本发明专利技术涉及一种鲜切花保鲜剂及其应用，所述保鲜剂是由一种甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus ZJ‑11)发酵液构成，用水将其稀释一定比例后即可使用。本发明专利技术产成本低廉，技术简单易操作，且具有显著提高鲜切花瓶插寿命和观赏价值的优点，可广泛应用于各类鲜切花保鲜如非洲菊、玫瑰花、月季等。
A fresh cut flower preservative and its application
The invention relates to a fresh-keeping agent for cut flowers and its application. The fresh-keeping agent is composed of a fermentation broth of Bacillus methylotrophicus ZJ_11, which can be used after diluting it in a certain proportion with water. The invention has the advantages of low production cost, simple technology and easy operation, and remarkably improves the vase life and ornamental value of fresh cut flowers, and can be widely used for fresh-keeping of various fresh cut flowers, such as gerbera, rose, rose, etc.
【技术实现步骤摘要】
一种鲜切花保鲜剂及其应用
本专利技术涉及一种保鲜剂，具体涉及一种鲜切花保鲜剂及其应用，属于花卉保鲜及农业
技术介绍
近些年来，尽管鲜切花保鲜技术一直在不断创新，但是面对市场的要求和人们的需要，研究出一种环保并且成本廉价的鲜花保鲜技术是我们所要急需解决的问题。根据报道和市场的应用情况来看，可以分为物理保鲜、化学保鲜以及生物保鲜三种主要的保鲜方法。其中最为常见的物理保鲜方法是低温冷藏和气调储藏。化学保鲜方法是指利用各种化学试剂和药物处理切花，改变了其正常的生理生化过程，目前此种方法在市场中得到了最广泛的应用。例如郑春雷等将鲜切花经过化学保鲜剂处理后，能使切花水分胁迫得到一定程度的缓解，降低能源物质消耗的速率和呼吸强度，同时也能够抑制乙烯的产生和病菌的滋生繁殖，达到延长切花保鲜寿命的目的。生物保鲜技术主要是使用自然生长或者在人工控制条件下生长繁殖的微生物菌群和它们产生的次级代谢物质来预防植物的病虫害以及防止果蔬鲜花采摘后的腐烂，从而增加其利用的价值。因为其安全，经济，方便等突出的优点，在以后的生产生活中将会得到普遍的应用。查阅大量文献，发现目前利用微生物及其代谢物进行鲜切花保鲜的研究并不多，其中涉及到的微生物主要包括枯草芽孢杆菌，解淀粉芽孢杆菌，炭疽菌Colletotrichumsp.III和炭角菌Xylariasp.T-4等。其中，朱天辉等人利用枯草芽孢杆菌的发酵液对各类切花进行生物保鲜的研究表明，生物保鲜剂的发酵时间较长为72h，低浓度的发酵液可适当延长月季、波斯菊鲜切花的保鲜时间；郭凤献等人用解淀粉芽孢杆菌对非洲菊切花保鲜效应的相关研究表明，解淀粉芽孢杆菌发酵液2天的稀释质量百分比0.6％的综合保鲜效果最佳，比对照瓶插寿命延长了9天；王青青等人用两种内生真菌的发酵液对切花世纪红非洲菊保鲜效果的影响研究表明，不同真菌菌液处理可以延长非洲菊切花瓶插寿命约2-3天。然而，上述研究中利用微生物发酵液作为鲜切花保鲜剂涉及到的微生物菌种还比较有限，生物保鲜剂发酵时接种量可适当减少，培养时间可进一步缩短来降低生产成本，保鲜效果还有进一步上升的空间。因此，急需一种生产成本低廉，技术简单易操作，保鲜效果更好的一种鲜切花保鲜剂。
技术实现思路
为解决现有技术不足，本专利技术提供了一种鲜切花保鲜剂及其应用，本专利技术所提供的鲜切花保鲜剂是一种甲基营养型芽孢杆菌(BacillusmethylotrophicusZJ-11)，该甲基营养型芽孢杆菌(BacillusmethylotrophicusZJ-11)从健康核桃植株上分离筛选获得，填补了利用甲基营养型芽孢杆菌发酵液作为多种鲜切花保鲜剂的技术空白，对鲜切花保鲜具有一定的应用价值。本专利技术还提供了甲基营养型芽孢杆菌BacillusmethylotrophicusZJ-11发酵液的制备方法即鲜切花保鲜剂的制备方法，本专利技术所提供的保鲜剂应用于鲜切花保鲜上。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：一种鲜切花保鲜剂是由甲基营养型芽孢杆菌(BacillusmethylotrophicusZJ-11)发酵液，于2018年6月19日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNo：M2018380。甲基营养型芽孢杆菌BacillusmethylotrophicusZJ-11的形态学和生理生化特征：在LB培养基上该菌单菌落为椭圆形或圆形，培养基正面颜色为乳白色，菌落边缘有的整齐，有的呈现锯齿状，表面略粗糙有褶皱，不透明，不易乳化，用LB液体培养基震荡培养后静置，表层可看到一层白色透明粘膜；革兰氏染色结果显示为阳性，该菌株可以水解β-葡萄糖甙酶及蛋白酶，可将硝酸盐还原到亚硝酸盐，脲酶反应呈阴性，该菌株能利用D-葡萄糖、甘露糖、肌醇、D-核糖蔗糖、麦芽糖等作为唯一碳源生长。甲基营养型芽孢杆菌(BacillusmethylotrophicusZJ-11)的分子学鉴定：对菌株ZJ-11进行分子鉴定，将测得的16SrDNA序列(片段长度为1448bp)与GenBank数据库中序列进行BLAST分析，选取16株菌株用ClustalX2.1进行多序列比对分析，利用MEGA6.0软件采用邻接法进行系统发育树构建和聚类分析，MEGA6的Neighbor-Joining法构建系统进化树，如图1所示。菌株ZJ-11与GenBank中登录号为JQ765434.1和KJ149808.1的菌株同源性达到99％。依据16SrDNA分类标准，一般认为16SrDNA序列同源性大于97％，可认为属于同一个种，结合上述形态和部分生理生化特征，可初步判定拮抗菌株ZJ-11属于甲基营养型芽孢杆菌。进一步的，所述制备方法，包括如下步骤：用接种针挑一环生长于LB固体培养基上的BacillusmethylotrophicusZJ-11菌落，接种于装有5-20mLLB液体培养基的试管或者三角瓶中，在28-35℃、120-180rpm条件下培养15-24h，得到一级发酵液；按照体积百分数为0.5-3％的接种量，取所述一级发酵液接种至50-300mLLB液体培养基中，在28-35℃、120-180rpm条件下培养15-24h，当菌含量大于2×108cfu/mL以上即可获得二级发酵菌液，其中，LB液体培养基为：蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化钠5g/L，pH为7.0，LB固体培养基是在液体培养基中加入1.5-2.0％的琼脂得到。保鲜剂制作容易，耗时短，液体培养代谢产物只需要在液体培养基中培养15-24h即可获得很好的保鲜效果，大大降低了生产成本。申请人从健康核桃植株上筛选得到一株细菌，结合生理生化特征和分子特征鉴定为甲基营养型芽孢杆菌，并命名为BacillusmethylotrophicusZJ-11。该菌株BacillusmethylotrophicusZJ-11已于2018年6月19日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC，湖北省武汉市武昌珞珈山)，保藏编号为M2018380。进一步的，所述甲基营养型芽孢杆菌(BacillusmethylotrophicusZJ-11)的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。进一步的，所述鲜切花为非洲菊、玫瑰花、月季或牡丹。一种鲜切花保鲜剂使用方法，是将甲基营养型芽孢杆菌(BacillusmethylotrophicusZJ-11)发酵液0.05-0.25mL，用水稀释至100mL，将鲜花插入该稀释溶液中即可。本专利技术具有如下优点：1.本专利技术的菌株甲基营养型芽孢杆菌(BacillusmethylotrophicusZJ-11)，分离自核桃健康植株，具有稳定的生态环境和防病促生作用。2.本专利技术的保鲜剂制作容易，BacillusmethylotrophicusZJ-11生长速度快，液体培养代谢产物只需要在液体培养基中培养15-24h即可获得，且发酵液用量低，大大降低了生产成本。3.本专利技术的保鲜剂以BacillusmethylotrophicusZJ-11发酵液为主要成分，对多种鲜切花如非洲菊、月季、玫瑰、牡丹等均有保鲜效果，具有广谱性。4.不同浓度发酵液能够相对地减缓鲜切花在瓶插保鲜过程中的鲜重损失，降低鲜切花衰老的速率，使鲜切花能够保持一定的鲜度。且0.1％和0.2％浓度保鲜液能够使鲜切花保鲜达本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种鲜切花保鲜剂，其特征在于，所述保鲜剂为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus ZJ‑11)发酵液，保藏号为CCTCC No：M2018380。
【技术特征摘要】
1.一种鲜切花保鲜剂，其特征在于，所述保鲜剂为甲基营养型芽孢杆菌(BacillusmethylotrophicusZJ-11)发酵液，保藏号为CCTCCNo：M2018380。2.一种鲜切花保鲜剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)用接种针挑一环生长于LB固体培养基上的BacillusmethylotrophicusZJ-11菌落，接种于装有5-20mLLB液体培养基的试管或者三角瓶中，在28-35℃、120-180rpm条件下培养15-24h，得到一级发酵液；2)按照体积百分数为0.5-3％的接种量，取所述一级发酵液接种至50-300mLLB液体培养基中，在28-35℃、120-180rpm条件下培养15-24h，当菌含量大于...
【专利技术属性】
技术研发人员：魏蜜，陈嘉敏，朱志强，李娟，傅本重，张志林，
申请(专利权)人：湖北工程学院，
类型：发明
国别省市：湖北,42
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