一种肉桂中多种药效成分的检测方法技术

本发明专利技术提供一种肉桂中多种药效成分的检测方法，包括以下步骤：1）供试品溶液的制备：取肉桂药材加入甲醇，超声提取后冷却，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液；2）对照品溶液的制备：将桂皮醛、肉桂酸、香豆素、2‑甲氧基桂皮醛对照品，加入甲醇溶解并定容，配成对照品溶液；3）检测：采用高效液相色谱法分别测定步骤1）中的供试品溶液和步骤2）中的对照品溶液，根据相对保留时间，确定供试品溶液中4种肉桂成分，并采用外标法确定供试品溶液中4种药效成分的含量。本发明专利技术可以对肉桂中4种主要药效成分同时进行有效的定性和定量分析，方法同步、简便、可行、准确，更全面地控制肉桂药材的内在质量。

【技术实现步骤摘要】
一种肉桂中多种药效成分的检测方法
本专利技术属于中药成分检测的
，涉及一种肉桂中多种药效成分的检测方法。
技术介绍
肉桂作为中药材，是樟科植物肉桂CinnamomumcassiaPresl的干燥树皮。其味辛、甘，性大热，有补火助阳，引火归元，散寒止痛，温通经脉的功效。目前，肉桂药材中治疗心血管疾病的主要活性成分为桂皮醛，在《中华人民共和国药典》2015版一部中已收载针对肉桂中桂皮醛的含量测定标准。同时，根据相关参考文献报道，肉桂中还含有肉桂酸、香豆素等化学成分。其中肉桂酸具有多种生理活性，例如：治疗动脉粥样化、抗肿瘤、抗菌、消炎、抗氧化、抗血栓形成和保护心脏等功能。香豆素类化合物具有抗肿瘤、抗凝血、抗氧化等作用。为了更全面地控制肉桂药材的内在质量，保障肉桂药材批次间质量和疗效的稳定性，有必要建立肉桂中多种药效成分的检测方法，作为现行质量控制标准的补充和提高。
技术实现思路
鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种肉桂中多种药效成分的检测方法，采用优化条件的前处理和仪器检测方法对肉桂中4种主要药效成分：桂皮醛、肉桂酸、香豆素、2-甲氧基桂皮醛，同时进行定性定量分析，进而反映肉桂药材的内在质量，为保障肉桂药材批次间质量和疗效的稳定性提供依据。为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供一种肉桂中多种药效成分的检测方法，包括以下步骤：1)供试品溶液的制备：取肉桂药材加入甲醇，超声提取后冷却，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液；2)对照品溶液的制备：将桂皮醛、肉桂酸、香豆素、2-甲氧基桂皮醛对照品，加入甲醇溶解并定容，配成对照品溶液；3)检测：采用高效液相色谱法分别测定步骤1)中的供试品溶液和步骤2)中的对照品溶液，根据相对保留时间，确定供试品溶液中4种肉桂成分，并采用外标法确定供试品溶液中4种药效成分的含量。优选地，所述肉桂中多种药效成分共4种，分别为桂皮醛、肉桂酸、香豆素、2-甲氧基桂皮醛。更优选地，所述桂皮醛的CAS号为104-55-2，所述肉桂酸的CAS号为140-10-3，所述香豆素的CAS号为91-64-5，所述2-甲氧基桂皮醛的CAS号为1504-74-1。优选地，步骤1)中，所述肉桂药材为破碎后过三号筛的肉桂药材粉末。优选地，步骤1)中，所述甲醇的加入量为肉桂药材的20～50倍量。更优选地，所述甲醇的加入量为肉桂药材的50倍量。具体来说，所述甲醇的加入量为肉桂药材的20～50倍量是指，甲醇加入体积量为所述肉桂药材含量的20～50倍，即如每0.5g的肉桂药材中加入甲醇10～25ml。优选地，步骤1)中，所述超声提取时间为10～40min。更优选地，所述超声提取时间为30min。优选地，步骤1)中，所述肉桂药材加入甲醇后，需精密称重。优选地，步骤1)中，所述冷却后需再称重，并用甲醇补足失重。优选地，步骤1)中，所述过滤是指：取摇匀后溶液的上清液过滤膜，放弃初滤液后，即得续滤液。更优选地，所述滤膜为0.45μm滤膜。优选地，步骤1)或2)中，所述甲醇为100％纯甲醇。优选地，步骤2)中，所述对照品溶液中各成分的含量范围为：桂皮醛为52.6440-677.0000μg/ml、肉桂酸为3.7636-48.4000μg/ml、香豆素为3.8569-49.6000μg/ml、2-甲氧基桂皮醛为7.6205-98.0000μg/ml。更优选地，所述对照品溶液中各成分的含量范围为：桂皮醛为250μg/ml、肉桂酸为10μg/ml、香豆素为18μg/ml、2-甲氧基桂皮醛为35μg/ml。优选地，步骤3)中，所述高效液相色谱法中的色谱柱为AgilentZorbaxSB-C18色谱柱(5μm，4.6mm×250mm)。优选地，步骤3)中，所述高效液相色谱法中的检测波长为280～290nm。更优选地，所述高效液相色谱法中的检测波长为280nm。优选地，步骤3)中，所述高效液相色谱法中的柱温为25～35℃。更优选地，所述高效液相色谱法中的柱温为30℃。优选地，步骤3)中，所述高效液相色谱法中的流速为1.0～1.4ml/min。更优选地，所述高效液相色谱法中的流速为1.2ml/min。优选地，步骤3)中，所述高效液相色谱法中的进样量为1～20μl。更优选地，所述高效液相色谱法中的进样量为10μl。优选地，步骤3)中，所述高效液相色谱法中，流动相为乙腈-0.02-0.04％磷酸水溶液，其中，A相为乙腈，B相为0.02-0.04％磷酸水溶液；分析时间为40min；梯度洗脱。更优选地，所述0.02-0.04％磷酸水溶液为体积百分数为0.02-0.04％的磷酸水溶液。更优选地，所述流动相为乙腈-0.03％磷酸水溶液。更优选地，所述梯度洗脱以流动相A相：B相体积比为24：76-42：58梯度变化洗脱。进一步优选地，所述梯度洗脱的具体程序为：0～20min，A相：B相体积比为24：76-24：76；20～30min，A相：B相体积比为24：76-35：65；30～40min，A相：B相体积比为35：65-42：58。优选地，步骤3)中，所述外标法是指：分别移取一系列不同浓度的步骤2)所述对照品溶液，采用高效液相色谱仪进样分析，获得对照品溶液中4种药效成分含量与峰面积的线性关系，以每一种药效成分色谱峰面积对应其相应的含量，绘制相应的标准工作曲线，计算得到各标准工作曲线的回归方程。再将供试品溶液采用高效液相色谱仪检测，将获得的供试品溶液中4种药效成分的色谱峰面积，分别代入所述各标准工作曲线的回归方程中，可得到相应4种药效成分的含量。如上所述，本专利技术提供的一种肉桂中多种药效成分的检测方法，采用优化条件的前处理和仪器检测方法对肉桂中4种主要药效成分(桂皮醛、肉桂酸、香豆素、2-甲氧基桂皮醛)进行同时、简单、准确的定量定性检测。本专利技术通过对肉桂中4种药效成分的定量分析，定量分析结果中4种药效成分的回归方程的相关系数R2均大于0.99990，回收率为96.06～101.50％，RSD均小于3％，测定方法的精密度、重复性、稳定性良好。本专利技术的定性定量分析方法同步、简便、可行、准确，更全面地控制肉桂药材的内在质量，保障肉桂药材批次间质量和疗效的稳定性，并作为现行质量控制标准的补充和提高。附图说明图1显示为本专利技术的肉桂中4种药效成分的对照品的液相色谱图。图2显示为本专利技术的肉桂中4种药效成分的供试品的液相色谱图。具体实施方式下面结合具体实施例进一步阐述本专利技术，应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的保护范围。以下通过特定的具体实例说明本专利技术的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点与功效。本专利技术还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本专利技术的精神下进行各种修饰或改变。须知，下列实施例中未具体注明的工艺设备或装置均采用本领域内的常规设备或装置；所有压力值和范围都是指相对压力。此外应理解，本专利技术中提到的一个或多个方法步骤并不排斥在所述组合步骤前后还可以存在其他方法步骤或在这些明确提到的步骤之间还可以插入其他方法步骤，除非另有说明；还应理解，本专利技术中提到的一个或多个设备/装置之间的组合连接关系并不排斥在所述组合设备/装置前后还可本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肉桂中多种药效成分的检测方法，包括以下步骤：1)供试品溶液的制备：取肉桂药材加入甲醇，超声提取后冷却，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液；2)对照品溶液的制备：将桂皮醛、肉桂酸、香豆素、2‑甲氧基桂皮醛对照品，加入甲醇溶解并定容，配成对照品溶液；3)检测：采用高效液相色谱法分别测定步骤1)中的供试品溶液和步骤2)中的对照品溶液，根据相对保留时间，确定供试品溶液中4种肉桂成分，并采用外标法确定供试品溶液中4种药效成分的含量。

【技术特征摘要】
1.一种肉桂中多种药效成分的检测方法，包括以下步骤：1)供试品溶液的制备：取肉桂药材加入甲醇，超声提取后冷却，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液；2)对照品溶液的制备：将桂皮醛、肉桂酸、香豆素、2-甲氧基桂皮醛对照品，加入甲醇溶解并定容，配成对照品溶液；3)检测：采用高效液相色谱法分别测定步骤1)中的供试品溶液和步骤2)中的对照品溶液，根据相对保留时间，确定供试品溶液中4种肉桂成分，并采用外标法确定供试品溶液中4种药效成分的含量。2.根据权利要求1所述的一种肉桂中多种药效成分的检测方法，其特征在于，所述肉桂中多种药效成分共4种，分别为桂皮醛、肉桂酸、香豆素、2-甲氧基桂皮醛。3.根据权利要求1所述的一种肉桂中多种药效成分的检测方法，其特征在于，步骤1)中，所述肉桂药材为破碎后过三号筛的肉桂药材粉末；所述甲醇的加入量为肉桂药材的20～50倍量。4.根据权利要求1所述的一种肉桂中多种药效成分的检测方法，其特征在于，步骤1)中，所述超声提取时间为10～40min。5.根据权利要求1所述的一种肉桂中多种药效成分的检测方法，其特征在于，步骤1)中，包括以下条件中任一项或多项：A1)所述肉桂药材加入甲醇后，需精密称重；A2)所述冷却后需再称重，并用甲醇补足失重；A3)所述过滤是指：取摇匀后溶液的上清液过滤膜，放弃初滤液后，即得续滤液。6.根据权利要求1所述的一种肉桂中多种药效成分的检测方法，其特征在于，步骤2)中，所述对照品溶液中各成分的含量范围为：桂皮醛为...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾佳敏，田禾苗，姜鹏，詹常森，张正光，
申请(专利权)人：上海和黄药业有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31