一种牡蛎肽的提取方法技术

本发明专利技术公开了一种牡蛎肽的提取方法，将牡蛎肉去除内脏后匀浆，先加入活性干酵母和阿拉伯糖脱腥、然后加入β‑环糊精进行处理，调节脱腥牡蛎肉匀浆pH值后加入复合蛋白酶进行恒温酶解，酶解结束后灭酶，离心上清液过滤，冷冻干燥，即得牡蛎肽。有益效果为：本发明专利技术制备方法具有投入低、操作简单、蛋白质降解效果好、牡蛎肽得率高、感官接受度较高的优势，易于工业化规模生产，得到的牡蛎肽的分子量分布均匀，分子量范围在4000‑6000的牡蛎肽含量大于87%，具有良好的应用价值和市场潜力。

【技术实现步骤摘要】
一种牡蛎肽的提取方法
本专利技术涉及生物活性成分
，特别涉及一种牡蛎肽的提取方法。
技术介绍
牡蛎（oyster）是属于软体动物门双壳纲珍珠贝目的曲蛎科和牡蛎科（Ostreidae，真牡蛎）或燕蛤科（Aviculidae，珍珠牡蛎）的双壳类软体动物，又名蚝、海蛎子、蛎黄、蛎蛤或牡蛤。牡蛎是世界上第一大养殖贝类，在世界范围内已发现的牡蛎品种有100种左右，牡蛎也是我国重要海洋贝类，在我国沿海分布的牡蛎有20多种，主要有近江牡蛎、大连湾牡蛎、太平洋牡蛎（长牡蛎）（Crassostreagigas）及密鳞牡蛎。我国是牡蛎养殖大国，牡蛎资源极为丰富。近年来，我国牡蛎产量呈现增长趋势，然而仅仅依靠传统加工技术生产牡蛎产品己无法满足现在社会对牡蛎产业的发展需要，更无法满足广大消费者对高品质牡蛎产品的需求。故以牡蛎为原料，采用先进加工技术生产富含多种活性物质的牡蛎功能性保健产品或药物，具有广阔的发展前景，己成为国内外研究的热点。研究牡蛎精深加工和综合利用技术不仅能促进牡蛎加工产业的健康发展，同时也能为我国现代水产品精深加工行业的发展提供一定的理论基础，还可为企业创造更大的经济效益。牡蛎的壳和软体都具有较高的利用价值，充分利用牡蛎软体和牡蛎壳开发功能牡蛎产品，具有重要的社会价值和经济价值。牡蛎软体干物质中蛋白质含量高达50%，且氨基酸组成完善，为优质蛋白质。但国内生产过程中多采用传统繁杂的分离技术及工艺方法，使产品的活性成分含量相对较低。为充分利用其营养成分及生理活性物质，需要释放出具有活性的蛋白及肽段，将一些“惰性蛋白”转变为“活性肽”。蛋白酶反应条件温和，不会破坏氨基酸等营养物质，且反应过程易于控制，在牡蛎加工过程中得到广泛应用。牡蛎蛋白质经蛋白酶水解后生成许多小分子肤和氨基酸，不仅有利于人体吸收，提高蛋白质的利用率，而且还能提取活性物质。现有技术如授权公告号为CN104694606B的中国专利技术专利，公开了一种用复合酶水解牡蛎蛋白制备小分子肽的方法，具体为：(1)将牡蛎洗净，加入水和无花果蛋白酶，进行酶解，取牡蛎肉；(2)将牡蛎肉打碎，加入水，搅拌均匀，得到牡蛎浆液；(3)再加入复合酶，酶解，灭酶，得到酶解液；(4)将酶解液进行超滤，冷冻干燥，得到牡蛎小分子肽。该方法工艺简单，易于操作，酶解机械去壳，节省时间，缩短了生产周期，制备得到的蛋白肽为小分子肽，分子量小，活性高。但是该小分子肽腥味较重，感官接受度较差，极大限制了此类功能因子在保健品、药品领域中的应用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种具有投入低、操作简单、蛋白质降解效果好、牡蛎肽得率高、感官接受度较高的优势，得到的牡蛎肽的分子量分布均匀的牡蛎肽的提取方法。本专利技术针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：一种牡蛎肽的提取方法，将牡蛎肉去除内脏后匀浆，先加入活性干酵母和阿拉伯糖脱腥、然后加入β-环糊精进行处理，调节脱腥牡蛎肉匀浆pH值后加入复合蛋白酶进行恒温酶解，酶解结束后灭酶，离心上清液过滤，冷冻干燥，即得牡蛎肽。该制备方法具有投入低、操作简单、蛋白质降解效果好、牡蛎肽得率高、感官接受度较高的优势，易于工业化规模生产，得到的牡蛎肽的分子量分布均匀，分子量范围在4000-6000的牡蛎肽含量大于87%，具有良好的应用价值和市场潜力。作为优选，脱腥处理的具体步骤为：将匀浆中加入活性干酵母和阿拉伯糖，在38-43℃下脱腥20-30min，然后加入牡蛎肉重量5-8%的β-环糊精，在温度为60-70℃、超高压为300-400MPa的条件下超高压脱腥处理10-20min，即得脱腥牡蛎肉匀浆。活性干酵母疏松的结构对腥臭物质有吸附作用，同时活性干酵母含有多种酶，该步骤中先用活性干酵母将腥臭物质转化为无腥臭物质，腥臭物质如醛、酮等大分子物质被细胞聚积，然后再利用β-环状糊精的包埋作用除去残留的酵母发酵味和发酵酸及残留的腥味，达到更优的除腥效果，提高目标产物的感官接受度。作为优选，活性干酵母的添加量为牡蛎肉重量0.8-1.3%，阿拉伯糖的添加量为牡蛎肉重量0.1-0.3%。阿拉伯糖的存在能够为活性干酵母提供能耗，提高醇脱氢酶和醛脱氢酶的代谢量，将腥味物质E-2-癸烯醛转化成E-2-癸烯醇和E-2-癸烯酸，提高脱腥效果和目标产物的品质，同时能避免活性干酵母消耗蛤蜊蛋白，提高目标产物的产量，且能使得牡蛎肽的分子量分布均匀。作为优选，阿拉伯糖中含有4.3-4.6%的D-阿拉伯糖。阿拉伯糖中D-阿拉伯糖的特殊存在，使得牡蛎中不同结构的蛋白均对压力均很敏感，使牡蛎蛋白分子的构造发生改变，发生变性，使得内部的酶切位点暴露，易于被蛋白酶酶切，同时牡蛎生长环境使自身所含微生物数量大，蛋白酶解过程中温和的条件利于微生物生长繁殖，将对产品的品质和得率产生不利影响，而D-阿拉伯糖配合超高压作用可以改变微生物的细胞渗透压，灭杀此类微生物，提高牡蛎肽的得率和品质。作为优选，匀浆中牡蛎肉和水的重量比为1:7-10。作为优选，酶解的具体步骤为：调节脱腥牡蛎肉匀浆的pH至7.5-8.5，按加酶量为3-4%加入复合蛋白酶，再加入复合蛋白酶重量2-2.6%的十八酸钠和0.3-0.5%的四丁基溴化铵，然后在30-40℃下酶解8-12h，即得酶解液。十八酸钠和四丁基溴化铵的特殊存在不仅能够作用于牡蛎蛋白的疏水区，提高牡蛎蛋白在牡蛎肉匀浆中的分散性和稳定性，提高牡蛎蛋白和蛋白酶的接触机会，进而提高酶解速率和牡蛎肽得率，而且能切开糖蛋白的糖苷键，使糖原降解，进而使得蛋白酶快速识别得到除去糖原的蛋白进行酶解，最终提高牡蛎肽的得率，且得到的牡蛎肽的分子量分布均匀，分子量范围在4000-6000的牡蛎肽含量大于87%。作为优选，复合蛋白为中性蛋白酶和味蛋白酶，其重量比为1:2.3-2.7。采用中性蛋白酶和风味蛋白酶复合水解，能从不同的氨基酸位点进行酶切，从而产生大量的活性多肽，同时酶之间因具有协同增效作用而导致加强效应，相应产生的多肽片段功能会进一步增强，最终提高蛋白的酶解效率、酶解液中多肽的含量和活性多肽的活性。作为优选，过滤的具体步骤为：将酶解液经截留分子量为8-12kDa的超滤膜进行超滤，获得8-12kDa以下的肽混合物，再经200-400Da的纳滤膜纳滤，获得200-400Da以上的浓缩肽液，冷冻干燥即得牡蛎肽。由于蛋白质的微生物酶解物成分比较复杂，既有未充分水解的蛋白质大分子，也有分子量大小不等的肽和游离的氨基酸，该步骤分离属于物理方式，没有引入化学试剂，较好的保存了胶原蛋白肽的原有特性，且对酶解液具有较好分离纯化效果。与现有技术相比，本专利技术的优点在于：1）本专利技术制备方法具有投入低、操作简单、蛋白质降解效果好、牡蛎肽得率高、感官接受度较高的优势，易于工业化规模生产，得到的牡蛎肽的分子量分布均匀，具有良好的应用价值和市场潜力；2）该制备方法脱腥效果优异，提高牡蛎肽的感官接受度，脱腥过程中能使牡蛎蛋白内部的酶切位点暴露，易于被蛋白酶酶切，可改变微生物的细胞渗透压，灭杀此类微生物，提高牡蛎肽的得率和品质；3）该制备方法能提高牡蛎蛋白和蛋白酶的接触机会，能切开糖蛋白的糖苷键，使糖原降解，提高酶解速率和牡蛎肽得率，且得到分子量范围在4000-6000的牡蛎肽含量大于87%。具体实施方式下面通过实施例对本发本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种牡蛎肽的提取方法，其特征在于：将牡蛎肉去除内脏后匀浆，先加入活性干酵母和阿拉伯糖脱腥、然后加入β‑环糊精进行处理，调节脱腥牡蛎肉匀浆pH值后加入复合蛋白酶进行恒温酶解，酶解结束后灭酶，离心上清液过滤，冷冻干燥，即得牡蛎肽。

【技术特征摘要】
1.一种牡蛎肽的提取方法，其特征在于：将牡蛎肉去除内脏后匀浆，先加入活性干酵母和阿拉伯糖脱腥、然后加入β-环糊精进行处理，调节脱腥牡蛎肉匀浆pH值后加入复合蛋白酶进行恒温酶解，酶解结束后灭酶，离心上清液过滤，冷冻干燥，即得牡蛎肽。2.根据权利要求1所述的一种牡蛎肽的提取方法，其特征在于：所述脱腥处理的具体步骤为：将匀浆中加入活性干酵母和阿拉伯糖，在38-43℃下脱腥20-30min，然后加入牡蛎肉重量5-8%的β-环糊精，在温度为60-70℃、超高压为300-400MPa的条件下超高压脱腥处理10-20min，即得脱腥牡蛎肉匀浆。3.根据权利要求1所述的一种牡蛎肽的提取方法，其特征在于：所述活性干酵母的添加量为牡蛎肉重量0.8-1.3%，所述阿拉伯糖的添加量为牡蛎肉重量0.1-0.3%。4.根据权利要求1所述的一种牡蛎肽的提取方法，其特征在于：所述阿拉伯糖中含有4.3-4.6...

【专利技术属性】
技术研发人员：周艳初，
申请(专利权)人：金华市艾力生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33