The invention provides the application of a kind of induction differentiation reagent in human acute myeloid leukemia M2 cells, belonging to the technical field of Biochemistry and molecular biology. The data of the present invention are based on the fact that some nucleoside forms of cytokinins, such as oTR, KR, BAR and iPR, have very significant in vitro proliferation inhibitory activities on 60 human tumor cell lines of 9 large tumor lines, and the drug sensitivity to leukemia cell lines is the strongest.
【技术实现步骤摘要】
一类诱导分化试剂在人急性髓性白血病M2型细胞中的应用
本专利技术涉及细胞分裂素ortho-TopolinRiboside(oTR)、Kinetinriboside(KR)、N6-Benzyladenosine(BAR)、N6-Isopentenyladenosine(iPR)作为一类去促分化试剂对人M2型急性髓系白血病细胞株的抗肿瘤作用,属于生物化学与分子生物学
技术介绍
目前越来越多的研究发现,细胞分裂素不仅调节植物的生长发育同时对动物细胞的增殖和生长也具有重要作用。研究发现细胞分裂素的一些核苷形式ortho-TopolinRiboside(oTR)、Kinetinriboside(KR)、N6-Benzyladenosine(BAR)、N6-Isopentenyladenosine(iPR)在体外对癌细胞具有很强的毒性和促凋亡作用。当用这些细胞分裂素处理癌细胞后导致细胞周期不同程度的受阻和(或者)凋亡,这主要取决于不同的细胞系对不同的细胞分裂素的敏感度。尽管天然的CK和它们的类似物对动物细胞的作用已经被多次报道,但是目前还没有一个系统的对细胞分裂素的一些核苷形式的促分化作用进行研究。急性髓细胞样白血病(AML)是一种发展为骨髓细胞的克隆性血液系统恶性疾病,其特征在于正常造血细胞分化中不受控制的增殖和阻断,全反式维甲酸(ATRA)可以通过诱导分化来治愈独特的AML亚型---急性早幼粒细胞白血病(APL)。然而,ATRA介导的分化疗法不适用于其他类型的AML并且ATRA诱导疗法尚存在疗效不稳定、部分患者易复发等问题。因此,AML治疗迫切需要能够克 ...
【技术保护点】
1.一类促分化试剂在人M2型急性白血病细胞中的应用,其特征在于,步骤如下:(1)细胞培养:将人M2型急性白血病细胞株HL‑60悬浮于含有灭活胎牛血清的无菌的DMED培养液中,置于浓度为5%CO2、相对湿度为90%、温度为37℃的培养箱中培养,细胞长至培养瓶底面积的70%~80%传代1次;(2)药物配制:oTR、KR、BAR、iPR均用0.1%DMSO溶解,继续用无菌DMEM培养基将溶解好的oTR、KR、BAR、iPR均稀释至浓度为0.1μM‑30μM,过滤除菌,室温保存;(3)处理细胞:将步骤(1)处于对数生长期的5×104~1×105个细胞接种于每孔含有1mlDMEM培养液的24孔板中,设置5组实验,第1组:空白对照组;第2组:10μMoTR组;第3组:10μM KR;第4组:10μM BAR;第5组:10μM iPR组;向各组中加入对应的药物,置于浓度为5%CO2、相对湿度为90%、温度为37℃的培养箱中孵育36小时,收集细胞;(4)检查分化指标:收集(3)处理的细胞并用含0.2%FBS的PBS洗涤三次,将细胞与封闭抗体在室温下孵育15分钟,然后在4℃在黑暗中与抗人CD11b‑PE ...
【技术特征摘要】
1.一类促分化试剂在人M2型急性白血病细胞中的应用,其特征在于,步骤如下:(1)细胞培养:将人M2型急性白血病细胞株HL-60悬浮于含有灭活胎牛血清的无菌的DMED培养液中,置于浓度为5%CO2、相对湿度为90%、温度为37℃的培养箱中培养,细胞长至培养瓶底面积的70%~80%传代1次;(2)药物配制:oTR、KR、BAR、iPR均用0.1%DMSO溶解,继续用无菌DMEM培养基将溶解好的oTR、KR、BAR、iPR均稀释至浓度为0.1μM-30μM,过滤除菌,室温保存;(3)处理细胞:将步骤(1)处于对数生长期的5×104~1×105个细胞接种于每孔含有1mlDMEM培养液的24孔板中,设置5组实验,...
【专利技术属性】
技术研发人员:王黎,程娇,崔昌浩,刘胜先,陈晨,
申请(专利权)人:大连理工大学,
类型:发明
国别省市:辽宁,21
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