微生物发酵制备苜蓿草饲料的方法技术

本发明专利技术公开了一种微生物发酵制备苜蓿草饲料的方法，包括以下步骤：1)、按照1～5ml/g的液料比，在粉碎后的苜蓿草中加入营养盐溶液，于密封条件下进行灭菌，然后冷却至室温，得原料液；2)、按照4～16ml菌液/100g苜蓿草的接种量，在原料液中加入孢子浓度为10

Preparation of Alfalfa feed by microbial fermentation

The invention discloses a method for preparing alfalfa forage by microbial fermentation, which comprises the following steps: 1) adding nutrient salt solution into crushed alfalfa according to the liquid-to-material ratio of 1-5 ml/g, sterilizing under sealed conditions, then cooling to room temperature to obtain raw material solution; 2) inoculating alfalfa forage according to 4-16 ml bacterium solution/100 g; The spore concentration was 10 in the raw material.

【技术实现步骤摘要】
微生物发酵制备苜蓿草饲料的方法
本专利技术涉及饲料领域，特别涉及一种微生物发酵制备苜蓿草饲料的方法。
技术介绍
苜蓿草(拉丁学名：LotuscorniculatusL)，是苜蓿属(Medicago)植物的通称，原产于欧洲与美洲，苜蓿草是一种多年生开花植物。其中最著名的是作为牧草的紫花苜蓿(Medicagosativa)，是牲畜饲料。苜蓿作为世界种植面积最大的牧草，具有产量高、抗旱、抗寒、再生性强、营养价值高、适口性好等优点，是畜禽重要的饲草饲料。苜蓿素有“牧草之王”之称，营养价值高、产量高、再生性强、饲用价值居各种牧草之首，是畜禽重要的饲草饲料，特别对奶牛的产奶量和泌乳率的提高有着重要的作用。因此，苜蓿对畜牧业尤其是奶业的发展具有重要意义。苜蓿茎叶中含有丰富的蛋白质、矿物质、多种维生素、微量元素及胡萝卜素，耿华珠等对不同产地的20个苜蓿品种营养成分含量进行测定，粗蛋白质含量为15.43％～22.69％，粗脂肪含量为1.44％～3.67％，钙含量为1.12％～3.24％，磷含量为0.09％～0.36％。生长2～5年的苜蓿每平方米鲜草产量一般在3～6kg，干草产量0.75～1.2kg；苜蓿再生性很强，刈割后生长速度快，一般一年可刈割2～4次，多者可刈割5～6次；生长利用年限长，苜蓿寿命可达30年，田间栽培利用年限多达7～10年。苜蓿的利用方式多种多样，可放牧、鲜草青饲、青贮、调制干草、加工草粉、草块、草饼、草颗粒、开发饲用苜蓿叶蛋白及用于配合饲料或混合饲料。李志强等研究表明，在奶牛日粮中增加苜蓿干草量能极显著提高奶牛的产奶量(P<0.01)。李占武研究表明，用紫花苜蓿复合草颗粒替代精料2.5kg能显著提高奶牛产奶量(P<0.0.5)，经济效益明显。胡勇报道，将苜蓿草粉添加到兔饲料中，可以极显著提高兔的日增重(P<0.01)，并提高经济效益。王胚胜等研究表明，利用苜蓿草粉颗粒料饲喂獭兔，提高了兔的生长速度，避免了消化系统疾病的感染。马进勇报道，鸡饲料中添加苜蓿草粉3％～5％代替麸皮，可提高鸡受精率1.8％，孵化率提高2.1％。张春梅等研究认为，添加苜蓿草粉能提高黄河鲤鱼生产性能、鱼肉品质和经济效益。目前现有的苜蓿草饲料的制备方法苜蓿干草、苜蓿青贮、苜蓿草粉、苜蓿草颗粒、苜蓿草块等，可使牛、羊等反刍家畜发生臌气病，可致使牛、羊等家畜死亡或产乳量下降。申请号为201610376988的专利技术专利《一种肉鸡用微生物发酵饲料及其制备方法》，包括玉米粉250-500份、豆粕粉150-200份、鱼粉20-50份、青饲料30-80份、虾壳粉50-90份、桑叶粉30-50份、次粉10-50份、棉籽粕20-30份、食盐2-5份、蛋氨酸2-5份、赖氨酸1-3份、食用油10-20份、碳酸氢钙5-20份和微生物菌剂0.8-1.5份；其制备方法包括复苏、发酵和过滤。该技术存在成本高，操作繁琐的缺陷。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种提高蛋白质水解度的微生物发酵制备苜蓿草饲料的方法。为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种微生物发酵制备苜蓿草饲料的方法，包括以下步骤：1)、按照1～5ml/g(较佳为3ml/g)的液料比，在粉碎后的苜蓿草中加入营养盐溶液，于密封条件下进行灭菌，然后冷却至室温，得原料液；2)、按照4～16ml菌液/100g苜蓿草的接种量，在原料液中加入孢子浓度为106～107个/mL的米曲霉菌液，置于26～32℃恒温振荡培养箱中发酵培养3～10天；3)、先将步骤2)所得的发酵产物灭菌，然后加水于95±10℃水提1±0.5h，所述步骤1)中的苜蓿草与水的料液比为1g/8～12ml；将水提所得物进行固液分离，所述残渣干燥后，得苜蓿草饲料。作为本专利技术的微生物发酵制备苜蓿草饲料的方法的改进，所述营养盐溶液为：称取0.9～1.1gKH2PO4、2.3～2.7gNaCl、0.4～0.6gMgSO4·7H2O、0.9～1.1g(NH4)2SO4、0.4～0.6gCaCl2，混合，用水溶解定容至1L，调节pH至7.0±0.2(可通过添加2g/L的NaOH溶液来调节pH)。上述步骤中，较佳方案为称取1gKH2PO4、2.5gNaCl、0.5gMgSO4·7H2O、1g(NH4)2SO4、0.5gCaCl2。作为本专利技术的微生物发酵制备苜蓿草饲料的方法的进一步改进，米曲霉菌液的制备方法为依次进行以下步骤：①、菌种活化：称取16.6g霉菌液体培养基，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热至沸腾使霉菌液体培养基完全溶解，灭菌(121±2℃高压灭菌20±1min)，得液体培养基；吸取0.2mL米曲霉菌体悬浮液，加入至50±5mL液体培养基中，密封后(用牛皮纸和纱布对容器进行封口处理)于30±1℃培养箱中培养3～4d；得活化菌体悬浮液；霉菌液体培养基例如可选用广东环凯微生物科技有限公司生产的021070霉菌液体培养基；②、扩大培养：吸取(可用移液枪吸取)1mL活化菌体悬浮液，加入至50±5mL液体培养基中，密封后(用牛皮纸和纱布对容器进行封口处理)于30±1℃培养箱中培养(培养时间为3～4d)，直至得孢子浓度为106～107个/mL的米曲霉菌液。作为本专利技术的微生物发酵制备苜蓿草饲料的方法的进一步改进，米曲霉菌为BNCC菌种库的编号为63501-2a19米曲霉菌株。作为本专利技术的微生物发酵制备苜蓿草饲料的方法的进一步改进：所述步骤1)和步骤3)的灭菌均为121±2℃高压灭菌20±1min；所述步骤3)中的固液分离为布氏漏斗真空抽滤或者使用滤袋过滤；所述步骤3)中的干燥为在鼓风干燥箱75±10℃下烘干至含水率≤10％(质量％)。作为本专利技术的微生物发酵制备苜蓿草饲料的方法的进一步改进：所述步骤1)中的粉碎后的苜蓿草为将苜蓿草粉碎至能过50目筛。本专利技术操作简便、成本低廉、通过提高蛋白质的水解度来降低引起牛羊气胀病的风险。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步描述，但本专利技术的保护范围并不仅限于此：实施例1、一种微生物发酵制备苜蓿草饲料的方法，依次进行以下步骤：1)、先将苜蓿草粉碎至能过50目筛；然后按照3ml/g的液料比，在容器中加入上述粉碎后的苜蓿草以及营养盐溶液，密封容器口后进行灭菌(121℃灭菌20min)，然后冷却至室温，得原料液；所述营养盐溶液的制备方法为：称取1gKH2PO4、2.5gNaCl、0.5gMgSO4·7H2O、1g(NH4)2SO4、0.5gCaCl2，混合，用水溶解，定容至1L，并通过添加2g/L的NaOH溶液来调节pH至7.0。2)、制备米曲霉菌液，米曲霉菌液的制备方法为依次进行以下步骤：①、菌种活化：称取16.6g霉菌液体培养基，加入蒸馏水1L，搅拌加热至煮沸使霉菌液体培养基完全溶解，分装锥形瓶，灭菌(121℃高压灭菌20min)，得液体培养基；用移液枪吸取0.2mL米曲霉菌体，加至装有50mL液体培养基的锥形瓶中，将锥形瓶用牛皮纸和纱布封口后30℃培养箱中培养3d；得活化菌体悬浮液；霉菌液体培养基为广东环凯微生物科技有限公司生产的021070霉菌液体培养基；米曲霉菌体为BNCC菌种库的编号为63501-2a19米曲霉菌株。③、扩大培养：用移液枪吸取1mL活化菌体悬浮液本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.微生物发酵制备苜蓿草饲料的方法，其特征是包括以下步骤：1)、按照1～5ml/g的液料比，在粉碎后的苜蓿草中加入营养盐溶液，于密封条件下进行灭菌，然后冷却至室温，得原料液；2)、按照4～16ml菌液/100g苜蓿草的接种量，在原料液中加入孢子浓度为106～107个/mL的米曲霉菌液，置于26～32℃恒温振荡培养箱中发酵培养3～10天；3)、先将步骤2)所得的发酵产物灭菌，然后加水于95±10℃水提1±0.5h，所述步骤1)中的苜蓿草与水的料液比为1g/8～12ml；将水提所得物进行固液分离，所述残渣干燥后，得苜蓿草饲料。

【技术特征摘要】
1.微生物发酵制备苜蓿草饲料的方法，其特征是包括以下步骤：1)、按照1～5ml/g的液料比，在粉碎后的苜蓿草中加入营养盐溶液，于密封条件下进行灭菌，然后冷却至室温，得原料液；2)、按照4～16ml菌液/100g苜蓿草的接种量，在原料液中加入孢子浓度为106～107个/mL的米曲霉菌液，置于26～32℃恒温振荡培养箱中发酵培养3～10天；3)、先将步骤2)所得的发酵产物灭菌，然后加水于95±10℃水提1±0.5h，所述步骤1)中的苜蓿草与水的料液比为1g/8～12ml；将水提所得物进行固液分离，所述残渣干燥后，得苜蓿草饲料。2.根据权利要求1所述的微生物发酵制备苜蓿草饲料的方法，其特征是：所述营养盐溶液为：称取0.9～1.1gKH2PO4、2.3～2.7gNaCl、0.4～0.6gMgSO4·7H2O、0.9～1.1g(NH4)2SO4、0.4～0.6gCaCl2，混合，用水溶解定容至1L，调节pH至7.0±0.2。3.根据权利要求1或2所述的微生物发酵制备苜蓿草饲料的方法，其特征是米曲霉菌液的制备方法为依次进行以下步...

【专利技术属性】
技术研发人员：何怡江，
申请(专利权)人：何怡江，
类型：发明
国别省市：天津,12