一种双重识别位点糖蛋白表面印迹纳米材料及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种双重识别位点糖蛋白表面印迹纳米材料及其制备方法和应用，属于医药功能材料制备技术领域；本发明专利技术首先在带有环氧键的聚甲基丙烯酸缩水甘油酯纳米粒子表面修饰亚氨基二乙酸并螯合铜离子形成金属离子亲和位点，其次，将修饰有金属离子亲和位点的PSG纳米粒子与模板糖蛋白分子OVA共同培养，将模板蛋白固定于粒子表面，氧化引发水溶性3‑氨基苯硼酸聚合后进行一系列处理后得到双重识别位点糖蛋白表面印迹纳米材料，并将该材料用于糖蛋白的选择性识别和分离；本发明专利技术的制备过程简便易行，有效降低合成成本，双重识别位点使得PSG‑MIPs对于糖蛋白的吸附亲和性更强，有效增强了对糖蛋白的选择性吸附能力。

【技术实现步骤摘要】
一种双重识别位点糖蛋白表面印迹纳米材料及其制备方法和应用
本专利技术涉及一种表面印迹纳米材料的制备方法，尤其涉及一种双重识别位点糖蛋白表面印迹纳米材料及其制备方法和应用，属于医药功能材料制备

技术介绍
糖蛋白已经被证明与多种疾病存在着密切的联系，例如糖尿病、癌症和免疫紊乱等。目前，糖蛋白在临床治疗中经常被用作诊断与治疗标记物。因此，从复杂生物样品中捕获并检测糖蛋白具有极高医疗价值。硼亲和法因为其与顺式二羟基化合物间可逆的共价作用而被广泛用于糖蛋白的分离。在碱性环境中，硼酸与糖蛋白形成分子共价键合，可形成五元或者六元硼酸环酯，当环境变为酸性时硼酸环酯则被破坏，重新释放出糖蛋白分子。因此，硼亲和法pH响应的优点，可实现对糖蛋白的可控吸附与解吸附。虽然硼亲和具有可逆亲和释放的优势，但却无法将目标糖蛋白从其类似物中分离出来。因此，发展一种新的具有较高选择性与良好抗干扰性的方法用于实际样品分析过程中糖蛋白的预处理是非常必要的。分子印迹技术是实现分子识别的重要手段，已经成为一种有效的样品前处理方法。但是糖蛋白分子结构复杂、尺寸大、难以传递与洗脱，因而极大的限制了分子印迹技术在糖蛋白分子本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种双重识别位点糖蛋白表面印迹纳米材料，其特征在于，所述纳米材料为单分散纳米材料，所述纳米材料的表面印迹层通过3‑氨基苯硼酸氧化自聚形成，印迹空腔位于纳米材料表面；所述纳米材料具有金属离子亲和位点与硼亲和位点的双重识别位点。

【技术特征摘要】
1.一种双重识别位点糖蛋白表面印迹纳米材料，其特征在于，所述纳米材料为单分散纳米材料，所述纳米材料的表面印迹层通过3-氨基苯硼酸氧化自聚形成，印迹空腔位于纳米材料表面；所述纳米材料具有金属离子亲和位点与硼亲和位点的双重识别位点。2.权利要求1所述的一种双重识别位点糖蛋白表面印迹纳米材料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)聚甲基丙烯酸缩水甘油酯(PSG)纳米粒子分散液的制备：将GMA、DVB和St加入三口烧瓶中，随后加入双蒸水并插入温度计和氮气导管，在氮气氛围下持续搅拌并加热；当温度达到71℃时，加入过硫酸钾溶液引发聚合，反应一定时间后，将产物通过离心分离，并用乙醇与双蒸水对产物分别洗涤，随后将产物分散于双蒸水中，得到聚甲基丙烯酸缩水甘油酯(PSG)纳米粒子分散液，备用；(2)表面螯合Cu2+聚甲基丙烯酸缩水甘油酯纳米粒子(PSG/IDA-Cu2+)的制备：在三口烧瓶中分别加入IDA和NaOH，随后加入步骤(1)中得到的聚甲基丙烯酸缩水甘油酯(PSG)纳米粒子分散液，超声分散后用NaOH调节溶液pH，并将烧瓶置于水浴中，加热反应一段时间后，将产物PSG/IDA通过离心分离并用双蒸水洗涤至中性；将洗涤干净的PSG/IDA分散于双蒸水中，加入CuSO4搅拌溶解，并于室温下反应过夜；最后将蓝色的PSG/IDA-Cu2+用双蒸水洗涤多次，并在真空干燥箱中干燥至恒重，，得到表面螯合Cu2+聚甲基丙烯酸缩水甘油酯纳米粒子(PSG/IDA-Cu2+)；(3)双重识别位点表面印迹纳米材料(PSG-MIPs)的制备：将步骤(2)中得到的，得到表面螯合Cu2+聚甲基丙烯酸缩水甘油酯纳米粒子(PSG/IDA-Cu2+)和模板蛋白卵清白蛋白（OVA）加入烧瓶中，随后加入PBS缓冲溶液，超声分散后静置，使卵清白蛋白（OVA）通过螯合作用于粒子表面；而后离心分离并用PBS缓冲溶液对分离术的粒子洗涤多次，直至洗涤液中无法测试出卵清白蛋白（OVA）；将洗涤后的粒子再次分散于PBS缓冲溶液中，并加入APBA，搅拌溶解后缓慢滴入过硫酸铵溶液，室温反应一段时间，将产物离心分离，并用无水乙醇与双蒸水分别对产物洗涤；随后用含有5%SDS的醋酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘建明，朱恒佳，刘金鑫，夏可旭，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32