【技术实现步骤摘要】
一种大鼠泌乳素腺瘤溴隐亭耐药细胞株及其制备方法和应用
本专利技术涉及肿瘤生物学
，即一种大鼠泌乳素腺瘤溴隐亭耐药细胞株的制备方法和应用。
技术介绍
垂体腺瘤作为一种良性肿瘤，占全部颅内肿瘤的大约10～15%。根据体内激素分泌活动可将其分为功能型和无功能型，根据肿瘤大小又可将其分为微腺瘤、大腺瘤和巨大腺瘤。泌乳素腺瘤作为最常见的垂体腺瘤，可过量分泌泌乳素并产生一系列症状。根据尸检及放射学研究，其发病率约为40～57%。虽然泌乳素腺瘤是一种良性肿瘤，但由于其造成高泌乳素血症和颅内压迫作用，可产生严重的临床症状：头痛、视力障碍、颅神经功能障碍、女性月经紊乱、闭经、泌乳、性功能障碍、不孕不育等。不仅如此，大量研究表明泌乳素腺瘤还可导致代谢综合征，如超重、胰岛素抵抗、血脂异常等。多巴胺受体激动剂是泌乳素腺瘤的首选治疗手段。但部分不能耐受多巴胺受体激动剂或对其产生了耐药性的病人在接受了外科切除或放射治疗后，往往会复发。因此，研究泌乳素腺瘤的溴隐亭耐药机制对解决其不良预后并寻找安全有效的替代药物至关重要。大鼠泌乳素腺瘤MMQ细胞系是目前研究泌乳素腺瘤常用的一种细胞株，但关...
【技术保护点】
1.一种制备大鼠泌乳素腺瘤溴隐亭耐药细胞株的方法，其特征在于，是以大鼠泌乳素腺瘤MMQ细胞作为亲本细胞，采用溴隐亭模拟人体内给药过程，通过反复大剂量冲击联合逐步递增药物浓度的方法，诱导建立获得大鼠泌乳素腺瘤溴隐亭耐药细胞株MMQ/BRC。
【技术特征摘要】
1.一种制备大鼠泌乳素腺瘤溴隐亭耐药细胞株的方法，其特征在于，是以大鼠泌乳素腺瘤MMQ细胞作为亲本细胞，采用溴隐亭模拟人体内给药过程，通过反复大剂量冲击联合逐步递增药物浓度的方法，诱导建立获得大鼠泌乳素腺瘤溴隐亭耐药细胞株MMQ/BRC。2.根据权利要求1所述的方法，包括以下具体步骤：S1.取大鼠泌乳素腺瘤MMQ细胞系，接种于含10%胎牛血清的DMEMF12培养基中，置于37℃、5%CO2、饱和湿度环境下培养；S2.取对数生长期MMQ细胞或当细胞密度达到80%时，接种于含2mmol/mL终浓度溴隐亭的新鲜DMEMF12培养基中，置于37℃、5%CO2、饱和湿度环境下培养，观察细胞是否能在此浓度下的培养基中稳定生长、传代；S3.按S2的方法进行培养并逐渐提高溴隐亭终浓度，依次为4μmol/mL、6μmol/mL、8μmol/mL、10μmol/mL，并冻存每个浓度下生长状态良好的细胞；S4.将10μmol/mL终浓度下的细胞传代成两瓶，添加溴隐亭，终浓度分别为10μmol/mL、20μmol/mL，继续培养并观察细胞状态；S5.重复S4两次，冻存两种浓度下的细胞；将20μmol/mL终浓度下的细胞继续培养并提高溴隐亭终浓度，依次为22μmol/mL、24μmol/mL、26μmol/mL、28μmol/mL、30μmol/mL；S6.将30μmol/mL终浓度下的细胞传代成两瓶，添加溴隐亭，终浓度分别为30μmol/mL、40μmol/mL，继续培养并观察细胞状态；S7.重复S6两次，冻存两种浓度下的细胞，将40μmol/m...
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