一种超临界萃取鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽的方法技术

本发明专利技术属于保健食品加工技术领域。本发明专利技术公开了一种超临界萃取鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽的方法，其包括鱿鱼预处理、超临界萃取、酶解、纯化和制粉等步骤。本发明专利技术中通过超临界二氧化碳流体萃取技术能够有效脱除鱿鱼蛋白中的脂类及腥臭异杂味物质，得到有活性的低脂鱿鱼蛋白，同时两步超声辅助酶解，从根本上保证了高F值低聚肽的质量，本发明专利技术的方法的各个步骤和参数之间协同作用，可保证高F值低聚肽产品的质量；通过本发明专利技术获得的高F值寡肽为小分子短肽，与游离氨基酸相比具有渗透压低、抗原性低等优点，更容易被吸收利用，可以作为运动员的营养补充剂，同时在肝脏保护、肝性脑病以及苯丙酮尿症治疗等方面具有显著功效。

【技术实现步骤摘要】
一种超临界萃取鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽的方法
本专利技术涉及保健食品加工
，尤其是涉及一种超临界萃取鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽的方法。
技术介绍
鱿鱼(Squid)属软体动物门头足纲，个体大，胴体长，肉质嫩而多汁，肉质风味近似鲍鱼，价格低廉，可食部分近80％。据报道，鱿鱼是我国主要的水产加工原料之一，年加工量约为30～40万吨。但目前鱿鱼精深加工技术匮乏，不仅原料利用效率低下，而且污染环境。高F值寡肽(F值>20)是由3～9个氨基酸残基所组成的小肽混合物，F值是指混合物中支链氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸，简称BCAA)与芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸，简称AAA)的物质的量比值。高F值寡肽为小分子短肽，与游离氨基酸相比具有渗透压低、抗原性低等优点，更容易被人体吸利用，可以作为运动员的营养补充剂，并有抗疲劳的功效，帮助术后病人复原。同时高F值寡肽产品在肝脏保护、肝性脑病以及苯丙酮尿症治疗等方面具有显著功效。中国专利申请ZL2005100170376公开了以玉米黄粉为原料，进行超临界CO2流体萃取，脱除玉米黄粉中脂类物质及异杂味物质后提取玉米醇溶蛋白。具有产率高、无废渣、废汽产生，对环境无污染等优点。中国专利申请CN104531663A鱿鱼碎肉制备高F值寡肽固定化酶水解方法，利用固定化胃蛋白酶制备步骤、固定化风味酶制备步骤、动态串联酶处理步骤、吸附脱芳处理等步骤制备得到鱿鱼碎肉制备高F值寡肽，具有口感丰富，原料充分、成本低廉、工艺简单、产品风味好、F值高的优点。但目前，获取活性的高F值低聚肽选用的原料主要是一些植物性蛋白和乳源性蛋白，利用水产品作为原料制备高F值寡肽产率低、水解率低，且不能有效脱脂、脱腥，影响口感。而从利用超临界萃取技术从鱿鱼中获得高F值低聚肽的方法具有诸多优点，不仅能够提高现有资源的利用效率，提升经济效益，也为增加水产加工的附加值提供了新的方向。同时制备得到的活性高F值低聚肽具有分子量较小、易于吸收，在肝脏保护、肝性脑病以及苯丙酮尿症治疗等方面具有显著功效。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种超临界萃取鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽的方法，通过该方法可以获得有效脱脂脱腥并具有高F值的鱿鱼活性蛋白低聚肽。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种超临界萃取鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽的方法，包括以下步骤：(1)鱿鱼预处理：将鱿鱼预处理制得鱿鱼鱼糜；(2)超临界萃取：采用超临界二氧化碳流体萃取并除去鱿鱼鱼糜中的脂类及腥味物质，并用乙醇进行提取制得鱿鱼醇溶蛋白液；(3)酶解：用蛋白酶对鱿鱼醇蛋白液进行酶解制得酶解混合物；(4)纯化：用活性炭吸附纯化酶解混合物以除去芳香族氨基酸，制得鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽液；(5)制粉：将鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽液浓缩干燥制得鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽。作为优选，步骤(1)鱿鱼预处理具体为，除去鱿鱼内脏得到鱿鱼板，再将鱿鱼板进行划割、破碎处理，打成块状，用去离子水冲洗3～4次后，打成鱿鱼鱼糜。鱿鱼板为已经去除掉肚内类似塑料片的脊椎骨、白色粘膜且厚度为2～8cm的鱿鱼板。作为优选，鱿鱼为阿根廷鱿鱼、秘鲁鱿鱼或南太平洋鱿鱼中的一种，并且为活的鱿鱼或冷冻不超过15天的鱿鱼。作为优选，步骤(2)超临界萃取中，萃取工作压力为10～45MPa，温度为35～60℃，时间为0.5～3.0h，超临界二氧化碳流体的流量为15～40L/h，制得鱿鱼醇溶蛋白液。作为优选，鱿鱼醇溶蛋白液无腥味并且脂类物质含量小于0.2％。作为优选，步骤(2)超临界萃取中，乙醇提取时，乙醇浓度为60～90％，鱿鱼鱼糜与乙醇的质量比为1∶8～15，提取温度为50～60℃，pH值为8.0～9.0。作为优选，步骤(3)酶解中采用两步酶解法，第一步超声酶解，选用胃蛋白酶，酶解反应条件为，底物浓度5～13wt％，酶浓度1.5～9.0wt％，酶解温度为45～60℃，pH值8.0～10.0，酶解时间1～3h，酶解后进行分离得第一酶解液；第二步酶解，将第一步超声酶解制得的第一酶解液进一步酶解，选用风味蛋白酶，酶解条件为，底物浓度5～13wt％，酶浓度1～9wt％，酶解温度为45～60℃，pH值6.5～7.5，酶解时间2～3h。作为优选，第二步酶解中，酶解温度为55℃，pH值为7.0。在第二步酶解过程中，可以仅采用超声酶解或自由酶解，也可以采用超声酶解和自由酶解相结合的方式进行酶解。利用蛋白酶对鱿鱼醇溶蛋白进行两步超声辅助酶解，得到得到鱿鱼含芳香族氨基酸、支链氨基酸及低聚肽的混合物。第一步酶解，选取酶类为胃蛋白酶，可将蛋白质多肽链切割成短肽且切割位置绝大多数在芳香族氨基酸与支链氨基酸的连接处的蛋白酶，使酶解后生成的短肽其末端是芳香族氨基酸；第二步酶解，选取风味蛋白酶，在脱芳的同时，还能切掉肽链端的部分疏水性氨基酸，达到脱苦的效果；作为优选，步骤(4)纯化中，纯化工艺条件为，温度为20～35℃，活性炭和酶解混合物的质量比为1∶5～15，pH值2.5～5.0。利用活性炭吸附纯化该混合物，除去芳香族氨基酸。作为优选，步骤(5)制粉中，浓缩干燥的具体工艺为，真空度82.7～90.6KPa下，将鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽液通过雾化器，聚化成10～200微米的雾状微粒，与热空气直接接触进行热交换干燥，干燥时间为10～15min。因此，本专利技术具有以下有益效果：(1)本专利技术中通过超临界二氧化碳流体萃取技术能够有效脱除鱿鱼蛋白中的脂类及腥臭异杂味物质，得到有活性的低脂鱿鱼蛋白，同时两步超声辅助酶解，从根本上保证了高F值低聚肽的质量，本专利技术的方法的各个步骤和参数之间协同作用，可进一步保证高F值低聚肽产品的质量；(2)通过本专利技术获得的高F值寡肽为小分子短肽，与游离氨基酸相比具有渗透压低、抗原性低等优点，更容易被人体吸收利用，可以作为运动员的营养补充剂，并有抗疲劳的功效，帮助术后病人复原，同时高F值寡肽产品在肝脏保护、肝性脑病以及苯丙酮尿症治疗等方面具有显著功效，具有广阔的市场和应用前景。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术的技术方案作进一步的说明。显然，所描述的实施例仅是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。在本专利技术中，若非特指，所有的设备和原料均可从市场上购得或是本行业常用的，下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域常规方法。实施例1一种超临界萃取鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽的方法，包括以下步骤：(1)鱿鱼预处理：除去鱿鱼内脏得到鱿鱼板，再将鱿鱼板进行划割、破碎处理，打成块状，用去离子水冲洗3次后，打成鱿鱼鱼糜；其中鱿鱼为活的南太平洋鱿鱼；(2)超临界萃取：采用超临界二氧化碳流体萃取并除去鱿鱼鱼糜中的脂类及腥味物质，并用乙醇进行提取制得鱿鱼醇溶蛋白液，鱿鱼醇溶蛋白液无腥味并且脂类物质含量小于0.2％；临界萃取中，萃取工作压力为10MPa，温度为40℃，时间为0.5h，超临界二氧化碳流体的流量为15L/h，乙醇提取时，乙醇浓度为90％，鱿鱼鱼糜与乙醇的质量比为1∶15，提取温度为55℃，pH值为9.0；(3)酶解：采用两步酶解法对鱿鱼醇蛋白液进行酶解制得酶解混合物，第一步超声酶解，选用本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种超临界萃取鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）鱿鱼预处理：将鱿鱼预处理制得鱿鱼鱼糜；（2）超临界萃取：采用超临界二氧化碳流体萃取并除去鱿鱼鱼糜中的脂类及腥味物质，并用乙醇进行提取制得鱿鱼醇溶蛋白液；（3）酶解：用蛋白酶对鱿鱼醇蛋白液进行酶解制得酶解混合物；（4）纯化：用活性炭吸附纯化酶解混合物以除去芳香族氨基酸，制得鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽液；（5）制粉：将鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽液浓缩干燥制得鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽。

【技术特征摘要】
1.一种超临界萃取鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）鱿鱼预处理：将鱿鱼预处理制得鱿鱼鱼糜；（2）超临界萃取：采用超临界二氧化碳流体萃取并除去鱿鱼鱼糜中的脂类及腥味物质，并用乙醇进行提取制得鱿鱼醇溶蛋白液；（3）酶解：用蛋白酶对鱿鱼醇蛋白液进行酶解制得酶解混合物；（4）纯化：用活性炭吸附纯化酶解混合物以除去芳香族氨基酸，制得鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽液；（5）制粉：将鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽液浓缩干燥制得鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽。2.根据权利要求1所述的一种超临界萃取鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽的方法，其特征在于：所述步骤（1）鱿鱼预处理具体为，除去鱿鱼内脏得到鱿鱼板，再将鱿鱼板进行划割、破碎处理，打成块状，用去离子水冲洗3～4次后，打成鱿鱼鱼糜。3.根据权利要求1或2所述的一种超临界萃取鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽的方法，其特征在于：所述的鱿鱼为阿根廷鱿鱼、秘鲁鱿鱼或南太平洋鱿鱼中的一种，并且为活的鱿鱼或冷冻不超过15天的鱿鱼。4.根据权利要求1所述的一种超临界萃取鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽的方法，其特征在于：所述步骤（2）超临界萃取中，萃取工作压力为10～45MPa，温度为35～60℃，时间为0.5～3.0h，超临界二氧化碳流体的流量为15～40L/h，制得鱿鱼醇溶蛋白液。5.根据权利要求1或4所述的一种超临界萃取鱿鱼活性蛋白高F值低聚肽的方法，其特征在于：所述鱿鱼醇溶蛋白液无腥味并且脂类物质含量小于0.2%。6.根据权利要求1所述的一种超临界萃取鱿鱼活性蛋白高F值低聚...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭健，姜东娇，宋文东，纪丽丽，王亚宁，蔡璐，
申请(专利权)人：浙江海洋大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33