一种当归建中汤冻干粉全味药材的快速薄层鉴别方法技术

本发明专利技术涉及一种当归建中汤冻干粉全味药材的快速薄层鉴别方法。其特征在于：用简便、快捷的前处理方法得到供试品与对照药材溶液，采用同一供试品溶液，在4块薄层板上，4种不同的检视条件下，鉴别了6味药材，检视了10余种中药成分斑点；各斑点清晰，它们相互交叉，但不同层次的成分，又互不干扰。该水提取制剂中薄层鉴别增订率为100％。全部鉴别只需样品0.5g、提取溶剂与展开剂67ml、时间3小时。方法简便、快捷、高效的全药味薄层鉴别，目前还未见相同报道。为当归建中汤冻干粉的质量控制，提供了简便、快捷的薄层鉴别方法。

【技术实现步骤摘要】
一种当归建中汤冻干粉全味药材的快速薄层鉴别方法
本专利技术涉及一种当归建中汤冻干粉全味药材的快速薄层鉴别方法。
技术介绍
在中药复方制剂中，特别是传统水煎煮的复方制剂，依据相似相容的提取原则，制剂中脂溶性的成分大部分是很难提取到的，水溶性成分提取的较多，相互干扰严重，水提取之后，原药材项下以脂溶性成分的薄层鉴别，有的已无法采用，必须寻找水溶性成分的鉴别特征点，限于技术的难度，所以其水提取制剂的薄层鉴别增订率低，定量测定指标少。以2015年版中国药典一部为例，收载的水煎煮的乙肝宁颗粒，由十三味中药组成，仅增订了4味药材的薄层鉴别。不但鉴别增订率低，且鉴别方法也非常繁琐、复杂，4项鉴别的完成需要样品85g或15g(含乳糖)、仅前处理溶剂386ml、时间10～12小时。4项鉴别要制备4种供试品溶液，在4块薄层板上，4次展开完成；收载的二丁颗粒，由4味药材组成，仅增订了一项薄层鉴别。其前处理需要样品15g或3g(含乳糖)、处理溶剂82ml、时间2小时；收载的儿宝颗粒，由十一味药材组成，增订了4味药材的薄层鉴别。且鉴别方法也非常繁琐、复杂，4项鉴别要制备3种供试品溶液，在4块薄层板上，4次展开完成。共需要样品80g、仅前处理溶剂295ml、时间8小时。如果加上展开剂和展开时间，花费的总有机溶剂和时间就更多了。等等，类似例子举不胜举。综上，薄层鉴别基本都是一个品种，如有N项鉴别，就要制备N种供试品溶液，N块薄层板，展开N次，鉴别N味药材的传统鉴别模式。为排除干扰，样品的前处理程序多复杂、烦琐，需用大量的有机试剂反复纯化处理，费力、费时、费试剂、污染环境，危害健康，检测周期长。这样，一个含6～7项薄层鉴别和二项含量测定的质量标准检测完成，一般要花费一周的时间，如遇复试，时间翻倍，检测速度严重制约着中药现代化生产速度。所以寻找水提取制剂的简便、快捷检测方法、提高检测效率、降低检测成本，是中药质量控制必须突破的难关。当归建中汤是国家中医药管理局公布的经典名方，由当归、桂枝、甘草、白芍、生姜和大枣六味药材，其处方配比和提取工艺如下：处方：当归四两，桂心三两，甘草二两(炙)，芍药六两，生姜三两，大枣十二枚(擘)。制法：右六味，咀，以水一斗，煮取三升，取煮取液，浓缩，冷冻干燥，得冻干粉(名词解释：右是指按古代从右向左，从上向下的书写格式，将右侧处方中的药材，捣碎的意思，咀是指捣碎的意思)。为确保制剂的质量，对当归建中汤进行了薄层鉴别研究。
技术实现思路
本专利技术就是针对目前一个品种，如有N项鉴别，就要制备N种供试品溶液，N块薄层板，展开N次，鉴别N味药材的传统鉴别模式。通过展开剂的不同组合与其比例、显色剂、薄层载体以及检测条件等参数研究，创建了采用同一供试品溶液，在4块薄层板上，4种不同的检视条件下，鉴别了6味药材，检视了10余种中药成分斑点的一测多评薄层鉴别新模式。各斑点清晰，它们相互交叉，但不同层次的成分，又互不干扰。本制剂中薄层鉴别增订率为100％。本专利技术解决其技术问题所采用的方案为：A.取当归建中汤冻干粉0.5g，加甲醇2ml，超声处理10分钟，离心，上清液作为供试品溶液；另取干姜对照药材0.1g，加水30ml，小火煎煮20分钟，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；再取6-姜辣素对照品适量，加甲醇配制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；吸取对照药材溶液5～6μl、对照品溶液2～3μl、供试品溶液8～10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比5∶3.5∶0.5的氯仿-乙酸乙酯-浓氨试液为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以体积比1∶8的5％的香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液，105℃加热至干姜斑点清晰，置暗室内透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色主斑点(图1)；B.取白芍对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理20分钟，上清液作为对照药材溶液；另取芍药苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg溶液，作为对照品溶液；吸取对照品溶液5μl、对照药材溶液5～8μl、A项下的供试品溶液8～10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比12.5∶2.2∶1∶0.3的醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以体积比1∶8的5％的香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液，105℃加热至斑点显色清晰，日光下或暗室内透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，分别显相同的颜色主斑点(图2、3)；C.取当归对照药材0.1g，加甲醇4ml超声处理20分钟，取上清液作为对照药材溶液；另取桂枝0.3g,加水30ml，小火煎煮20分钟，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇0.5ml，使溶解，作为桂枝对照药材溶液；吸取当归对照药材溶液2～3μl、桂枝对照药材15μl、A项下的供试品溶液10～12μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比8∶4∶0.1的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与当归对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点(图4)；置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与桂枝对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点(图5)；D.取大枣对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理20分钟，离心，上清液作为对照药材溶液；再取甘草对照药材0.1g，加甲醇3ml超声处理20分钟，离心，上清液作为甘草对照药材溶液；吸取甘草对照药材溶液2～3μl、大枣对照药材4～5μl、A项下的供试品溶液5～6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比1∶2∶4∶0.5的三氯甲烷-己酸乙酯-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以10％硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与甘草对照药材色谱相应的位置上，显相同的绿色荧光主斑点(图6)；日光下检视，在与大枣对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点(图7)。本专利技术的原理如下：依据中药各有效成分的化学结构与性质，遵循相似相容的提取原则，采用适宜的提取溶剂，简便、快捷地制备供试品与对照药材溶液。再用不同组分、不同配比、不同极性的展开剂，进行展开，各种化学成分就会随着不同的展开剂，依据吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的能力不同，而在各自的薄层板上得以良好分离。再借助各种极性近似的有效成分，在同一块薄层板上，不同的检视条件下，虽然重叠，但通过不同的显色手段，使其在不同的层次上，互不干扰，呈现出各自不同的斑点颜色，获得多信息的薄层色谱图。实现简便、快捷、低成本、高效率的薄层愿望。本专利技术的创新点及有益效果如下：用简便、快捷的前处理方法得到供试品与对照药材溶液，采用同一供试品溶液，在4块薄层板上，4种不同的检视条件下，鉴别了6味药材，检视了10余种中药成分斑点；各斑点清晰，它们相互交叉，但不同层次的成分，又互不干扰。做到了水提取复方制剂中薄层鉴别增订率为100％。全部鉴别只需样品0.5g、提取溶剂与展开剂67ml、时间3小时。方法简便、快捷、高效，同一供试品溶液，完成全药味的薄层鉴别，目前还未见相同报道。2.以体积比5∶3.5∶0.5的氯仿-乙酸乙酯-浓氨试液为展开剂，展开干姜，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种当归建中汤冻干粉全味药材的快速薄层鉴别方法，其特征在于：A.取当归建中汤冻干粉0.5g，加甲醇2ml，超声处理10分钟，离心，上清液作为供试品溶液；另取干姜对照药材0.1g，加水30ml，小火煎煮20分钟，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；再取6‑姜辣素对照品适量，加甲醇配制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；吸取对照药材溶液5～6μl、对照品溶液2～3μl、供试品溶液8～10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比5∶3.5∶0.5的氯仿‑乙酸乙酯‑浓氨试液为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以体积比1∶8的5％的香草醛硫酸溶液‑乙醇的混合溶液，105℃加热至干姜斑点清晰，置暗室内透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色主斑点；B.取白芍对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理20分钟，上清液作为对照药材溶液；另取芍药苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg溶液，作为对照品溶液；吸取对照品溶液5μl、对照药材溶液5～8μl、A项下的供试品溶液8～10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比12.5∶2.2∶1∶0.3的醋酸乙酯‑丁酮‑甲酸‑水为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以体积比1∶8的5％的香草醛硫酸溶液‑乙醇的混合溶液，105℃加热至斑点显色清晰，日光下或暗室内透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色主斑点；C.取当归对照药材0.1g，加甲醇4ml超声处理20分钟，取上清液作为对照药材溶液；另取桂枝0.3g,加水30ml，小火煎煮20分钟，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇0.5ml，使溶解，作为桂枝对照药材溶液；吸取当归对照药材溶液2～3μl、桂枝对照药材15μl、A项下的供试品溶液10～12μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比8∶4∶0.1的环己烷‑乙酸乙酯‑甲酸为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与当归对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点；置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与桂枝对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点；D.取大枣对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理20分钟，离心，上清液作为对照药材溶液；再取甘草对照药材0.1g，加甲醇3ml超声处理20分钟，离心，上清液作为甘草对照药材溶液；吸取甘草对照药材溶液2～3μl、大枣对照药材4～5μl、A项下的供试品溶液5～6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比1∶2∶4∶0.5的三氯甲烷‑己酸乙酯‑甲醇‑浓氨试液为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以10％硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与甘草对照药材色谱相应的位置上，显相同的绿色荧光主斑点；日光下检视，在与大枣对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点。...

【技术特征摘要】
1.一种当归建中汤冻干粉全味药材的快速薄层鉴别方法，其特征在于：A.取当归建中汤冻干粉0.5g，加甲醇2ml，超声处理10分钟，离心，上清液作为供试品溶液；另取干姜对照药材0.1g，加水30ml，小火煎煮20分钟，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；再取6-姜辣素对照品适量，加甲醇配制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；吸取对照药材溶液5～6μl、对照品溶液2～3μl、供试品溶液8～10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比5∶3.5∶0.5的氯仿-乙酸乙酯-浓氨试液为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以体积比1∶8的5％的香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液，105℃加热至干姜斑点清晰，置暗室内透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色主斑点；B.取白芍对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理20分钟，上清液作为对照药材溶液；另取芍药苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg溶液，作为对照品溶液；吸取对照品溶液5μl、对照药材溶液5～8μl、A项下的供试品溶液8～10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比12.5∶2.2∶1∶0.3的醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以体积比1∶8的5％的香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液，105℃加热至斑点显色清晰，日光下或暗室内透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色主斑点；C.取当归对照药材0.1g...

【专利技术属性】
技术研发人员：牛丽颖，安丽娜，田宇柔，冯玉，韩桂茹，王鑫国，
申请(专利权)人：河北中医学院，
类型：发明
国别省市：河北,13