骤(2)中所述的摇瓶培养的培养基中含有葡萄糖8-10g/L、麸皮浸提液25-27g/L。优选地，本专利技术所述的一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，所述步骤(3)中摇瓶培养的培养基中含葡糖糖32-35g/L、牛肉蛋白胨13-15g/L、酵母膏1.0-1.5g/L、氯化钠5-6g/L、磷酸二氢钾0.5-0.8g/L、PH7.0。优选地，本专利技术所述的一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，所述步骤(5)中发酵条件为：搅拌速度270-300r/min，发酵温度32-35℃，发酵周期55-65h。本专利技术技术有益效果：本专利技术技术方案以富含有机质的糖蜜发酵酒精废液为原料，接种微生物进行发酵，无需进行任何提纯处理即可直接用于生物药肥的配置，不使用化学试剂，环境友好，且获得的黄腐酸活性更高；以糖蜜发酵酒精废液为原料，变废为宝，进一步有利于环境保护。具体实施方式为便于本领域技术人员理解本专利技术技术方案，现结合具体实施例对本专利技术技术方案做进一步的说明。实施例一(1)将黑曲霉在斜面培养基PDA上活化，然后在25℃下摇瓶培养50h，菌丝均匀成球，得到摇瓶种子液C备用；其中，摇瓶培养基中含葡萄糖10g/L、麸皮浸提液25g/L；(2)将白地霉在斜面培养基PDA上活化，然后在27℃下摇瓶培养40h，得到摇瓶种子液D；其中，摇瓶培养基含葡萄糖10g/L、麸皮浸提液25g/L；(3)分别将短小芽孢杆菌、青霉菌和假单胞杆菌在斜面培养基NBY上活化后，在32℃下摇瓶培养20h，然后按3:1:2混合得到摇瓶种子液E；其中摇瓶培养基中含葡糖糖35g/L、牛肉蛋白胨15g/L、酵母膏1.5g/L、氯化钠5g/L、磷酸二氢钾0.7g/L、PH7.0；(4)配置基础培养基，其中糖蜜发酵酒精废液750g/L、尿素5.0g/L、葡糖糖15g/L，余量为水，用碱液调节PH至7；其中糖蜜发酵酒精废液的固形物含量为50％，存放时间为3个月；(5)将摇瓶种子液C、D、E按1:1:2混合，按接种量5％接入基础培养基，在搅拌速度270r/min，温度35℃条件下发酵60h，得到黄腐酸的含量为26.7％的发酵液。实施例二(1)将黑曲霉在斜面培养基PDA上活化，然后在20℃下摇瓶培养70h，菌丝均匀成球，得到摇瓶种子液C备用；其中，摇瓶培养基含葡萄糖8g/L、麸皮浸提液26g/L；(2)将白地霉在斜面培养基PDA上活化，然后在35℃下摇瓶培养55h，得到摇瓶种子液D；其中，摇瓶培养基含葡萄糖8g/L、麸皮浸提液26g/L；(3)分别将短小芽孢杆菌、青霉菌和假单胞杆菌在斜面培养基NBY上活化后，在35℃下摇瓶培养16h，然后按3:1:2混合得到摇瓶种子液E；其中摇瓶培养基含葡糖糖34g/L、牛肉蛋白胨14g/L、酵母膏1.3g/L、氯化钠5.5g/L、磷酸二氢钾0.7g/L、PH7.0；(4)配置基础培养基，其中糖蜜发酵酒精废液740g/L、尿素6.0g/L、葡糖糖13g/L，余量为水，用碱液调节PH至7；其中糖蜜发酵酒精废液的固形物含量为45％，存放时间为4个月；(5)将摇瓶种子液C、D、E按1:1:2混合，按接种量7％接入基础培养基，在搅拌速度300r/min、温度32℃下发酵65h，得到黄腐酸的含量为25.1％的发酵液。实施例三(1)将黑曲霉在斜面培养基PDA上活化，然后在25℃下摇瓶培养55h，菌丝均匀成球，得到摇瓶种子液C备用；其中，摇瓶培养基中含葡萄糖9g/L、麸皮浸提液26g/L；(2)将白地霉在斜面培养基PDA上活化，然后在33℃下摇瓶培养45h，得到摇瓶种子液D；其中，摇瓶培养基含葡萄糖9g/L、麸皮浸提液26g/L；(3)分别将短小芽孢杆菌、青霉菌和假单胞杆菌在斜面培养基NBY上活化后，在32℃下摇瓶培养18h，然后按3:1:2混合得到摇瓶种子液E；其中摇瓶培养基中含葡糖糖35g/L、牛肉蛋白胨15g/L、酵母膏1.5g/L、氯化钠5g/L、磷酸二氢钾0.7g/L、PH7.0；(4)配置基础培养基，其中糖蜜发酵酒精废液750g/L、尿素5.5g/L、葡糖糖15g/L，余量为水，用碱液调节PH至7；其中糖蜜发酵酒精废液的固形物含量为50％，存放时间为3个月；(5)将摇瓶种子液C、D、E按1:1:2混合，按接种量6％接入基础培养基，在搅拌速度290r/min，温度34℃条件下发酵58h，得到黄腐酸的含量为27.8％的发酵液。上述实施例中使用的黑曲霉、白地霉、短小芽孢杆菌、青霉菌和假单胞杆菌的菌种均为市售，作为现有技术，其与本专利技术的改进点并无直接关系，此处不对其进行详细描述。本专利技术技术方案在上面结合具体实施例对专利技术进行了示例性描述，显然本专利技术具体实现并不受上述方式的限制，只要采用了本专利技术的方法构思和技术方案进行的各种非实质性改进，或未经改进将专利技术的构思和技术方本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将黑曲霉在斜面培养基PDA上活化，然后在20‑25℃下摇瓶培养2‑3天，菌丝均匀成球，得到摇瓶种子液C备用；(2)、将白地霉在斜面培养基PDA上活化，然后在25‑27℃下摇瓶培养2‑3天，得到摇瓶种子液D；(3)、分别将短小芽孢杆菌、青霉菌和假单胞杆菌在斜面培养基NBY上活化后，在32‑35℃下摇瓶培养15‑20h，然后按3:1:2混合得到摇瓶种子液E；(4)、配置基础培养基，其中糖蜜发酵酒精废液700‑750g/L、尿素5.0g/L、葡糖糖13‑15g/L，余量为水，用碱液调节PH至7；(5)、将摇瓶种子液C、D、E按1:1:2混合，按接种量5‑7％接入基础培养基发酵，得到黄腐酸的含量为25‑28％的发酵液。

【技术特征摘要】
1.一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将黑曲霉在斜面培养基PDA上活化，然后在20-25℃下摇瓶培养2-3天，菌丝均匀成球，得到摇瓶种子液C备用；(2)、将白地霉在斜面培养基PDA上活化，然后在25-27℃下摇瓶培养2-3天，得到摇瓶种子液D；(3)、分别将短小芽孢杆菌、青霉菌和假单胞杆菌在斜面培养基NBY上活化后，在32-35℃下摇瓶培养15-20h，然后按3:1:2混合得到摇瓶种子液E；(4)、配置基础培养基，其中糖蜜发酵酒精废液700-750g/L、尿素5.0g/L、葡糖糖13-15g/L，余量为水，用碱液调节PH至7；(5)、将摇瓶种子液C、D、E按1:1:2混合，按接种量5-7％接入基础培养基发酵，得到黄腐酸的含量为25-28％的发酵液。2.根据权利要求1所述的一种直接用于农作物药肥添加剂的黄腐酸的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中的糖蜜发酵酒精废液的固形物含量为45％-70％。3.根据权利要求1或2所...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖忠，
申请(专利权)人：安徽瑞然生物药肥科技有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34