受检物质的信息获取方法技术

本发明专利技术提供一种能够以高精确度获取受检物质结构的相关信息的受检物质的信息获取方法。本发明专利技术的受检物质的信息获取方法包括以下工序：让捕捉物质与试样中的受检物质结合形成复合物的工序S11～S13组成的形成工序，至少从试样选择性地回收复合物的工序S14、S15组成的回收工序，将从试样回收的复合物固定于基板的工序S16的固定工序，以及从固定于基板的复合物获取受检物质结构的相关信息的工序S17的信息获取工序。

Method for acquiring information of substances to be examined

The invention provides an information acquisition method for the inspected substance which can obtain the relevant information of the structure of the inspected substance with high accuracy. The information acquisition method of the inspected substance of the present invention includes the following processes: the forming process consisting of S11-S13, which combines the captured substance with the inspected substance in the sample to form a compound; the recovery process consisting of S14 and S15, which selectively recovers the compound from the sample, fixes the compound recovered from the sample to the base. Fixed procedure of process S16 of board and information acquisition procedure S17 of process S17 of obtaining relevant information about the structure of the substance being inspected from the compound fixed on the substrate.

【技术实现步骤摘要】
受检物质的信息获取方法
本专利技术涉及一种用于从受检物质获取信息的信息获取方法。
技术介绍
获取样本中受检物质的结构的相关信息在病理诊断和决定给药方针中是有用的。例如在阿尔茨海默病中，β-淀粉样蛋白等受检物质的结构（大小、长度、纵横比等）随着病情的发展变化，因此通过从受检物质获取结构相关信息能够确切地把握病情。以蛋白质的变性为主要原因的疾病除了阿尔茨海默病之外还能列举出亨丁顿舞蹈症，帕金森氏病、朊病毒、以及ALS（肌萎缩性侧索硬化症）。在非专利文献1中记载有以下：如图19（a）所示，向玻璃基板200上供应CSF（cerebrospinalfluid：脑脊髓液），让作为受检物质的β-淀粉样蛋白211物理吸附之后，如图19（b）所示，介由一级抗体220让标记抗体230与β-淀粉样蛋白211结合，再用超分辨率显微镜检测出图像。在先技术文献非专利文献【非专利文献1】WilliamI.Zhang，另5人，"Super-ResolutionMicroscopyofCerebrospinalFluidBiomarkersasaToolforAlzheimer'sDiseaseDiagnostics"，JournalofAlzheimer'sDisease46，2015年3月27日，p.1007―1020。
技术实现思路
专利技术要解决的技术课题在非专利文献1的方法中，如图19（a）所示，不仅是β-淀粉样蛋白211，夹杂物质212也会附着于玻璃基板200。一级抗体220和标记抗体230有时也会与附着于玻璃基板200的夹杂物质212非特异性结合。此时，如图19（b）所示，夹杂物质212会由标记抗体230标记。标记抗体230有时还会与玻璃基板200非特异性结合。此时，如图19（b）所示，玻璃基板200的一部分被标记抗体230标记。这样，不仅是β-淀粉样蛋白211，夹杂物质212和玻璃基板200等也由标记抗体230标记的话，就不能以高精确度获取作为受检物质的β-淀粉样蛋白211的结构相关信息。解决技术课题的技术方法本专利技术的第一样态涉及一种受检物质的信息获取方法。本样态所涉及的受检物质的信息获取方法具有以下工序：让捕捉物质（30、40、50）与试样（10）中的受检物质（11）结合来形成复合物（60、61）的工序（S11～S13、S21、S22），至少从试样（10）选择性地回收复合物（60、61）的工序（S14、S15、S23、S24），将从试样（10）回收的复合物（60、61）固定于基板（80）的工序（S16、S26），以及从固定于基板（80）的复合物（60）获取受检物质（11）结构的相关信息的工序（S17、S27）。试样是采自生物体的液体，例如是CSF（cerebrospinalfluid：脑脊髓液）、血液、血浆、组织液、尿等。受检物质是细胞、多肽、蛋白质、核酸、外泌体、糖链等，在本样态所涉及的受检物质的信息获取方法中宜为多聚体。受检物质例如是β-淀粉样蛋白单体聚合而成的β-淀粉样蛋白低聚物、Tau蛋白聚合而成的Tau低聚物等。“复合物的选择性回收”的概念不限于仅仅回收复合物，也包括在也含有一点点复合物以外的物质的状态下的复合物的回收。基板例如由玻璃板等构成。“受检物质结构的相关信息”能够广泛包括受检物质的大小（例如长度）、形态（例如纵横比）、结构（例如蛋白质的一级结构、二级结构、三级结构、四级结构）、化学键、聚合度等。根据本样态所涉及的受检物质的信息获取方法，从试样选择性地回收复合物，回收到的复合物固定于基板。此时，试样所含受检物质以外的物质和未形成复合物的捕捉物质等夹杂物质从复合物分离，防止其转移到基板。因此，几乎只有受检物质转移到基板并固定于其上。因此，能够以高精确度获取受检物质结构的相关信息。在本样态所涉及的受检物质的信息获取方法中，在获取受检物质（11）结构的相关信息的工序（S17、S27）中，获取受检物质（11）的大小、形态、结构、以及聚合度的至少一个。在本样态所涉及的受检物质的信息获取方法中，捕捉物质包括用于荧光标记受检物质（11）的捕捉物质（40）。即使在该捕捉物质未形成复合物的情况下，防止该捕捉物质转移到基板，因此能够防止该捕捉物质变成噪声。在本样态所涉及的受检物质的信息获取方法中，捕捉物质包括能够与固相（20）结合的捕捉物质（30）。即使在该捕捉物质未形成复合物的情况下，防止该捕捉物质转移到基板，因此能够防止该捕捉物质变成噪声。在本样态所涉及的受检物质的信息获取方法中，捕捉物质包括能够与基板（80）结合的捕捉物质（50）。即使在该捕捉物质未形成复合物的情况下，防止该捕捉物质转移到基板，因此能够防止该捕捉物质变成噪声。在本样态所涉及的受检物质的信息获取方法中，用于荧光标记受检物质（11）的捕捉物质（40）包括由荧光色素（41）标记了的抗体（42），在形成复合物（60、61）的工序（S13、S22）中，让由荧光色素（41）标记了的抗体（42）与受检物质（11）结合。这样一来，能够防止基板直接被荧光标记，因此能够以高精确度获取受检物质结构的相关信息。在本样态所涉及的受检物质的信息获取方法中，介由能够与固相（20）结合的捕捉物质（30）让固相（20）与复合物（60、61）结合之后，在从试样（10）回收复合物（60、61）的工序（S14、S15、S23、S24）中，将固相（20）选择性地分离（S14、S23）。这样一来，能够轻松地从试样选择性地回收复合物。在后段的工序中，将复合物从固相断离变得容易。此时，在从试样（10）回收复合物（60、61）的工序（S14、S15、S23、S24）中，选择性地分离固相（20）之后，让复合物（60、61）从固相（20）断离（S15、S24）。这样一来，固相不会向基板转移，因此能够以更高精确度获取受检物质结构的相关信息。另外，固相（20）包括磁性粒子（21），通过用磁力吸引磁性粒子（21）来选择性地分离固相（20）。这样一来，能够顺利地进行复合物和夹杂物质的分离。另外，能够与固相（20）结合的捕捉物质（30）包括与受检物质（11）结合的抗体（32）和与固相（20）结合的第二结合物质（31），固相（20）包括与第二结合物质（31）特异性结合的第二结合配偶体（22）。复合物（60、61）与固相（20）的结合通过受检物质（11）和能够与固相（20）结合的捕捉物质（30）的抗体（32）的结合以及第二结合物质（31）和第二结合配偶体（22）的特异性结合来进行。此时，第二结合物质（31）与第二结合配偶体（22）的组合从以下选择：抗原及其抗体、配体及其受体、寡核苷酸（Oligonucleotide）及其互补链、生物素（Biotin）、包括脱硫生物素（desthiobiotin）等生物素（Biotin）类似物在内的生物素（Biotin）类及亲和素（avidin）、包括链霉亲和素（Streptavidin）等亲和素（avidin）类似物在内的亲和素（avidin）类的组合。这样一来，能够将第二结合物质和第二结合配偶体稳定地结合。另外，第二结合物质（31）是抗半抗原（anti-hapten），第二结合配偶体（22）是抗半抗原抗体（anti-haptenantibody）。此时也能够将第二结合物质和第本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种受检物质的信息获取方法，所述方法包括以下工序：让捕捉物质与试样中的受检物质结合形成复合物的工序，至少从所述试样选择性地回收所述复合物的工序，将从所述试样回收的所述复合物固定于基板的工序，以及从固定于所述基板的所述复合物获取所述受检物质结构的相关信息的工序。

【技术特征摘要】
2017.04.13 JP 2017-0797931.一种受检物质的信息获取方法，所述方法包括以下工序：让捕捉物质与试样中的受检物质结合形成复合物的工序，至少从所述试样选择性地回收所述复合物的工序，将从所述试样回收的所述复合物固定于基板的工序，以及从固定于所述基板的所述复合物获取所述受检物质结构的相关信息的工序。2.根据权利要求1所述的受检物质的信息获取方法，其特征在于：在获取所述受检物质结构的相关信息的工序中，获取所述受检物质的大小、形态、结构和聚合度的至少一个。3.根据权利要求1所述的受检物质的信息获取方法，其特征在于：所述捕捉物质包括用于荧光标记所述受检物质的捕捉物质。4.根据权利要求1所述的受检物质的信息获取方法，其特征在于：所述捕捉物质包括能够与固相结合的捕捉物质。5.根据权利要求1所述的受检物质的信息获取方法，其特征在于：所述捕捉物质包括能够与所述基板结合的捕捉物质。6.根据权利要求3所述的受检物质的信息获取方法，其特征在于：用于荧光标记所述受检物质的所述捕捉物质包括被荧光色素标记了的抗体，在形成所述复合物的工序中，让被所述荧光色素标记了的抗体与所述受检物质结合。7.根据权利要求4所述的受检物质的信息获取方法，其特征在于：在通过能够与所述固相结合的所述捕捉物质让所述固相与所述复合物结合之后，在从所述试样回收所述复合物的工序中选择性地分离所述固相。8.根据权利要求7所述的受检物质的信息获取方法，其特征在于：在从所述试样回收所述复合物的工序中，选择性地分离所述固相之后让所述复合物从所述固相断离。9.根据权利要求7所述的受检物质的信息获取方法，其特征在于：所述固相包括磁性粒子，通过用磁力吸引所述磁性粒子来选择性地分离所述固相。10.根据权利要求7所述的受检物质的信息获取方法，其特征在于：能够与所述固相结合的所述捕捉物质包括与所述受检物质结合的抗体和与所述固相结合的第二结合物质，所述固相包括与所述第二结合物质特异性结合的第二结合配偶体，所述复合物和所述固相的结合通过所述受检物质和能够与所述固相结合的所述捕捉物质的所述抗体的结合，以及所述第二结合物质和所述第二结合配偶体的特异性结合来进行。11.根据权利要求10所述的受检物质的信息获取方法，其特征在于：所述第二结合物质和所述第二结合配偶体的组合从以下选择：抗原及其抗体、配体及其受体、寡核苷酸及其互补链、生物素、包括脱硫生物素等生物素类似物在内的生物素类及亲和素、包括链霉亲和素等亲和素类似物在内的亲和素类的组合。12.根据权利要求10所述的受检物质的信息获取方法，其特征在于：所述第二结合物质是抗半抗原，所述第二结合配偶体是抗半抗原抗体。13.根据权利要求12所述的受检物质的信息获取方法，其特征在于：所述第二结合物质是二硝基苯基，所述第二结合配偶体是抗二硝基苯基抗体。14.根据权利要求13所述的受检物质的信息获取方法，其特征在于：用二硝基苯基氨基酸来断离所述第二结合物质和所述第二结合配偶体的结合。15.根据权利要求1所述的受检物质的信息获取方法，其特征在于：所述捕捉物质包括能够与所述基板结合的捕捉物质和能够与固相结合的捕捉物质，能够与所述基板结合的所述捕捉物质和能够与所述固相结合的所述捕捉物质互不相同。16.根据权利要求15所述的受检物质的信息获取方法，其特征在于：几乎同时将能够与所述基板结合的所述捕捉物质和能够与所述固相结合的所述捕捉物质投入所述试样。17.根据权利要求1所述的受检物质的信息获取方法，其特征在于：在从所述试样回收所述复合物的工序中，基于所述复合物和夹杂物质的...

【专利技术属性】
技术研发人员：赤间健司，渡边敏弘，冈田昌也，山下和人，阿克沙伊·甘古利，岩永茂树，
申请(专利权)人：希森美康株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP