一株分离的链霉菌NBF715在制备植物线虫杀虫剂中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一株分离的链霉菌NBF715在制备植物线虫杀虫剂中的应用，申请人首次发现链霉菌可用于防治各种线虫，与目前使用化学合成农药防治相比，由于其来自于自然环境，具有高效、低毒、不污染环境和不易产生抗药性等优点，具有广阔的应用前景。

Application of a separate Streptomyces NBF715 in the preparation of plant nematode insecticides

The invention discloses the application of a separated Streptomyces NBF715 in the preparation of plant nematode insecticides. The applicant first discovers that Streptomyces can be used to control various nematodes. Compared with the current use of chemically synthesized pesticides, because it comes from the natural environment, it has high efficiency, low toxicity, no pollution of the environment and is not easy to produce drug resistance. It has broad application prospects.

【技术实现步骤摘要】
一株分离的链霉菌NBF715在制备植物线虫杀虫剂中的应用
本专利技术属于农作物防治
，具体涉及一株分离的链霉菌NBF715在制备植物线虫杀虫剂中的应用。
技术介绍
植物寄生线虫在引起植物侵染性病害的四大病原中危害仅次于真菌，超过细菌和病毒。根结线虫(Meloidogynespp.)和孢囊线虫是其中的重要类群。根结线虫在世界范围内广泛发生，其寄主范围广，常常造成作物的大面积减产，给农业生产造成巨大损失，据估测，全世界每年由此造成的农作物损失约500亿美元。大豆胞囊线虫病是严重危害大豆产量和品质的土传病害。该病害发生的特点是分布广、为害重、传播途径多，一般减产10％-30％，严重地块可达70％-90％，甚至绝产。化学防治是目前防治根结线虫病最有效的方法，根据其使用方式，杀线虫剂主要分为熏蒸剂和非熏蒸剂。熏蒸剂需要施入到一定深度的土壤中，以气体的形式向上下扩散，因对土壤有较强的穿透力，在压低初侵染虫口方面具有显著优势。但该类药剂多为灭生性药剂，严重影响土壤中的有益生物，若使用不当，易对当茬作物产生药害，且对施药技术要求较高。非熏蒸剂灌根使用易造成线虫抗药性，同时污染环境并造成农药残留。生产上急需更为安全有效方法。生物防治作为一种安全有效的手段在作物线虫防治得到了广泛的应用，其可以提高产品品质，长期使用还可以起到很好的改良土壤作用，为农业的可持续发展提供保障，开发新型生物杀线虫剂具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一株分离的链霉菌NBF715在制备预防或杀灭线虫的药剂中的应用，所述的链霉菌NBF715的保藏编号为CCTCCNO:M2017414。本专利技术还有一个目的在于提供了链霉菌NBF715发酵液有效成分在制备预防或杀灭线虫的药剂中的应用，所述的链霉菌NBF715发酵液有效成分为勃利霉素。为了达到上述目的，本专利技术采取以下技术方案来实现：一株分离的链霉菌NBF715在制备预防或杀灭线虫的药剂中的应用，包括利用本专利技术的常规手段将链霉菌NBF715制备成线虫杀虫剂或线虫防治剂，或是与其他辅料或有效成分一起制备成种子处理剂，所述的链霉菌NBF715的保藏编号为CCTCCNO:M2017414。以上所述的应用中，优选的，用于制备成预防线虫的种子处理剂；以上所述的应用中，优选的，用于制备成种子处理剂时，包括种衣剂：所有组分在高剪切乳化机剪切后用砂磨机研磨处理。以上所述的应用中，优选的，当用于制备成种子处理剂时，包括拌种剂：所有组分在砂磨机研磨混合即可。以上所述的应用中，优选的，所述的线虫包括蔬菜根结线虫，大豆孢囊线虫。与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：(1)本专利技术提供了一种淡紫褐链霉菌，该菌株首次被报道可用于防治作物线虫病，与现有杀线虫剂无交互抗药性。(2)与目前使用化学合成农药防治相比，由于其来自于自然环境，具有高效、低毒、不污染环境和不易产生抗药性等优点。具体实施方式为了更好地解释本专利技术，以下结合具体实施例进一步阐明本专利技术的主要内容，但本专利技术的内容不仅仅局限于以下实施例。本专利技术所述技术方案，如未特别说明，均为本领域的常规技术，所述试剂或材料，如未特别说明，均来源于商业渠道。实施例1：淡紫褐链霉菌(Streptomycesenissocaesilis)NBF715的获得及鉴定一株分离的链霉菌，从恩施鹤峰县土壤分离得到，经16srDNA结合生理生化鉴定后属于淡紫褐链霉菌(Streptomycesenissocaesilis)，已于2017年7月7日送至中国典型培养物保藏中心进行保藏，分类命名：淡紫褐链霉菌(Streptomycesenissocaesilis)NBF715；保藏编号为CCTCCNO:M2017414；地点：中国，武汉，武汉大学。在本专利技术中，淡紫褐链霉菌(Streptomycesenissocaesilis)NBF715或被简称为NBF715。形态特征：菌落圆形，边缘光滑，表面致密。气生菌丝银灰色，基内菌丝软木黄色，菌落圆形，无色素。孢子丝呈直链状分布，孢子卵圆形或椭圆形。菌株生理生化特性：菌株NBF715生理生化特性-酶活、碳源氧化+：阳性反应；-：阴性反应；W：弱阳性反应菌株NBF715生理生化特性-利用碳源产酸+：阳性，-：阴性；w：弱阳性实施例2：淡紫褐链霉菌(Streptomycesenissocaesilis)NBF715的发酵：淡紫褐链霉菌(Streptomycesenissocaesilis)NBF715种子液的制备：包括将斜面保存菌种在ISP-2平板活化，挑取接种至100毫升种子培养基中，在28℃，160转/分的摇床上培养4天；即得种子液。种子培养基配方为：1L培养基中包括20g甘露醇，10g大豆蛋白胨，0.35g磷酸二氢钾，0.5g碳酸钙，豆油20μL，其余为水。固体发酵：将淡紫褐链霉菌(Streptomycesenissocaesilis)NBF715种子液按10％接于固体培养基中，装样量为20％，30℃培养10d即可，按照此方法获得的培养物的浓度是5*1010个孢子/克，即为NBF715菌剂，用于以下实施例。所述的固体发酵培养基为：83％麸皮，3％葡萄糖，5％硝酸钾，3％磷酸氢二钾，3％氯化钠，3％碳酸钙，以上配方混合后加水搅拌混匀，料水比为10:6，所述的百分比为质量百分比。液体发酵：将淡紫褐链霉菌(Streptomycesenissocaesilis)NBF715种子液按5％量接种于发酵培养基，温度为28℃，发酵罐的搅拌速度500转/分，发酵培养基的装量为罐体容积的60％，发酵5天即可，即为NBF715发酵液，用于以下实施例。所述的发酵培养基的配方包括：甘露醇3％、大豆蛋白胨3％、酵母粉0.3％、碳酸钙0.5％、氯化钠0.5％；pH值6.5-7.5，其余为水，所述的百分比为质量百分比。。实施例3：淡紫褐链霉菌(Streptomycesenissocaesilis)NBF715防治番茄根结线虫试验于2017年9月于番茄连作温室大棚内进行，处理1为移栽番茄时穴施NBF715菌剂，用量为3g/穴，随后覆土并浇定根水。处理2为移栽后灌NBF715发酵液，用量为200mL/棵，对照不做药剂处理。每处理4个小区，3次重,复，每小区20m2。正常农事管理，施药后14周在各小区随机取15株番茄，调查植株病级。分级标准：0级，0-5％根有根结；1级，6％-20根有根结；2级，21％-45％根有根结；3级，46％-70％根有根结；；4级，71％-85％根有根结；5级，86％-100％根有根结；：根结指数＝∑(各级植株数×级别)/(调查总株数×最高代表级别)×100。防治效果＝(对照根结指数-处理根结指数)/对照根结指数×100％表1NBF715菌剂和发酵液对番茄根结线虫防治效果实施例4：淡紫褐链霉菌(Streptomycesenissocaesilis)NBF715种子处理剂防治大豆孢囊线虫试验于2017年5月于连作大豆田进行，处理1为拌种剂和大豆1:30(重量比)拌种，处理2为悬浮种衣剂1:30(重量比)进行大豆包衣，对照不做处理。每处理4个小区，3次重复，每小区20m2。试验采取随机区组5次重复的方法。每个处理5行区，5m行长，行距0.65m，小区面积16.25m2，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株分离的链霉菌在制备预防或杀灭线虫的药剂中的应用，所述的链霉菌为淡紫褐链霉菌（Streptomyces enissocaesilis）NBF715；保藏编号为CCTCC NO: M2017414。

【技术特征摘要】
1.一株分离的链霉菌在制备预防或杀灭线虫的药剂中的应用，所述的链霉菌为淡紫褐链霉菌（Streptomycesenissocaesilis）NBF715；保藏编号为CCTCCNO:M2017414。2.链霉菌发酵液有效成分在制备预防或杀灭线虫的药剂中的应用，所述的链霉菌发酵液有效成分为勃利霉素，所述的链霉菌为淡紫褐链霉菌（Streptomycesenissocaesilis）NBF715；保藏编号为CCTCCNO:M2017414。3.一株分离的链霉菌在制备种子处理剂中的应用，所述的链霉菌为淡紫褐链霉菌（Streptomycesenissocaesilis）NBF715；保藏编号为CCTCCNO:M2017...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄大野，万中义，曹春霞，张亚妮，刘晓艳，王开梅，姚经武，朱志刚，
申请(专利权)人：湖北省生物农药工程研究中心，
类型：发明
国别省市：湖北,42