荧光图像分析装置、荧光图像的分析方法及计算机程序制造方法及图纸

本发明专利技术涉及荧光图像分析装置、荧光图像的分析方法及计算机程序。本发明专利技术使判断细胞是异常细胞与否的判断精度提高。荧光图像分析装置1具备向含将目标部位由荧光染料标记的多个细胞的试样10照射光的光源120～123，将通过照射光而发荧光的细胞的荧光图像针对每个细胞摄像的摄像部160，对由摄像部160摄像的荧光图像进行处理，取得荧光图像中的荧光的光点图案的处理部11，存储对应于多个测定项目的多个参照图案的存储部12。处理部11基于从对应于多个测定项目的多个参照图案选择对应于试样10的测定项目的参照图案，荧光图像中的荧光的光点图案和选择的参照图案而生成在试样10的判断中使用的信息。

Fluorescence image analysis device, fluorescence image analysis method and computer program

The invention relates to a fluorescence image analysis device, a fluorescence image analysis method and a computer program. The invention improves the accuracy of judging whether cells are abnormal cells or not. The fluorescence image analysis device 1 is equipped with a light source 120-123 which irradiates light to the sample 10 of a plurality of cells labeled with fluorescent dyes at the target site. The fluorescence image of the cells fluorescent by irradiation is processed for the fluorescence image taken by the camera 160 of each cell, and the fluorescence image taken by the camera 160 is obtained. The processing unit 11 of the fluorescent spot pattern in the method stores a storage unit 12 of a plurality of reference schemes corresponding to a plurality of determination items. The processing unit 11 generates information for use in the determination of sample 10 based on selecting a reference scheme corresponding to a determination item of sample 10 from a plurality of reference schemes corresponding to a plurality of determination items, a spot pattern of fluorescence in a fluorescence image and a selected reference scheme.

【技术实现步骤摘要】
荧光图像分析装置、荧光图像的分析方法及计算机程序
本专利技术涉及荧光图像分析装置、荧光图像的分析方法及计算机程序。
技术介绍
在专利文献1中记载了，在荧光原位杂交法(FISH法)的检测中应用流式细胞仪等时的细胞的处理方法。FISH法，首先，实施使荧光标记探针杂交于存在于细胞的核内的目标部位的碱基序列的预处理，对目标部位进行荧光标记。接下来，检测从荧光标记探针发生的荧光(光点)。FISH法，即使是不分裂的细胞，也可使用与染色体上的目标部位结合的荧光标记探针而检测染色体异常。再者FISH法还可检测与正常细胞混在的有染色体异常的细胞，还可分析其比例。【现有技术文献】【专利文献】【专利文献1】特表2005-515408号公报【专利技术的概要】【专利技术要解决的课题】现在由FISH法的分析主要使用荧光显微镜由人(操作者)的眼进行。操作者不得不存储在检测中使用的每个探针判断为有异常的阳性图案和判断为无异常的阴性图案。但是，现在用于用FISH法检测染色体异常的探针存在数十种，另外，在阳性图案之中，存在典型的染色体异常图案和非典型的染色体异常的图案。操作者不得不对于这些全部而掌握阳性图案和阴性图案，由FISH法的分析烦琐化。再者，由于光点的判断依赖于操作者的感觉，观察的细胞的荧光染料的光点图案是阳性图案或阴性图案的判断基准因操作者的熟练度而变，由FISH法的染色体异常的有无的判断精度的维持变得困难。鉴于现在的由FISH法的测定分析的问题，本专利技术旨在提高，光点图案是阳性图案与否的判断精度。【用于解决课题的手段】本专利技术的第1实施方式涉及荧光图像分析装置。本实施方式涉及的荧光图像分析装置(1)具备向含将目标部位由荧光染料标记的多个细胞的试样(10)照射光的光源(120～123)，每个细胞对通过照射光而发荧光的细胞的荧光图像进行摄像的摄像部(160)，对由摄像部(160)摄像的荧光图像进行处理，取得在荧光图像中的荧光的光点图案的处理部(11)。处理部(11)基于从对应于多个测定项目的多个参照图案选择对应于试样(10)的测定项目的参照图案，荧光图像中的荧光的光点图案和选择的参照图案而生成在试样(10)的判断中使用的信息。本专利技术的第2实施方式涉及对含将目标部位由荧光染料标记的多个细胞的试样(10)进行摄像而对取得的细胞的荧光图像进行分析的荧光图像的分析方法。本实施方式涉及的分析方法是，接受试样(10)的测定项目，基于从对应于多个测定项目的多个参照图案读入对应于接受的试样(10)的测定项目的参照图案，荧光图像中的荧光的光点图案和读入的参照图案而生成在试样(10)的判断中使用的信息，显示生成的在试样(10)的判断中使用的信息。本专利技术的第3实施方式涉及用于使计算机执行对含将目标部位由荧光染料标记的多个细胞的试样(10)进行摄像而取得的细胞的荧光图像的分析处理的计算机程序。本实施方式涉及的计算机程序使计算机执行接受试样(10)的测定项目的步骤，基于从对应于多个测定项目的多个参照图案读入对应于接受的试样(10)的测定项目的参照图案的步骤，荧光图像中的荧光的光点图案和读入的参照图案而生成在试样(10)的判断中使用的信息的步骤，显示生成的在试样(10)的判断中使用的信息的步骤。由本专利技术的上述第1～第3实施方式，基于每个细胞取得的荧光图像的荧光的光点图案和从对应于多个测定项目的多个参照图案之中对应于试样的测定项目的参照图案而生成在试样的判断中使用的信息，显示。从而，操作者等无存储显示有染色体异常的异常细胞的多种光点图案而判断是否是异常细胞的必要，异常细胞的判断不依赖于操作者的感觉。因此，可提高异常细胞的判断精度，结果，可提高在试样的判断中使用的信息的精度。【专利技术的效果】由本专利技术可使细胞的光点图案是有染色体异常的异常细胞的光点图案与否的判断精度提高。【附图的简单的说明】【图1】是显示荧光图像分析装置的一实施方式的构成的概略图。【图2】(a)是例示由荧光图像分析装置取得的第1图像～第3图像及明场图像的图，(b)是用于对荧光图像分析装置进行的核区域的提取进行说明的模式图，(c)及(d)是用于对荧光图像分析装置进行的光点的提取进行说明的模式图。【图3】是对处理部的动作进行说明的流程图。【图4】是对处理部的动作进行说明的流程图。【图5】是对处理部的动作进行说明的流程图。【图6】(a)～(d)各自是用于对阴性图案、阳性图案1～3的光点图案进行说明的模式图。【图7】是显示以BCR/ABL融合基因作为目标的各探针杂交的目标部位的例的图。【图8】是显示BCR/ABL融合基因的典型阳性图案的参照图案的例的图。【图9】是显示BCR/ABL融合基因的非典型阳性图案的参照图案的例的图。【图10】是显示ALK基因座的探针例的图。【图11】是显示检测与ALK基因座关联的染色体异常时的阴性图案和阳性图案的参照图案、及第5号染色体长臂(5q)缺失的染色体异常的例的图。【图12】是荧光图像分析装置的显示部的显示画面的一例。【图13】是荧光图像分析装置的显示部的显示画面的一例。【图14】是显示测定装置的其他例的构成的模式图。【图15】是显示荧光图像分析装置的其他实施方式的构成的概略图。【用于实施专利技术的形态】以下，参照附带的附图详细地说明本专利技术的实施方式。以下的实施方式是对实施使存在于细胞的核内的目标部位(目标序列)和将有与上述目标序列互补的序列的核酸序列由含荧光染料标记的核酸探针(以下，简称为探针)杂交的预处理的试样进行测定，向对于试样中的多个细胞而进行每个细胞取得的荧光图像的分析的装置及方法应用本专利技术。本实施方式的一例在例如流式细胞仪(例如，成像流式细胞仪)、荧光显微镜等中进行由荧光原位杂交(FISH)法的染色体异常的分析。在以下的实施方式中，作为一例，显示以核酸中的目标部位作为处于22号染色体的BCR基因及处于9号染色体的ABL基因，使用流式细胞仪，由FISH法，对慢性骨髓性白血病中见到的有在9号染色体和22号染色体之间的转座(BCR/ABL融合基因、也称为Philadelphia染色体的：t(9；22)(q34.12；q11.23))的细胞进行测定及分析的实施方式。在荧光图像分析装置中检测的染色体异常只要是可由(FISH)法检测，就不限制。作为染色体异常，可举转座、缺失、逆位、重复等。具体而言，例如，可举与BCR/ABL融合基因、ALK基因等的基因座关联的染色体异常。在图8、图9及图11针对每个基因显示用于判断为有染色体异常的阳性图案。另外，在以下的实施方式中，成为测定对象的细胞只要是有核细胞，就不限制。可举从例如受试者采集的受试体中的有核细胞，优选为血液受试体中的有核细胞。在本说明书等中，试样是包括含与探针杂交的目标部位的受试体来源的细胞的、供于测定的细胞悬浮液。在试样中含多个细胞。多个细胞是指至少102个以上、优选为103个以上、更优选为104个以上、再优选为105个以上、再更优选为106个以上。在本实施方式中，异常细胞是指有染色体异常的细胞。作为异常细胞的例，可举癌细胞等的肿瘤细胞。优选为，白血病等的造血器肿瘤细胞、肺癌等的癌细胞。图1显示本实施方式的荧光图像分析装置1的概略构成。图1中所示的荧光图像分析装置1具备测定装置100及处理装置200，对由利用预本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.荧光图像分析装置，其具备：向含将目标部位由荧光染料标记的多个细胞的试样照射光的光源，将通过照射上述光而发荧光的上述细胞的荧光图像针对每个细胞进行摄像的摄像部，和对由上述摄像部摄像的上述荧光图像进行处理，取得在上述荧光图像中的荧光的光点图案的处理部，上述处理部，从对应于多个测定项目的多个参照图案选择对应于上述试样的测定项目的参照图案，基于上述荧光图像中的荧光的光点图案和选择的上述参照图案而生成在上述试样的判断中使用的信息。

【技术特征摘要】
2017.04.14 JP 2017-0808551.荧光图像分析装置，其具备：向含将目标部位由荧光染料标记的多个细胞的试样照射光的光源，将通过照射上述光而发荧光的上述细胞的荧光图像针对每个细胞进行摄像的摄像部，和对由上述摄像部摄像的上述荧光图像进行处理，取得在上述荧光图像中的荧光的光点图案的处理部，上述处理部，从对应于多个测定项目的多个参照图案选择对应于上述试样的测定项目的参照图案，基于上述荧光图像中的荧光的光点图案和选择的上述参照图案而生成在上述试样的判断中使用的信息。2.权利要求1所述的荧光图像分析装置，其还具备存储对应于上述多个测定项目的多个参照图案的存储部，上述处理部从存储在上述存储部的多个参照图案选择对应于上述试样的测定项目的参照图案，生成在上述试样的判断中使用的信息。3.权利要求1或2所述的荧光图像分析装置，其中上述处理部，作为在上述试样的判断中使用的信息，生成异常细胞的数、异常细胞的数的比例、正常细胞、及正常细胞的数的比例的至少一个的信息。4.权利要求1～3之任一项所述的荧光图像分析装置，其中上述处理部通过对上述荧光图像中的荧光的光点图案和对应于上述试样的测定项目的参照图案进行比较，判断上述试样中所含的多个细胞中的每个是异常细胞与否，基于判断上述多个细胞中的每个的判断结果，生成在上述试样的判断中使用的信息。5.权利要求1～4之任一项所述的荧光图像分析装置，其中上述测定项目是选自BCR/ABL融合基因、AML1/ETO(MTG8)融合基因、PML/BARα融合基因、TEL/AML1融合基因、ALK基因、第5号染色体长臂缺失、第7号染色体长臂缺失、及第20号染色体长臂缺失的至少一种。6.权利要求2～5之任一项所述的荧光图像分析装置，其中上述测定项目以与上述目标部位杂交的每个探针进一步进行分类，在上述存储部中，上述参照图案针对每个上述探针进行存储。7.权利要求6所述的荧光图像分析装置，其中上述处理部基于下列图案而生成在上述试样的判断中使用的信息：上述荧光图像中的荧光的光点图案、和从对应于多个测定项目的多个参照图案对应于上述试样的上述测定项目的上述探针而选择的参照图案。8.权利要求6或...

【专利技术属性】
技术研发人员：山田和宏，松本翔平，小西雄介，
申请(专利权)人：希森美康株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP