一种3E6单抗腹水包被ELISA板的试剂盒的建立方法技术

本发明专利技术公开了一种3E6单抗腹水包被ELISA板的试剂盒的建立方法，包括以下步骤：应用方阵法确定3E6单抗腹水包被ELISA板浓度，37℃ 2小时，弃液体PBST洗3次；5%的脱脂奶粉300ul 37℃ 1小时，PBST洗3次；加小反刍兽疫Nigera75/1细胞毒（1:8），37℃ 1小时，PBST洗3次；加兔抗V蛋白血清1:100，同时设VERO细胞上清做对照，37℃ 45min，PBST洗3次；加兔二抗稀释浓度1:10000，100ul/孔，25℃ 45min，PBST洗3次；加TMB显色液100ul/孔，25℃ 3‑5min；2M硫酸终止液100ul/孔，450nm测ELISA OD值。

【技术实现步骤摘要】
一种3E6单抗腹水包被ELISA板的试剂盒的建立方法
本专利技术属于生物
，涉及一种3E6单抗腹水包被ELISA板的试剂盒的建立方法。
技术介绍
目前国内应用“小反刍兽疫通用型实时银光RT-PCR检测试剂盒”进行小反刍兽疫病毒检测。该方法对样品RNA的提取要求严格，避免污染；试剂盒某一组分污染，整个试剂盒不能用；该试剂盒不能反复冻融，必须在三次用完。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术中存在的缺陷，提供一种3E6单抗腹水包被ELISA板的试剂盒的建立方法。其具体技术方案为：一种3E6单抗腹水包被ELISA板的试剂盒的建立方法，包括以下步骤：⑴应用方阵法确定3E6单抗腹水包被ELISA板浓度为0.5ul:2ml，37℃包被2小时，弃去液体PBST洗涤3次，3min/次。⑵5％的脱脂奶粉300ul37℃封闭1小时，弃去封闭液PBST洗涤3次，3min/次。⑶加小反刍兽疫Nigera75/1细胞毒，筛选检测的最终浓度是1:8(细胞毒浓缩后的稀释度)，37度1小时，弃去液体PBST洗涤3次，3min/次。⑷加兔抗V蛋白血清1:100，同时设VERO细胞上清做对照，37℃作用45本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种3E6单抗腹水包被ELISA板的试剂盒的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：⑴应用方阵法确定3E6单抗腹水包被ELISA板浓度为0.5ul:2ml，37℃包被2小时，弃去液体PBST洗涤3次，3min/次；⑵5％的脱脂奶粉300ul 37℃封闭1小时，弃去封闭液PBST洗涤3次，3min/次；⑶加小反刍兽疫Nigera75/1细胞毒，筛选检测的最终浓度是1:8，37度1小时，弃去液体PBST洗涤3次，3min/次；⑷加兔抗V蛋白血清1:100，同时设VERO细胞上清做对照，37℃作用45min，弃去血清PBST洗涤3次，3min/次；⑸加抗兔二抗稀释浓度1:10000，100ul/孔，...

【技术特征摘要】
1.一种3E6单抗腹水包被ELISA板的试剂盒的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：⑴应用方阵法确定3E6单抗腹水包被ELISA板浓度为0.5ul:2ml，37℃包被2小时，弃去液体PBST洗涤3次，3min/次；⑵5％的脱脂奶粉300ul37℃封闭1小时，弃去封闭液PBST洗涤3次，3min/次；⑶加小反刍兽疫Nigera75/1细胞毒，筛选检测的最终浓度是1:8，37度1小时，弃去液...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆桂丽，黄炯，沙依兰·卡伊扎，苗书魁，马文戈，王杰，汪萍，夏俊，
申请(专利权)人：新疆畜牧科学院兽医研究所新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心，
类型：发明
国别省市：新疆,65