一种海参多肽制造技术

本发明专利技术公开了一种海参多肽，其制备方法包括：预处理、发酵、酶解、超滤，首先将海参浸泡回软后匀浆，加入发酵增效剂得发酵基质，在发酵基质中接种入米曲霉、酿酒酵母菌进行发酵培养并经微孔滤膜得发酵液，在发酵液中加入中性蛋白酶进行酶解，酶解液经除杂后超滤得海参多肽。有益效果为：海参多肽具有四段不同分子量，不仅仅避免了发酵液中活性多肽的浪费，还可以更加精细化、区别化地研究各个分子量区间段多肽的生物学活性，海参多肽具有清除自由基、抗氧化损伤、降血糖、改善糖耐量等生理学功效，海参多肽的制备工艺简单、得率与纯度较高，发酵与酶解过程大大提高了海参多肽的产量与产率。

【技术实现步骤摘要】
一种海参多肽
本专利技术涉及海参深加工领域，尤其是涉及一种海参多肽。技术背景海参，属海参纲（Holothuroidea），是生活在海边至8000米的海洋棘皮动物，距今已有六亿多年的历史，海参以海底藻类和浮游生物为食。海参全身长满肉刺，广布于世界各海洋中。中国南海沿岸种类较多，约有二十余种海参可供食用。海参同人参、燕窝、鱼翅齐名，是世界八大珍品之一。海参不仅是珍贵的食品，也是名贵的药材。据《本草纲目拾遗》中记载：海参，味甘咸，补肾，益精髓，摄小便，壮阳疗痿，其性温补，足敌人参，故名海参。海参具有提高记忆力、延缓性腺衰老，防止动脉硬化以及抗肿瘤等作用。随着海参价值知识的普及，海参逐渐进入百姓餐桌。生活环境决定海参品质。海参能调节人体水份平衡，适宜于孕期腿脚浮肿的女士。东泽旗舰店海参消除疲劳，提高人体免疫力，增强人体抵抗疾病的能力，因此非常适合经常处于疲劳状态的中年女士与男士，易感冒、体质虚弱的老年人和儿童等亚健康人群。海参中的牛磺酸、赖氨酸等在植物性食品中几乎没有。海参特有的活性物质海参素，对多种真菌有显著的抑制作用，刺参素A和B可用于治疗真菌和白癣菌感染，具有显著的抗炎、成骨作用，尤其对肝炎患者、结核病、糖尿病、心血管病有显著的治疗作用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种海参多肽，海参多肽具有四段不同分子量，具有清除自由基、抗氧化损伤、降血糖、改善糖耐量等生理学功效，海参多肽的制备工艺简单、得率与纯度较高，发酵与酶解过程大大提高了海参多肽的产量与产率。本专利技术方法中所用到的微生物及其所购买企业为：米曲霉，保定微农生物科技有限公司；酿酒酵母菌，烟台曼森商贸有限公司。本专利技术针对
技术介绍
中提到的问题，采取的技术方案为：一种海参多肽，其具有四段不同分子量的多肽，分别为T1（>10kDa）、T2（10～3kDa）、T3（3～1kDa）与T4（<1kDa），海参多肽的主要氨基酸组成为甘氨酸和丙氨酸，海参多肽对DPPH、·OH和·O2-具有较好的清除效果，同时海参多肽可以显著降低血清和肝脏中总胆固醇、甘油三酯的浓度，还可以促进NIH/3T3细胞生长，对NIH/3T3细胞胶原蛋白的分泌有显著的促进作用，还具有一定的抗氧化损伤能力、降低血糖、改善糖耐量的功效。作为优选，海参多肽的制备方法包括：预处理、发酵、酶解、超滤，具体包括以下步骤：预处理：先用清水将海参洗净，再用清水浸泡8～12h至海参回软，以流水冲洗3～5min后晾干，按料液比1:10～12匀浆，低温干燥至含水量为35～45%，按照海参干重0.2～0.4%加入发酵增效剂，混合均匀即得发酵基质；将海参泡软可使海参内部的泥沙、污物、部分盐分渗出，有利于对其进行进一步的处理；发酵：取发酵基质质量4～5%的米曲霉种子液、2～4%的酿酒酵母菌种子液接种入发酵基质中，在140～160r/min转速、28～30℃温度条件下发酵培养48～72h；发酵结束后，将发酵液煮沸8～10min灭酶，8600～10000r/min离心15～30min，上清液过0.2～0.25μｍ微孔滤膜，滤液即为发酵液；在此发酵条件下，海参糖原回收率和蛋白回收率分别可达85%和90％，蛋白质水解为多肽后，变成了易于吸收、溶解性好、乳化性好、具有多种生理活性的发酵液，改善了蛋白质的功能特性，提高了蛋白质的营养及利用价值，利用混合菌发酵可以发挥多种菌种间的协同作用，可以降低单菌发酵的劣势，菌种间可能产生共生作用，代谢产物发生互补效应，能够克服中间产物过多对抗菌肽生成的不利因素，海参蛋白制备活性多肽的成本更低，发酵反应较温和，发酵过程易控；酶解：将发酵液低温干燥至含水量为75～80%，添加3000～4500U/g中性蛋白酶，再加入中性蛋白酶重量1.5～2.3‰的(R)-1,1’-联萘-2,2’-酚基二异丙氧钛，在酶解温度为55～58℃、酶解pH值为7.2～7.4的条件下酶解1.5～2.0h，酶解结束后煮沸12～15min灭酶得酶解液；(R)-1,1’-联萘-2,2’-酚基二异丙氧钛能够作用于蛋白酶的金属原子活性中心，降低蛋白酶与底物之间的能量壁垒，增大酶与底物之间的反应活性，从而大大提高蛋白酶的酶解活性，加速酶解，使海参蛋白的水解度可达到58％以上，提高了海参多肽的产量与产率，具有较高的推广价值；超滤：取酶解液依次加入活性炭、DA201-C大孔树脂吸附油脂、杂质颗粒并脱盐，后用400～500目滤袋过滤除去吸附剂，再加入弗罗里硅土结合板式过滤机过滤除掉活性炭和多余油脂，得到更澄清的酶解液；用截留分子量为10KDa、3KDa、1kDa的超滤膜分级过滤发酵液，得到四段不同分子量的多肽混合液组分T1（>10kDa）、T2（10～3kDa）、T3（3～1kDa）与T4（<1kDa），浓缩后分别在温度为-10～-20℃、真空度为50～100Pa下冷冻干燥48～60h即得四段不同分子量的海参多肽纯品；将酶解液通过三种超滤膜进行超滤，得到四段不同分子量的多肽混合液，不仅仅避免了发酵液中活性多肽的浪费，还可以更加精细化、区别化地研究各个分子量区间段多肽的生物学活性；海参多肽的主要氨基酸组成为甘氨酸和丙氨酸，海参多肽对DPPH、·OH和·O2-具有较好的清除效果，同时海参多肽可以显著降低血清和肝脏中总胆固醇、甘油三酯的浓度，还可以促进NIH/3T3细胞生长，对NIH/3T3细胞胶原蛋白的分泌有显著的促进作用，还具有一定的抗氧化损伤能力、降低血糖、改善糖耐量的功效。作为优选，预处理步骤中的发酵增效剂包含下列含量的物质：65～80%尿素、2～6%α-萘乙酸钠、15～20%氧化钙、3～7%硫酸镁、1～5%磷酸二甲酯，总量为100%；发酵增效剂中特殊配比的α-萘乙酸钠与磷酸二甲酯具有协同作用，该协同作用可以促使酿酒酵母菌增强对乙酰辅酶A的分泌，进而增进其与草酰乙酸的缩合反应，加快柠檬酸的合成，可以大幅度提高酿酒酵母菌三羧酸循环的速度，加快酿酒酵母菌的生长繁殖与发酵代谢，促使酿酒酵母菌代谢出更多的酶与发酵底物作用，进而提高海参多肽的产率与产量。与现有技术相比，本专利技术的优点在于：1）本专利技术方法可以得到四段不同分子量的多肽混合液，不仅仅避免了发酵液中活性多肽的浪费，还可以更加精细化、区别化地研究各个分子量区间段多肽的生物学活性；2）采用混菌发酵可以发挥多种菌种间的协同作用，降低单菌发酵的劣势，菌种间可能产生共生作用，代谢产物发生互补效应，能够克服中间产物过多对抗菌肽生成的不利因素，因此有利于多肽的产率与产量的提高；3）发酵时发酵增效剂中特殊配比的α-萘乙酸钠与磷酸二甲酯具有协同作用，可以强化酿酒酵母菌分泌乙酰辅酶A，进而增强其与草酰乙酸的缩合反应，加快柠檬酸的合成，大幅度提高酿酒酵母菌三羧酸循环的速度，加快酿酒酵母菌的生长繁殖与发酵代谢，促使酿酒酵母菌代谢出更多的酶与发酵底物作用，进而提高多肽的产率与产量；4）对发酵液进行酶解时，(R)-1,1’-联萘-2,2’-酚基二异丙氧钛能够作用于蛋白酶的金属原子活性中心，降低蛋白酶与底物蛋白质之间的能量壁垒，增大酶与底物蛋白质之间的反应活性，从而大大提高蛋白酶的酶解活性，加速酶解，使海参蛋白的水解度可达到58％以上，具有较高的推广价值。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种海参多肽，其特征在于：所述海参多肽的制备方法包括：预处理：先用清水将海参洗净，再用清水浸泡至海参回软，流水冲洗后晾干，按料液比1:10～12匀浆，低温干燥至含水量为35～45%，按照海参干重0.2～0.4%加入发酵增效剂，混合均匀即得发酵基质；发酵：取米曲霉种子液、酿酒酵母菌种子液接种入发酵基质中发酵；发酵结束后煮沸灭酶，离心取上清液过微孔滤膜，滤液即为发酵液；酶解：将发酵液低温干燥至含水量为75～80%，添加中性蛋白酶、(R)‑1,1’‑联萘‑2,2’‑酚基二异丙氧钛酶解，酶解结束后煮沸灭酶得酶解液；超滤：取酶解液除杂后得到澄清的酶解液,用截留分子量为10KDa、3KDa、1kDa的超滤膜分级过滤发酵液，得到四段不同分子量的多肽混合液组分：T1为>10kDa，T2为10～3kDa，T3为3～1kDa，T4为

【技术特征摘要】
1.一种海参多肽，其特征在于：所述海参多肽的制备方法包括：预处理：先用清水将海参洗净，再用清水浸泡至海参回软，流水冲洗后晾干，按料液比1:10～12匀浆，低温干燥至含水量为35～45%，按照海参干重0.2～0.4%加入发酵增效剂，混合均匀即得发酵基质；发酵：取米曲霉种子液、酿酒酵母菌种子液接种入发酵基质中发酵；发酵结束后煮沸灭酶，离心取上清液过微孔滤膜，滤液即为发酵液；酶解：将发酵液低温干燥至含水量为75～80%，添加中性蛋白酶、(R)-1,1’-联萘-2,2’-酚基二异丙氧钛酶解，酶解结束后煮沸灭酶得酶解液；超滤：取酶解液除杂后得到澄清的酶解液,用截留分子量为10KDa、3KDa、1kDa的超滤膜分级过滤发酵液，得到四段不同分子量的多肽混合液组分：T1为>10kDa，T2为10～3kDa，T3为3～1kDa，T4为<1kDa；浓缩后冷冻干燥即得海参多肽纯品。2.根据权利要求1所述的一种海参多肽，其特征在于：所述预处理步骤中，发酵增效剂包含下列含量的物质：65～80%尿素、2～6%α-萘乙酸钠、15～20%氧化钙、3～7%硫酸镁、1～5%磷酸二甲酯，总量为100%。3.根据权利要求1所述的一种海参多肽，其特征在于：所述发酵步...

【专利技术属性】
技术研发人员：周艳初，
申请(专利权)人：金华市艾力生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33