微针组合物及其使用方法技术

本文描述了包含编码外源多肽的重组甲病毒复制子的微针装置，其中所述重组甲病毒复制子被涂覆在多个微针上或嵌入多个微针中。本文还描述了制备包含编码外源多肽的重组甲病毒复制子的微针装置的方法。本文还公开了在个体中诱导免疫应答的方法，所述方法包括使所述个体与包含编码外源多肽的重组甲病毒复制子的微针装置相接触。

Microneedle compositions and methods of use

In this paper, a microneedle device containing recombinant A virus replicon encoding exogenous polypeptide is described, in which the recombinant A virus replicon is coated on multiple microneedles or embedded in multiple microneedles. The preparation of a microneedle device containing recombinant A virus replicon encoding exogenous polypeptide is also described. A method of inducing an immune response in an individual is also disclosed. The method includes contacting the individual with a microneedle device containing a recombinant A virus replicator encoding an exogenous polypeptide.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】微针组合物及其使用方法相关申请的交叉引用本申请要求于2016年1月11日提交的美国临时申请号62/277,312的权益，该美国临时申请通过引用以整体并入本文。
技术介绍
将组合物递送至目标细胞或组织面临着许多运输障碍。编码基因产物如蛋白质的核酸和非编码RNA(例如，siRNA)可被直接递送至所需脊椎动物受试者，或者可被离体递送至从该受试者获得的或衍生的细胞，并且该细胞可被重新植入该受试者。出于许多目的期望将这类核酸递送至脊椎动物受试者，诸如用于基因疗法，以诱导针对编码的多肽的免疫应答或调节内源基因的表达。因为游离DNA不容易被细胞吸收而游离RNA在体内迅速被降解，所以这种方法的使用已受到限制。此外，递送也可能存在问题。例如，使用皮下针的皮下或肌肉内注射可引起受试者的疼痛、创伤和焦虑。无论是作为蛋白质直接递送还是通过编码多核苷酸间接递送一种或多种多肽，都具有许多有用的应用，包括疫苗接种。疫苗接种已被证明是对抗甚至根除感染性疾病的有效手段。例如，流感疫苗目前被CDC推荐为预防流感的主要方法。然而，流感病毒具有高突变率和抗原变异性，因此通常每年根据所预测的循环致病株来生产新疫苗。这带来了许多挑战。例如，疫苗的有效性仅与预测的一样。如果对优势株的预测不准确，那么疫苗对大多数人的有效性有限。另外，可能需要数月才能生产出足够的流感疫苗来为人群接种。
技术实现思路
在一些实施方案中，本文公开了用于施用RNA分子的微针装置，所述微针装置包含：(a)包含多个微针的基底；以及(b)涂覆在所述多个微针上或嵌入所述多个微针中的包含编码外源多肽的RNA的组合物。在一些实施方案中，所述RNA分子为重组甲病毒复制子。在一些实施方案中，所述RNA分子为脱水的。在一些实施方案中，所述多个微针为可溶解的、可生物溶解的或可生物降解的。在一些实施方案中，所述外源多肽为外来抗原或自身抗原。在一些实施方案中，所述自身抗原是与癌症相关的抗原。在一些实施方案中，所述外来抗原是与感染原相关的抗原。在一些实施方案中，所述重组甲病毒复制子以有效诱导对所述外来抗原或自身抗原的免疫应答的量存在。在一些实施方案中，所述外源多肽为流感病毒HA多肽或流感病毒NA多肽。在一些实施方案中，所述流感病毒HA多肽为甲型流感病毒HA多肽或乙型流感病毒HA多肽。在一些实施方案中，所述流感病毒HA多肽来自选自H1、H2、H5、H6、H8、H9、H11、H12、H13、H16、H17或H18的第1组甲型流感病毒亚型的病毒株。在一些实施方案中，所述流感病毒HA多肽来自选自H3、H4、H7、H10、H14或H15的第2组甲型流感病毒亚型的病毒株。在一些实施方案中，所述流感病毒HA多肽来自乙型流感病毒的病毒株。在一些实施方案中，所述流感病毒HA多肽来自甲型流感病毒H1亚型的病毒株。在一些实施方案中，所述流感病毒HA多肽来自甲型流感病毒H3亚型的病毒株。在一些实施方案中，所述流感病毒HA多肽来自乙型流感病毒Yamagata或Victoria谱系的病毒株。在一些实施方案中，所述重组甲病毒复制子编码包含以下HA多肽的外源多肽：(a)来自甲型流感病毒H1亚型病毒株的HA多肽；(b)来自甲型流感病毒H3亚型病毒株的HA多肽；(c)来自乙型流感病毒Yamagata谱系病毒株的HA多肽；(d)来自乙型流感病毒Victoria谱系病毒株的HA多肽；或者(e)其任何组合。在一些实施方案中，所述重组甲病毒复制子编码包含以下HA多肽的至少两种外源多肽：(a)来自甲型流感病毒H1亚型病毒株的HA多肽；(b)来自甲型流感病毒H3亚型病毒株的HA多肽；(c)来自乙型流感病毒Yamagata谱系病毒株的HA多肽；或者(d)来自乙型流感病毒Victoria谱系病毒株的HA多肽。在一些实施方案中，每种所述外源多肽在单一重组甲病毒复制子上被编码。在一些实施方案中，所述外源多肽在不同的重组甲病毒复制子上被编码。在一些实施方案中，所述外源多肽为乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)。在一些实施方案中，所述重组甲病毒复制子编码包含以下抗原的外源多肽：(a)来自脊髓灰质炎病毒的抗原；(b)来自破伤风梭菌(Clostridiumtetani)的抗原；(c)来自狂犬病病毒的抗原；或者(d)其任何组合。在一些实施方案中，所述重组甲病毒复制子编码包含以下抗原的外源多肽：(a)来自脊髓灰质炎病毒的抗原；(b)来自破伤风梭菌的抗原；以及(c)来自狂犬病病毒的抗原。在一些实施方案中，每种所述外源多肽在单一重组甲病毒复制子上被编码。在一些实施方案中，所述外源多肽在不同的重组甲病毒复制子上被编码。在一些实施方案中，所述重组甲病毒复制子编码包含以下抗原的外源多肽：(a)来自马尔堡病毒的抗原；(b)来自埃博拉苏丹病毒的抗原；(c)来自埃博拉扎伊尔病毒的抗原；或者(d)其任何组合。在一些实施方案中，所述重组甲病毒复制子编码包含以下抗原的外源多肽：(a)来自马尔堡病毒的抗原；(b)来自埃博拉苏丹病毒的抗原；以及(c)来自埃博拉扎伊尔病毒的抗原。在一些实施方案中，每种所述外源多肽在单一重组甲病毒复制子上被编码。在一些实施方案中，所述外源多肽在不同的重组甲病毒复制子上被编码。在一些实施方案中，所述微针装置在室温下储存至少一个月后有效诱导对所述外源多肽的免疫应答。在一些实施方案中，将第二生物活性剂涂覆到所述多个微针上或嵌入所述多个微针中。在一些实施方案中，所述第二生物活性剂为多肽。在一些实施方案中，所述第二生物活性剂增强个体中的免疫应答。在一些实施方案中，所述第二生物活性剂为佐剂。在一些实施方案中，所述重组甲病毒复制子被配制成树状聚体-复制子纳米颗粒。在一些实施方案中，所述树状聚体为PAMAM树状聚体。在一些实施方案中，所述PAMAM树状聚体包含氨基表面反应性基团。在一些实施方案中，所述PAMAM树状聚体为包含氨基表面反应性基团的G5或G9PAMAM树状聚体。在一些实施方案中，所述PAMAM树状聚体包含修饰的氨基表面反应性基团。在一些实施方案中，用氟化剂、N-羟基琥珀酰亚胺酯或氨基酸来修饰所述修饰的氨基表面反应性基团。在一些实施方案中，所述N-羟基琥珀酰亚胺酯为PEG的N-羟基琥珀酰亚胺酯或细胞穿透肽的N-羟基琥珀酰亚胺酯。在一些实施方案中，所述氟化剂为七氟丁酸酐。在一些实施方案中，所述氨基酸为精氨酸或组氨酸。在一些实施方案中，通过微流体混合装置来配制所述树状聚体-复制子纳米颗粒。在一些实施方案中，使用微流体分配装置将所述重组甲病毒复制子涂覆到所述多个微针上。在一些实施方案中，本文公开了用于施用RNA分子的微针装置，所述微针装置包含：(a)包含多个微针的基底；以及(b)涂覆在所述多个微针上或嵌入所述多个微针中的药物组合物，该药物组合物包含编码外源多肽的重组甲病毒复制子和药学上可接受的载体或赋形剂。在一些实施方案中，本文公开了将多肽递送至有需要的个体的方法，所述方法包括向所述个体施用本文所述的任何一种微针装置。在一些实施方案中，本文还公开了制备微针装置的方法，所述方法包括：(a)获得包含多个微针的基底；以及(b)将包含编码外源多肽的RNA分子的组合物涂覆到所述多个微针上或嵌入所述多个微针中。在一些实施方案中，所述RNA分子为重组甲病毒复制子。在一些实施方案中，所本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于施用RNA分子的微针装置，所述微针装置包含：(a)包含多个微针的基底；以及(b)涂覆在所述多个微针上或嵌入所述多个微针中的包含编码外源多肽的RNA的组合物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.01.11 US 62/277,3121.一种用于施用RNA分子的微针装置，所述微针装置包含：(a)包含多个微针的基底；以及(b)涂覆在所述多个微针上或嵌入所述多个微针中的包含编码外源多肽的RNA的组合物。2.根据权利要求1所述的微针装置，其中所述RNA分子为重组甲病毒复制子。3.根据权利要求1所述的微针装置，其中所述RNA分子为脱水的。4.根据权利要求1所述的微针装置，其中所述多个微针为可溶解的、可生物溶解的或可生物降解的。5.根据权利要求1所述的微针装置，其中所述外源多肽为外来抗原或自身抗原。6.根据权利要求5所述的微针装置，其中所述自身抗原是与癌症相关的抗原。7.根据权利要求5所述的微针装置，其中所述外来抗原是与感染原相关的抗原。8.根据权利要求2所述的微针装置，其中所述重组甲病毒复制子以有效诱导对所述外来抗原或自身抗原的免疫应答的量存在。9.根据权利要求1所述的微针装置，其中所述外源多肽为流感病毒HA多肽或流感病毒NA多肽。10.根据权利要求9所述的微针装置，其中所述流感病毒HA多肽为甲型流感病毒HA多肽或乙型流感病毒HA多肽。11.根据权利要求10所述的微针装置，其中所述流感病毒HA多肽来自选自H1、H2、H5、H6、H8、H9、H11、H12、H13、H16、H17或H18的第1组甲型流感病毒亚型的病毒株。12.根据权利要求10所述的微针装置，其中所述流感病毒HA多肽来自选自H3、H4、H7、H10、H14或H15的第2组甲型流感病毒亚型的病毒株。13.根据权利要求10所述的微针装置，其中所述流感病毒HA多肽来自乙型流感病毒的病毒株。14.根据权利要求11所述的微针装置，其中所述流感病毒HA多肽来自甲型流感病毒H1亚型的病毒株。15.根据权利要求12所述的微针装置，其中所述流感病毒HA多肽来自甲型流感病毒H3亚型的病毒株。16.根据权利要求13所述的微针装置，其中所述流感病毒HA多肽来自乙型流感病毒Yamagata或Victoria谱系的病毒株。17.根据权利要求2所述的微针装置，其中所述重组甲病毒复制子编码包含以下HA多肽的外源多肽：(a)来自甲型流感病毒H1亚型病毒株的HA多肽；(b)来自甲型流感病毒H3亚型病毒株的HA多肽；(c)来自乙型流感病毒Yamagata谱系病毒株的HA多肽；(d)来自乙型流感病毒Victoria谱系病毒株的HA多肽；或者(e)其任何组合。18.根据权利要求17所述的微针装置，其中所述重组甲病毒复制子编码包含以下HA多肽的至少两种外源多肽：(a)来自甲型流感病毒H1亚型病毒株的HA多肽；(b)来自甲型流感病毒H3亚型病毒株的HA多肽；(c)来自乙型流感病毒Yamagata谱系病毒株的HA多肽；或者(d)来自乙型流感病毒Victoria谱系病毒株的HA多肽。19.根据权利要求18所述的微针装置，其中每种所述外源多肽在单一重组甲病毒复制子上被编码。20.根据权利要求18所述的微针装置，其中所述外源多肽在不同的重组甲病毒复制子上被编码。21.根据权利要求1所述的微针装置，其中所述外源多肽为乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)。22.根据权利要求2所述的微针装置，其中所述重组甲病毒复制子编码包含以下抗原的外源多肽：(a)来自脊髓灰质炎病毒的抗原；(b)来自破伤风梭菌的抗原；(c)来自狂犬病病毒的抗原；或者(d)其任何组合。23.根据权利要求22所述的微针装置，其中所述重组甲病毒复制子编码包含以下抗原的外源多肽：(a)来自脊髓灰质炎病毒的抗原；(b)来自破伤风梭菌的抗原；以及(c)来自狂犬病病毒的抗原。24.根据权利要求23所述的微针装置，其中每种所述外源多肽在单一重组甲病毒复制子上被编码。25.根据权利要求23所述的微针装置，其中所述外源多肽在不同的重组甲病毒复制子上被编码。26.根据权利要求2所述的微针装置，其中所述重组甲病毒复制子编码包含以下抗原的外源多肽：(a)来自马尔堡病毒的抗原；(b)来自埃博拉苏丹病毒的抗原；(c)来自埃博拉扎伊尔病毒的抗原；或者(d)其任何组合。27.根据权利要求26所述的微针装置，其中所述重组甲病毒复制子编码包含以下抗原的外源多肽：(a)来自马尔堡病毒的抗原；(b)来自埃博拉苏丹病毒的抗原；以及(c)来自埃博拉扎伊尔病毒的抗原。28.根据权利要求27所述的微针装置，其中每种所述外源多肽在单一重组甲病毒复制子上被编码。29.根据权利要求27所述的微针装置，其中所述外源多肽在不同的重组甲病毒复制子上被编码。30.根据权利要求2所述的微针装置，其中所述微针装置在室温下储存至少一个月后有效诱导对所述外源多肽的免疫应答。31.根据权利要求2所述的微针装置，其进一步包含涂覆在所述多个微针上或嵌入所述多个微针中的第二生物活性剂。32.根据权利要求31所述的微针装置，其中所述第二生物活性剂为多肽。33.根据权利要求31所述的微针装置，其中所述第二生物活性剂增强个体中的免疫应答。34.根据权利要求33所述的微针装置，其中所述第二生物活性剂为佐剂。35.根据权利要求2所述的微针装置，其中所述重组甲病毒复制子被配制成树状聚体-复制子纳米颗粒。36.根据权利要求35所述的微针装置，其中所述树状聚体为PAMAM树状聚体。37.根据权利要求36所述的微针装置，其中所述PAMAM树状聚体包含氨基表面反应性基团。38.根据权利要求37所述的微针装置，其中所述PAMAM树状聚体为包含氨基表面反应性基团的G5或G9PAMAM树状聚体。39.根据权利要求37所述的微针装置，其中所述PAMAM树状聚体包含修饰的氨基表面反应性基团。40.根据权利要求39所述的微针装置，其中用氟化剂、N-羟基琥珀酰亚胺酯或氨基酸来修饰所述修饰的氨基表面反应性基团。41.根据权利要求40所述的微针装置，其中所述N-羟基琥珀酰亚胺酯为PEG的N-羟基琥珀酰亚胺酯或细胞穿透肽的N-羟基琥珀酰亚胺酯。42.根据权利要求40所述的微针，其中所述氟化剂为七氟丁酸酐。43.根据权利要求40所述的微针，其中所述氨基酸为精氨酸或组氨酸。44.根据权利要求35所述的微针装置，其中通过微流体混合装置来配制所述树状聚体-复制子纳米颗粒。45.根据权利要求2所述的微针装置，其中使用微流体分配装置将所述重组甲病毒复制子涂覆到所述多个微针上。46.一种用于施用RNA分子的微针装置，所述微针装置包含：(a)包含多个微针的基底；以及(b)涂覆在所述多个微针上或嵌入所述多个微针中的药物组合物，该药物组合物包含编码外源多肽的重组甲病毒复制子和药学上可接受的载体或赋形剂。47.一种将多肽递送给有需要的个体的方法，所述方法包括向所述个体施用根据权利要求1-46中任一项所述的微针...

【专利技术属性】
技术研发人员：丹尼尔·R·亨德森，
申请(专利权)人：沃达瑞公司，
类型：发明
国别省市：美国,US