一种血小板分离富集方法、血小板作用药物的试药方法及试药芯片技术

一种血小板分离富集方法、血小板作用药物的试药方法及试药芯片，涉及血小板检测领域。血小板分离富集方法是使血液样本在管道中流动，施加介电电泳力；在血小板中加入诱导剂；使混合物在管道中流动，施加介电电泳力，检测聚集血小板和血小板的数量，该血小板分离富集方法能够快速、有效分离出血液样本中的血小板。血小板作用药物的试药方法是在混合物中加入血小板作用药物；使药物作用后的混合物在管道中流动，施加介电电泳力，检测聚集血小板和血小板的数量，该血小板作用药物的试药方法能快速检测出血小板与药物作用后的聚集行为变化。血小板作用药物的试药芯片的结构简单、成本低，能够快速进行血小板作用药物的试药。

A Platelet Separation and Enrichment Method, Drug Testing Method and Drug Chip for Platelet Action

The invention relates to a platelet separation and enrichment method, a platelet action drug test method and a drug test chip, which relates to the field of platelet detection. Platelet separation and enrichment method is to make blood sample flow in the pipeline, apply dielectrophoresis force; add inducer to platelet; make mixture flow in the pipeline, apply dielectrophoresis force to detect the number of aggregated platelets and platelets. The platelet separation and enrichment method can quickly and effectively separate blood sample. Platelets in. The test method of platelet-acting drugs is to add platelet-acting drugs into the mixture; make the mixture flow in the pipeline after drug action, apply dielectric electrophoresis force, and detect the number of aggregated platelets and platelets. The test method of platelet-acting drugs can quickly detect the aggregation of hemorrhagic platelets after drug action. Behavior change. The structure of the drug chip for platelet-acting drugs is simple and the cost is low. It can be used for rapid drug testing of platelet-acting drugs.

【技术实现步骤摘要】
一种血小板分离富集方法、血小板作用药物的试药方法及试药芯片
本专利技术涉及血小板检测领域，且特别涉及一种血小板分离富集方法、血小板作用药物的试药方法及试药芯片。
技术介绍
血小板作为外周血重要成分，参与机体内许多生理、病理过程。在凝血生理过程中，血管损伤处细胞外基质蛋白暴露在血液中，少量血小板将首先黏附在细胞外基质蛋白表面，随后血小板被激活，通过自分泌的二磷酸腺苷(ADP)和血栓素A2(TXA2)等凝血因子从血液中募集其他血小板，最终通过血小板的GPⅡb/Ⅲa受体和纤维蛋白原结合发生聚集反应。血小板黏附聚集功能抑制将导致出血风险，而功能亢进将增加动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、心肌梗死、卒中等血栓疾病风险。因此，测定血小板生理功能，特别是其聚集性，不仅有助于诊断某些先天性和获得性血小板缺陷所导致的出血性疾病，且在血栓疾病发病机制、临床诊断、抗血栓疗法、监测抗血小板药物浓度等研究中有重要意义。目前，血小板聚集功能已成为临床的基础检测项目之一，现有检测技术和系统包括光电比浊法、全血电阻法、PFA-100血小板功能仪、PL-11血小板分析仪、Verifynow系统及血栓弹力图仪等。其中PL-11血小板分析仪可直接使用全血动态分析血小板聚集过程并能对血液细胞的多种组分(包括血小板和红细胞)进行定量分析。为了有效、准确的获取个体患者的血小板作用药物的服药效果，需要检测个体患者血液中的血小板与药物作用后的聚集行为变化。而上述现有的检测技术和系统都非常复杂，成本高，只适合专业检测部门，显然不适合快速进行试药过程。另外，为了快速试药，需要先对将个体患者血液中的血小板快速分离出来，但是现有的血小板分离方法及设备同样存在复杂、成本高，易破坏血小板的缺陷。因此，需要一种能够快速分离出血液中的血小板，进而进行试药的方法和设备。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种血小板分离富集方法，此方法能够快速、有效分离出血液样本中的血小板。本专利技术的另一目的在于提供一种血小板作用药物的试药方法，能快速检测出血小板与药物作用后的聚集行为变化。本专利技术的另一目的在于提供一种血小板作用药物的试药芯片，其结构简单、成本低，能够快速进行血小板作用药物的试药。本专利技术解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。本专利技术提出一种血小板分离富集方法，其包括以下步骤：使血液样本在管道中流动，对管道内的血样样本施加介电电泳力，使血液样本中的血小板与其他粒子分开，检测血小板的数量；在血小板中加入诱导剂，使血小板充分聚集，得到聚集血小板及血小板的混合物；使聚集血小板及血小板的混合物在管道中流动，对管道内的混合物施加介电电泳力，使混合物中的聚集血小板与血小板分开，检测聚集血小板的数量和血小板的数量。进一步地，在本专利技术较佳实施例中，检测血小板/聚集血小板的数量的方法为：采用电化学阻抗法，检测血小板/聚集血小板的电化学阻抗及频率，根据血小板/聚集血小板的电化学阻抗及频率与血小板/聚集血小板数量之间的对应关系，得到血小板/聚集血小板的数量。进一步地，在本专利技术较佳实施例中，施加的介电电泳力的频率为500KHz-3MHz。进一步地，在本专利技术较佳实施例中，诱导剂包括胶原蛋白、二磷酸腺苷、肾上腺素、花生四烯酸、瑞斯托霉素中的一种。进一步地，在本专利技术较佳实施例中，通过气泵使血液样本或混合物在管道内流动。一种血小板作用药物的试药方法，其包括以下步骤：采用上述的血小板分离富集方法，得到聚集血小板的数量和血小板的数量；在聚集血小板和血小板的混合物中加入血小板作用药物，得到药物作用后的聚集血小板和血小板的混合物；使药物作用后的混合物在管道中流动，对管道内的混合物施加介电电泳力，使药物作用后的混合物中的聚集血小板与血小板分开，检测药物作用后的聚集血小板的数量和血小板的数量。进一步地，在本专利技术较佳实施例中，血小板作用药物分为四类，分别为抑制血小板花生四烯酸代谢药、增高血小板内环核苷酸含量的药、特异性抑制ADP活化血小板的药、血小板纤维蛋白原受体拮抗剂。一种基于上述的血小板作用药物的试药方法的血小板作用药物的试药芯片，其包括主体，主体内设有三条分支和一条管道，三条分支的一端分别与管道的同一端连通，管道连接有三条分支的一端向另一端依次为用于使血液样本中的血小板与其他粒子分开的第一分离富集区、用于检测血小板数量的第一数量检测区、用于使血小板充分聚集的聚集诱导区、用于使混合物中的聚集血小板与血小板分开的第二分离富集区、用于检测聚集血小板的数量和血小板的数量的第二数量检测区、试药区、用于使药物作用后的混合物中的聚集血小板与血小板分开的第三分离富集区和用于检测药物作用后的聚集血小板的数量和血小板的数量第三数量检测区。进一步地，在本专利技术较佳实施例中，主体上开设有分别与三条分支远离管道的一端连通的进样口、第一试剂孔、第二试剂孔，与聚集诱导区连通的诱导剂添加口，与试药区连通的药物添加口，与管道远离三条分支的一端连通的出样口。进一步地，在本专利技术较佳实施例中，管道沿长度方向依次包括由第一分离富集区、第一数量检测区和聚集诱导区组成第一段管道，第一连接管道，由第二分离富集区、第二数量检测区和试药区组成的第二段管道，第二连接管道，由第三分离富集区和第三数量检测区组成的第三段管道，第一连接管道和第二连接管道上分别设置有用于控制管道开闭的阀门。本专利技术实施例的血小板分离富集方法、血小板作用药物的试药方法及试药芯片的有益效果是：本专利技术实施例的血小板分离富集方法是使血液样本在管道中流动，对管道内的血样样本施加介电电泳力，使血液样本中的血小板与其他粒子分开，检测血小板的数量；在血小板中加入诱导剂停留一段时间，使血小板充分聚集，得到聚集血小板及血小板的混合物；使聚集血小板及血小板的混合物在管道中流动，对管道内的混合物施加介电电泳力，使混合物中的聚集血小板与血小板分开，检测聚集血小板的数量和血小板的数量，该血小板分离富集方法能够快速、有效分离出血液样本中的血小板。本专利技术实施例的血小板作用药物的试药方法是在血小板分离富集方法完成后，在聚集血小板和血小板的混合物中加入血小板作用药物，得到药物作用后的聚集血小板和血小板的混合物；使药物作用后的混合物在管道中流动，对管道内的混合物施加介电电泳力，使药物作用后的混合物中的聚集血小板与血小板分开，检测药物作用后的聚集血小板的数量和血小板的数量，该血小板作用药物的试药方法能快速检测出血小板与药物作用后的聚集行为变化。本专利技术实施例的血小板作用药物的试药芯片的结构简单、成本低，能够快速进行血小板作用药物的试药。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。图1为本专利技术实施例中的血液样本在介电电泳力作用下的分离示意图；图2为本专利技术实施例提供的一种血小板作用药物的试药芯片的结构示意图；图3为图2中分支和管道部分的结构示意图。图标：100-试药芯片；110-主体；120-分支；130-管道；141-进样口；142-第一试剂孔；143-第二试剂孔；144-诱导剂添加口；145-药物添加口；146-出样本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血小板分离富集方法，其特征在于，其包括以下步骤：使血液样本在管道中流动，对管道内的血样样本施加介电电泳力，使血液样本中的血小板与其他粒子分开，检测血小板的数量；在所述血小板中加入诱导剂，使血小板充分聚集，得到聚集血小板及血小板的混合物；使聚集血小板及血小板的混合物在管道中流动，对管道内的混合物施加介电电泳力，使混合物中的聚集血小板与血小板分开，检测聚集血小板的数量和血小板的数量。

【技术特征摘要】
1.一种血小板分离富集方法，其特征在于，其包括以下步骤：使血液样本在管道中流动，对管道内的血样样本施加介电电泳力，使血液样本中的血小板与其他粒子分开，检测血小板的数量；在所述血小板中加入诱导剂，使血小板充分聚集，得到聚集血小板及血小板的混合物；使聚集血小板及血小板的混合物在管道中流动，对管道内的混合物施加介电电泳力，使混合物中的聚集血小板与血小板分开，检测聚集血小板的数量和血小板的数量。2.根据权利要求1所述的血小板分离富集方法，其特征在于，检测血小板/聚集血小板的数量的方法为：采用电化学阻抗法，检测血小板/聚集血小板的电化学阻抗及频率，根据血小板/聚集血小板的电化学阻抗及频率与血小板/聚集血小板数量之间的对应关系，得到血小板/聚集血小板的数量。3.根据权利要求1所述的血小板分离富集方法，其特征在于，施加的介电电泳力的频率为500KHz-3MHz。4.根据权利要求1所述的血小板分离富集方法，其特征在于，所述诱导剂包括胶原蛋白、二磷酸腺苷、肾上腺素、花生四烯酸、瑞斯托霉素中的一种。5.根据权利要求1所述的血小板分离富集方法，其特征在于，通过气泵使血液样本或混合物在管道内流动。6.一种血小板作用药物的试药方法，其特征在于，其包括以下步骤：采用如权利要求1所述的血小板分离富集方法，得到聚集血小板的数量和血小板的数量；在聚集血小板和血小板的混合物中加入血小板作用药物，得到药物作用后的聚集血小板和血小板的混合物；使药物作用后的混合物在管道中流动，对管道内的混合物施加介电电泳力，使药物作用后的混合物中的聚集血小板与血小板分开，检测药物作用后的聚集血小板的数量和血小板的数量。7.根据权利要求6所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：解亚平，聂如琼，蔡从利，
申请(专利权)人：武汉友芝友医疗科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42