可同时测定三高人群用保健食品中45种违禁药品的液质联用法制造技术

本发明专利技术具体涉及一种可同时测定三高人群用保健食品中45种违禁药品的液质联用法，属于保健品中违法添加的化学药品的测定技术领域。该方法采用5mmol·L‑1乙酸铵溶液和乙腈在Agilent Eclipse Plus C18柱上进行梯度洗脱，流速为0.2mL·min‑1；质谱采用电喷雾离子源正负离子模式将样品离子化，并用多反应监测模式对45种化学药物进行测定。300批样品中共检出3批阳性样品，检出物分别是苯乙双胍、格列本脲、氢氯噻嗪和氨氯地平。本发明专利技术的方法检出容量较大，可以在一定程度上避免违禁药物的漏检，适用范围更广，具有较好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
可同时测定三高人群用保健食品中45种违禁药品的液质联用法
本专利技术属于保健品中违法添加的化学药品的测定
，具体涉及一种可同时测定三高人群用保健食品中45种违禁药品的液质联用法。
技术介绍
高血糖、高血脂、高血压俗称“三高”，这三者构成代谢综合征的主体，同时随着年龄的增长，代谢综合征的发病率会越来越高。另一方面，高血压、高血脂和高血糖三者可能单独存在，也可能相互关联。如高血糖患者很容易同时患上高血脂，而高血脂又是动脉硬化形成和发展的主要因素，动脉硬化又导致血管弹性差引起高血压。所以，为了降低患这些慢性疾病的概率，人们日益关注声称具有辅助降血压、降血脂以及降血糖的一些三高人群用保健食品。不法分子为了吸引顾客、获得更大的经济利益，铤而走险，在保健食品中违法添加化学药品的现象屡禁不止；目前，我国颁布的打击相应保健食品违法添加化学药品的国家标准都是按单一类别制定。部分熟悉药理药效的高智商不法分子，为了规避相关法规限制，存在跨适应症违法添加化学药品的情况。如主要适用于降血糖的二甲双胍、格列本脲等临床一线降血糖用处方药，被监管部门作为辅助降血糖类保健食品中易违法添加的化学药品而严格监控，但是未收入辅助降血脂类保健食品的易违法添加化学药品目录。二甲双胍、格列本脲等也可以间接缓解血脂浓度，将其违法加入到辅助降血脂类保健食品中，既可以提升功效，又可以规避监管。鉴于上述目的，本申请将易添加至辅助降血糖、辅助降血脂、辅助降血压类保健食品中化学药品放在同一方法中同时测定，避免漏检，可以一定程度上扩大对违法添加化学药品的打击面。目前国家针对辅助降血糖类保健食品中的违法添加有3个标准(含13种化学药物)、辅助降血脂类保健食品有1个标准(3种化学药物)、辅助降血压类保健食品有2个标准(含12种化学药物)，6个标准共涵盖28种违法添加化学药物。本申请将上述6个国家标准中的28种化学药品纳入同一标准进行研究；另根据文献报道，杜彦山等报道曾检出违法添加的那格列奈，朱青霞等报道曾检出违法添加的盐酸普萘洛尔等，故本文另选取文献报道有检出或者根据药品疗效及可获得性、添加可能性较大的化学药品，总计45种，进行同时测定研究。目前针对违法添加的检测方法主要有薄层色谱法、液相色谱法、液质联用法，由于液质联用法具有较好的定性定量能力，故本申请拟建立一个能同时检测高血糖、高血脂、高血压类违法添加化学药品的、大容量液质联用方法。并采用该法对300批辅助降血糖、辅助降血脂、辅助降血压类保健食品进行了测定。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足而提供一种可同时测定三高人群用保健食品中45种违禁药品的液质联用法，该方法可同时测定三高人群用保健食品中违法添加的45种化学药品，并涵盖28种现有国家标准规定检测的目标化合物。本专利技术技术方案如下：可同时测定三高人群用保健食品中45种违禁药品的液质联用法，包括如下步骤：步骤一，建立色谱条件与质谱条件；步骤二，S21：制备对照品溶液，将各对照品精密称定，分别用甲醇或乙腈配制成单标储备溶液，备用；将各单标储备溶液混合后，用乙腈溶液稀释成一系列不同浓度的混合标准溶液；S22：制备供试品溶液：称取依次服用量的样品，混匀，加入甲醇溶液，超声后冷却，定容，过有机滤膜后待测若为软胶囊样品则离心后取上清液过滤；若初试为阳性结果样品，则再取样品最小剂量单位五份，混匀，精密称取，加入甲醇溶液，超声后冷却，定容，若为软胶囊样品则后续离心，再取上清液用乙腈溶液稀释后过有机滤膜后待测；步骤三，S31：取混合对照品溶液在步骤一种建立的色谱和质谱条件下进样，分析得到总离子流图；S32：取步骤S21项下混合标准溶液，并在步骤一建立的色谱和质谱条件下进样分析，以各目标物的峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线；取软胶囊阴性样品作为空白基质，加入适量混合标准溶液，按步骤S22制备溶液，以一定的信噪比计算方法检出限；S33：取软胶囊空白基质分别添加低浓度、中浓度和高浓度的混合标准溶液，并在步骤一建立的色谱和质谱条件下进样分析，重复测定数次，RSD为0.5％～9.7％；S34：取软胶囊空白基质分别添加低浓度、中浓度和高浓度的混合标准溶液，并在步骤一建立的色谱和质谱条件下24h内连续进样分析，RSD为1.0％～9.9％；S35：取软胶囊、片剂、硬胶囊、茶剂空白基质，分别添加低浓度、中浓度、高浓度水平的标准溶液，平行测定数次，回收率为63.8％～129.5％；S36：按步骤S22所述方法对收集到的样品进行前处理，并在步骤一建立的色谱和质谱条件下进样分析。更进一步地，所述色谱条件为：色谱柱：AgilentEclipsePlusC18柱(100mm×2.1mm，1.8μm)；流速：0.2mL·min-1；柱温：35℃；进样量：1μL；流动相A：5mmol·L-1乙酸铵溶液(用甲酸调节pH至3.0)；流动相B：乙腈；梯度洗脱程序：0～10min，5％B→40％B；10～15min，40％B→40％B；15～25min，40％B→65％B；25～30min，65％B→95％B；30～31min，95％B→5％B；31～35min，5％B→5％B。更进一步地，所述质谱条件为：采用ESI源正负离子同时扫描的多反应监测模式，干燥气温度250℃，干燥气流量6L·min-1，鞘气温度350℃，鞘气流量11L·min-1；毛细管电压：正3500V，负4000V；喷嘴电压：正1500V，负1500V。更进一步地，步骤S21中，所述对照品为格列本脲、盐酸二甲双胍、马来酸罗格列酮、盐酸苯乙双胍、格列齐特、甲苯磺丁脲、格列美脲、格列喹酮、瑞格列奈、格列波脲、盐酸吡格列酮、盐酸丁二胍、洛伐他汀、烟酸、辛伐他汀、美伐他汀、盐酸哌唑嗪、氢氯噻嗪、硝苯地平、卡托普利、盐酸可乐定、尼索地平、马来酸氨氯地平、尼莫地平、那格列奈、氯磺丙脲、氟伐他汀钠、苯扎贝特、非诺贝特、盐酸普萘洛尔、盐酸维拉帕米、米诺地尔、酒石酸美托洛尔、厄贝沙坦、布美他尼、盐酸尼卡地平、盐酸特拉唑嗪、富马酸比索洛尔、替米沙坦、格列吡嗪、阿替洛尔、利血平、非洛地平、尼群地平或去羟基洛伐他汀。更进一步地，步骤S21中，将各对照品精密称定，分别用甲醇配制成1.0mg·mL-1或0.3mg·mL-1的单标储备溶液，或分别用乙腈配制成1.0mg·mL-1的单标储备溶液。更进一步地，步骤S21中，将对照品格列本脲、盐酸二甲双胍、马来酸罗格列酮、盐酸苯乙双胍、格列齐特、甲苯磺丁脲、格列美脲、格列喹酮、瑞格列奈、格列波脲、盐酸吡格列酮、盐酸丁二胍、洛伐他汀、烟酸、辛伐他汀、美伐他汀、盐酸哌唑嗪、氢氯噻嗪、硝苯地平、卡托普利、盐酸可乐定、尼索地平、马来酸氨氯地平、尼莫地平、那格列奈、氯磺丙脲、氟伐他汀钠、苯扎贝特、非诺贝特、盐酸普萘洛尔、盐酸维拉帕米、米诺地尔、酒石酸美托洛尔、厄贝沙坦、布美他尼、盐酸尼卡地平、盐酸特拉唑嗪、富马酸比索洛尔和替米沙坦用甲醇配制成1.0mg·mL-1的单标储备溶液，将格列吡嗪、阿替洛尔、利血平、非洛地平、尼群地平用甲醇配制成0.3mg·mL-1的单标储备溶液；将去羟基洛伐他汀用乙腈配制成1.0mg·mL-1的单标储备溶液。更进一步地，步骤S22中，精密称取一次服用量的样品，必要时研细，混匀，置于20本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.可同时测定三高人群用保健食品中45种违禁药品的液质联用法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，建立色谱条件与质谱条件；步骤二，S21：制备对照品溶液，将各对照品精密称定，分别用甲醇或乙腈配制成单标储备溶液，备用；将各单标储备溶液混合后，用乙腈溶液稀释成一系列不同浓度的混合标准溶液；S22：制备供试品溶液：称取依次服用量的样品，混匀，加入甲醇溶液，超声后冷却，定容，过有机滤膜后待测若为软胶囊样品则离心后取上清液过滤；若初试为阳性结果样品，则再取样品最小剂量单位五份，混匀，精密称取，加入甲醇溶液，超声后冷却，定容，若为软胶囊样品则后续离心，再取上清液用乙腈溶液稀释后过有机滤膜后待测；步骤三，S31：取混合对照品溶液在步骤一种建立的色谱和质谱条件下进样，分析得到总离子流图；S32：取步骤S21项下混合标准溶液，并在步骤一建立的色谱和质谱条件下进样分析，以各目标物的峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线；取软胶囊阴性样品作为空白基质，加入适量混合标准溶液，按步骤S22项制备溶液，以一定的信噪比计算方法检出限；S33：取软胶囊空白基质分别添加低浓度、中浓度和高浓度的混合标准溶液，并在步骤一建立的色谱和质谱条件下进样分析，重复测定数次，RSD为0.5％～9.7％；S34：取软胶囊空白基质分别添加低浓度、中浓度和高浓度的混合标准溶液，并在步骤一建立的色谱和质谱条件下24h内连续进样分析，RSD为1.0％～9.9％；S35：取软胶囊、片剂、硬胶囊、茶剂空白基质，分别添加低浓度、中浓度、高浓度水平的标准溶液，平行测定数次，回收率为63.8％～129.5％；S36：按步骤S22所述方法对收集到的样品进行前处理，并在步骤一建立的色谱和质谱条件下进样分析。...

【技术特征摘要】
1.可同时测定三高人群用保健食品中45种违禁药品的液质联用法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，建立色谱条件与质谱条件；步骤二，S21：制备对照品溶液，将各对照品精密称定，分别用甲醇或乙腈配制成单标储备溶液，备用；将各单标储备溶液混合后，用乙腈溶液稀释成一系列不同浓度的混合标准溶液；S22：制备供试品溶液：称取依次服用量的样品，混匀，加入甲醇溶液，超声后冷却，定容，过有机滤膜后待测若为软胶囊样品则离心后取上清液过滤；若初试为阳性结果样品，则再取样品最小剂量单位五份，混匀，精密称取，加入甲醇溶液，超声后冷却，定容，若为软胶囊样品则后续离心，再取上清液用乙腈溶液稀释后过有机滤膜后待测；步骤三，S31：取混合对照品溶液在步骤一种建立的色谱和质谱条件下进样，分析得到总离子流图；S32：取步骤S21项下混合标准溶液，并在步骤一建立的色谱和质谱条件下进样分析，以各目标物的峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线；取软胶囊阴性样品作为空白基质，加入适量混合标准溶液，按步骤S22项制备溶液，以一定的信噪比计算方法检出限；S33：取软胶囊空白基质分别添加低浓度、中浓度和高浓度的混合标准溶液，并在步骤一建立的色谱和质谱条件下进样分析，重复测定数次，RSD为0.5％～9.7％；S34：取软胶囊空白基质分别添加低浓度、中浓度和高浓度的混合标准溶液，并在步骤一建立的色谱和质谱条件下24h内连续进样分析，RSD为1.0％～9.9％；S35：取软胶囊、片剂、硬胶囊、茶剂空白基质，分别添加低浓度、中浓度、高浓度水平的标准溶液，平行测定数次，回收率为63.8％～129.5％；S36：按步骤S22所述方法对收集到的样品进行前处理，并在步骤一建立的色谱和质谱条件下进样分析。2.根据权利要求1所述的可同时测定三高人群用保健食品中45种违禁药品的液质联用法，其特征在于，所述色谱条件为：色谱柱：C18柱；流速：0.2mL·min-1；柱温：35℃；进样量：1μL；流动相A：5mmol·L-1乙酸铵溶液，用甲酸调节pH至3.0；流动相B：乙腈；梯度洗脱程序：0～10min，5％B→40％B；10～15min，40％B→40％B；15～25min，40％B→65％B；25～30min，65％B→95％B；30～31min，95％B→5％B；31～35min，5％B→5％B。3.根据权利要求1所述的可同时测定三高人群用保健食品中45种违禁药品的液质联用法，其特征在于，所述质谱条件为：采用ESI源正负离子同时扫描的多反应监测模式，干燥气温度250℃，干燥气流量6L·min-1，鞘气温度350℃，鞘气流量11L·min-1；毛细管电压：正3500V，负4000V；喷嘴电压：正1500V，负1500V。4.根据权利要求1所述的可同时测定三高人群用保健食品中45种违禁药品的液质联用法，其特征在于，步骤S21中，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：周明昊，寿林均，程巧鸳，胡磊，颜琳琦，吴鸳鸯，刘晨晨，张丽媛，王任，王欢，陈岑，戚绿叶，严俊，
申请(专利权)人：浙江省食品药品检验研究院，
类型：发明
国别省市：浙江,33